TAQ-RO

Taq DNA Polymerase, 5 U/μl

optimum pH ~9.0 (20 °C), optimum reaction temp. 72 °C

• Synonym(e): DNA-Amplifikation, PCR, Polymerase, PCR, Primer-Extension, DNA-Amplifikation, Primer-Extension
• UNSPSC Code: 41106300
• EG-Nummer: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Specific activity: 5 U/μL
• Biological source: bacterial (Thermus aquaticus)
• Recombinant: expressed in E. coli

Eigenschaften

• biological source: bacterial (Thermus aquaticus)
• recombinant: expressed in E. coli
• grade: Molecular Biology
• form: liquid
• usage: sufficient for ≤1,000 reactions (11146173001), sufficient for ≤10,000 reactions (11435094001), sufficient for ≤2,000 reactions (11418432001), sufficient for ≤5,000 reactions (11596594001), sufficient for ≤200 reactions (11146165001)
• specific activity: 5 U/μL
• mol wt: 95 kDa
• packaging: pkg of 1,000 U (11418432001 [4 x 250 U]), pkg of 2,500 U (11596594001 [10 x 250 U]), pkg of 5,000 U (11435094001 [20 x 250 U]), pkg of 100 U (11146165001), pkg of 500 U (11146173001 [1 x 500 U])
• manufacturer/tradename: Roche
• parameter: 72 °C optimum reaction temp.
• technique(s): DNA sequencing: suitable, PCR: suitable
• color: colorless
• optimum pH: ~9.0 (20 °C)
• solubility: water: miscible
• suitability: suitable for molecular biology
• NCBI accession no.: AAA27507
• UniProt accession no.: P19821
• application(s): genomic analysis; life science and biopharma
• foreign activity: Nicking activity 30 units, none detected, Ribonuclease 30 units, none detected, Unspecific endonucleases 30 units, none detected
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Taq DNA Polymerase ist eine hochprozessive 5′→3′ DNA-Polymerase ohne 3′→5′ Exonuklease-Aktivität. Es handelt sich um eine einzelne Polypeptidkette mit einem Molekulargewicht von etwa 95 kDa.
Taq DNA Polymerase wurde ursprünglich aus dem thermophilen Eubakterium Thermus aquaticus BM isoliert, einem Stamm, dem die Taq-I-Restriktionsendonuklease fehlt. Dieses Enzym wurde in E.coli geklont.

Application

Taq DNA Polymerase kann für eine einfache, routinemäßige PCR verwendet werden. Die Taq DNA Polymerase von Roche Applied Science wird nach strengen Reinheits- und Qualitätsstandards hergestellt. Diese Zubereitung rekombinanter Taq DNA Polymerase kann verwendet werden für:

• PCR
• RT-PCR[1]
• qPCR[2][3]
• Andere Primer-Extensionsreaktionen wie Sequenzierung und Markierung

Features and Benefits

Zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse:
Hohe Konsistenz zwischen den Chargen.
Es ist nicht erforderlich, jede Charge zu testen:
Taq DNA Polymerase wird strengen Tests unterzogen.
Vermeiden von PCR-Verschleppungen
Der Einbau von dUTP in Kombination mit Uracil-DNA-Glycosylase verhindert eine PCR-Kreuzkontamination.

Packaging

1 Kit mit 2 Komponenten

Analysis Note

Routine-Assays haben mittelgroße Amplikons und einen GC-Gehalt von 50 %. Taq DNA Polymerase hat keine Heißstart- oder Korrekturlesefunktion. Sie ist bei +75 °C und einem pH-Wert von 9 optimal aktiv.
Fehlende Restriktionsendonuklease:
Dem ursprünglich aus T. aquaticus BM isolierten Enzym fehlt die Taq-I-Restriktionsendonuklease-Aktivität. Jede Charge wird mittels PCR unter Verwendung von λDNA getestet. Jede Charge wird auch gemäß den aktuellen Qualitätskontrollverfahren auf das Fehlen von Exo- und Endonukleasen sowie auf Nicking-Aktivitäten getestet.

Other Notes

Eine Einheit Taq DNA Polymerase ist definiert als die Enzymmenge, die innerhalb von 60 min bei +65 °C unter den oben angegebenen Assay-Bedingungen 10 nmol der gesamten Desoxyribonukleosidtriphosphate in Säure-fällbare DNA einbaut.

Assay: Inkubationspuffer:
67 mM Tris/HCl; pH 8,3/25 °C, 5 mM MgCl₂, 10 mM Mercaptoethanol, 0,2 % Polydocanol, 0,2 mg/ml Gelatine, je 0,2 mM dATP, dGTP, dTTP und 0,1 mM dCTP.

Inkubationsverfahren:
M13mp9ss, M13-Primer (17mer) und 1 μCi (α^-32P) dCTP werden mit geeigneten Verdünnungen von Taq DNA Polymerase in 50 μl Inkubationspuffer bei +65 °C für 60 Minuten inkubiert. Die Menge der eingebauten dNTPs wird durch Trichloressigsäureausfällung bestimmt.

Volumenaktivität: 5 U/μl

Nur für die Life Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Legal Information

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt Patentansprüchen innerhalb der USA und den entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch auf die Anwendung einer patentierten Methode oder ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist ausschließlich für Verwendungen in der Forschung vorgesehen. Diagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen erhalten Sie durch Kontaktaufnahme mit dem Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Nur Kit-Komponenten

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Sicherheitshinweise

• hcodes: H412
• pcodes: P273 - P501
• Hazard Classifications: Aquatic Chronic 3
• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2
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