MABT879

Anti-Thrombospondin-1-Antikörper, Klon 133

clone 133, from mouse

• Synonym(e): Thrombospondin-1, THBS-1, TSP-1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 133, monoclonal
• Application: ELISA, IHC, Neutral, WB
• Citations: 1

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 133, monoclonal
• species reactivity: rat, human
• technique(s): ELISA: suitable, immunohistochemistry: suitable (paraffin), neutralization: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• NCBI accession no.: NP_003237
• UniProt accession no.: P07996
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... THBS1(7057)

Beschreibung

General description

Thrombospondin-1 (UniProt: P07996; auch bezeichnet als THBS-1, TSP-1) wird beim Menschen durch das Gen THBS1 (auch bezeichnet als THBS, TSP, TSP1; Gen-ID: 7057) kodiert. Thrombospondin-1 (TSP-1) gehört zur TSP-Familie der Calcium-bindenden extrazellulären Matrixproteine. Die TSP-Familie besteht aus homotrimerem TSP-1 und TSP-2 sowie homopentamerem TSP-3, TSP-4 und TSP-5/COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein). TSP-1 wird an der Schadstelle induziert und fungiert als Aktivator von latentem TGF-β. Die TSP-1-Bindung verändert die Konformation des latenten TGF-β-Komplexes und aktiviert TGF-β biologisch, was wiederum auch eine TSP-1-Expression induzieren kann. TSP-1 vermittelt die Proliferation von Fibroblasten und glatten Muskelzellen, während es die Proliferation von Endothelzellen hemmt. TSP-1 kann auch sowohl als Adhäsionsprotein als auch als Antihaftmolekül dienen, was sich in seiner Fähigkeit zeigt, eine Trennung fokaler Adhäsionen von Endothelzellen zu bewirken. TSP-1 wird zunächst mit einer Signalpeptidsequenz (a.a. 1-18) erzeugt, deren Entfernung das reife Protein (a.a. 19-1170) ergibt. Strukturell besteht das TSP1-Monomer aus einer N-terminalen Heparin-bindenden Region (a.a. 47-95) und einer Laminin-G-ähnlichen Domäne (a.a. 65-270), gefolgt von einer Oligomerisierungsdomäne (a.a. 259-311), einer Procollagen- oder VWFC-Domäne (a.a. 316-95), drei Properdin- oder Typ-I-Wiederholungen (a.a. 349-429, 435-490 und 492-547), zwei EGF-ähnlichen Domänen (a.a. 547-587 und 646-690), acht Typ-III-Wiederholungen oder einem Calcium-Drahtmodul (a.a. 691-954) und einem C-terminalen Lektin-ähnlichen globulären Modul oder einer G-Domäne (a.a. 958-170).

~129 kDa gemessen.

Immunogen

Alkali-gestripptes humanes Thrombozyten-Thrombospondin-1 (sTSP-1).

Epitop: Calcium-bindende Typ-3-Wiederholungen.

Application

Forschungskategorie
Zellstruktur

Forschungsunterkategorie
EZM-Proteine

Weisen Sie Thrombospondin 1 mittels dieses Anti-Thrombospondin-1-Antikörpers (Klon 133) nach, der für die Verwendung in Western Blotting, Immunhistochemie (Paraffin), Neutralisationstest und ELISA validiert wurde.

Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine upregulierte Expression von Thrombospondin-1 (TSP-1) in kultivierten primären vaskulären Zellen der glatten Muskulatur (VSMCs) der Ratte nach Behandlung mit Edelstahl(SS)-Ionen oder aktivem TGF-β nachgewiesen (Pallero, M.A. et al. (2010). J. Vasc. Res. 47(4):309-322).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden humanes Full-Length-Thrombospondin-1 (hTSP-1) sowie die C-terminalen hTSP-1-Fragmente E3CaG (a.a. 648-1170), E3Ca (a.a. 648-945) und Ca (a.a. 692-1) mittels reduzierenden oder nichtreduzierenden Western Blots nachgewiesen, jedoch kein hTSP-2, kein TSP-1 der Maus (mTSP-945) und kein mTSP-2 (Annis, D.S., et al. (2006). J. Thromb. Haemost. 4(2):459-468).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde upreguliertes Thrombospondin-1 (TSP-1) in humanen Pankreas-Panc-1-Karzinomzellen bei siRNA-mediiertem k-Ras-Knockdown nachgewiesen (Fleming, J.B., et al. (2005). Mol. Cancer Res. 3(7):413–423).
Immunhistochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde in Paraffinschnitten humaner Koronararterien von Patienten, denen entweder ein medikamentenfreisetzender Taxus- oder Cypher-Stent implantiert wurde, eine erhöhte Immunreaktivität von Thrombospondin-1 (TSP-1) in vaskulären Geweben nachgewiesen, die aufgrund einer In-Stent Restenose (ISR) Stentmaterialien umgaben (Pallero, M.A. et al. (2010). J. Vasc. Res. 47(4):309–322).
Neutralisationsanalyse: Mit repräsentativen Chargen wurde verhindert, dass Alkali-gestripptes humanes Thrombozyten-Thrombospondin-1 (sTSP-1) die von kultivierten NMuMG-Brustdrüsen-Epithelzellen der Maus oder von Zellen des bovinen Aorta-Endothels (BAE) sezernierte latente Form von TGF-beta aktivieren konnte, ohne die durch die reife/aktive Form von TGF-beta induzierte zelluläre Signalgebung zu beeinflussen (Alcaraz, L.B., et al. (2014). J. Cell Biol. 205(3):409–428; Annis, D.S., et al. (2006). J. Thromb. Haemost. 4(2):459–468; Schultz-Cherry, S. und Murphy-Ullrich J.E. (1993). J. Cell Biol. 122(4):923–932).
Neutralisationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde die durch Edelstahlionen induzierte TGF-β-Signalgebung in kultivierten primären vaskulären glatten Muskelzellen (VSMCs) der Ratte gehemmt, worauf die unterdrückte Induktion des synthetischen/myofibroblastischen Proteins ED-A FN hinwies (Pallero, M.A., et al. (2010). J. Vasc. Res. 47(4):309-322).
ELISA-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden humanes Full-Length-Thrombospondin-1 (hTSP-1) sowie die C-terminalen hTSP-1-Fragmente E3CaG (a.a. 648-1170) und E3Ca (a.a. 648-945) mittels direkten ELISAs/ELISAs ohne Sandwich-Methode nachgewiesen, jedoch kein hTSP-2, kein TSP-1 der Maus (mTSP-945) und kein mTSP-2 (Annis, D.S., et al. (2006). J. Thromb. Haemost. 4(2):459–468).

Biochem/physiol Actions

Klon 133 reagierte mit humanem Thrombospondin-1 (hTSP-1), jedoch nicht mit hTSP-2, Maus-TSP-1 (mTSP-1) oder mTSP-2. Mit Klon 133 wurden das C-terminale 50-kDa-Chymotrypsin-Fragment des isolierten TSPs sowie die der Kalzium-bindende Typ-3-Wiederholungsregion (a.a. 692–945) enthaltende rekombinante Fragmente nachgewiesen (Annis, D.S., et al. (2006). J. Thromb. Haemost. 4(2):459–468; Schultz-Cherry, S. und Murphy-Ullrich J.E. (1993). J. Cell Biol. 122(4):923-932).

Physical form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG2bκ-Antikörper in PBS ohne Konservierungsmittel.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot in humanem aufgereinigtem Thrombospondin-1.

Western-Blot-Analyse: Mit 0,1 µg/ml dieses Antikörpers wurde Thrombospondin-1 in 0,1 µg humanem aufgereinigtem Thrombospondin-1 nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

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