MABF973

Anti-Proteinase-3/PR3-Antikörper, Klon MCPR3-3

clone MCPR3-3, from mouse

• Synonym(e): Myeloblastin, AGP7, C-ANCA antigen, Leukocyte proteinase 3, Neutrophil proteinase 4, NP-4, P29, PR-3, PR3, Wegener autoantigen
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: MCPR3-3, monoclonal
• Application: ELISA, FACS, WB
• Citations: -

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: MCPR3-3, monoclonal
• species reactivity: human
• technique(s): ELISA: suitable, flow cytometry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_002768
• UniProt accession no.: P24158
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... PRTN3(5657)

Beschreibung

General description

Myeloblastin (EG 3.4.21.76; UniProt P24158; auch als AGP7, C-ANCA-Antigen, Leukozytenproteinase 3, Neutrophilproteinase 4, NP-4, P29, PR-3, PR3, Wegener-Autoantigen bekannt) wird beim Menschen vom PRTN3 (auch als CANCA, MBN, NP4 bekannt)-Gen (Gen-ID 5657) kodiert. Proteinase 3 (PR3) ist eine von vier neutralen Serinproteasen (Elastase, Cathepsin, PR3 und Neutrophilserinprotease 4), die als vollständig verarbeitete, reife Enzyme in Azurgranulum von menschlichen Neutrophilen gespeichert werden. Anstatt nach ihrer Synthese auf Granula gerichtet zu werden, landen einige PR3-Moleküle an der Oberfläche der neutrophilen Plasmamembran, entweder in Pro- oder reifer Form. Das Maß einer solchen Oberflächenexpression wird genetisch bestimmt, doch die Oberflächenexposition und perizelluläre Aktivität von PR3 um Neutrophile kann durch Neutrophil-Priming und -Aktivierung weiter hochreguliert werden. Der PR3-Antikörper (Anti-Neutrophile zytoplasmatische Antikörper oder ANCA) ist die wichtigste pathogene Eigenschaft bei Patienten, die an Granulomatose mit Polyangiitis (GPA; vormals Wegener-Granulomatose) leiden. ANCA aktivieren Zytokin-geprimte Neutrophile in vitro durch eine Vernetzung von oberflächenexponierten PR3- und Fcγ-Rezeptoren. Die PR3-Aktvität und/oder ihre Inaktivierung durch alpha-1-Antitrypsin/alpha-1-Proteinaseinhibitor (α1PI) variiert bei der menschlichen Population und trägt zum Risiko für GPA-Manifestationen, entweder beim Auftreten, während Rückfällen oder während der systemischen Progression, bei. PR3 wird zunächst mit einer Signalpeptidsequenz (AS 1–25), einer N-terminalen und einer C-terminalen Propeptidsequenz (AS 26–27 bzw. 249–256) produziert, deren Entfernung das reife Enzym ergibt (AS 28–248).

~ 29 kDa beobachtet. 27,81 kDa (Pro-PR3; AS 1–256), 25,14 kDa (N-terminales Signal und Propeptid entfernt; AS 28–256), 24,25 kDa (reif; AS 28–248) berechnet.

Immunogen

Epitop: Auf der gegenüberliegenden Seite (der Rückseite) der Substrat- und α1-PI-Bindungsstelle (der Vorderseite) (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).

Gereinigte menschliche Neutrophil-PR3.

Application

Der Anti-Proteinase-3-Antikörper, Klon MCPR3-3, ist ein Antikörper gegen PR3 zur Verwendung in ELISA, Durchflusszytometrie und Western Blot.

Forschungskategorie
Entzündung & Immunologie

Forschungsunterkategorie
Entzündungs- & Autoimmunmechanismen

Western-Blot-Analyse: 4 µg/ml aus einer repräsentativen Charge erkannten 2–5 µg gereinigte PR3 aus humanen Neutrophilen sowie 1 µg sowohl der Proform als auch der reifen Form von rekombinanter humaner PR3 unter nicht reduzierenden Bedingungen (mit freundlicher Genehmigung von Amber Hummel, Mayo Clinic, Rochester, MN).
Western-Blot-Analyse: 2–8 µg/ml aus einer repräsentativen Charge wiesen unter nicht reduzierenden Bedingungen 5 µg gereinigte PR3 aus humanen Neutrophilen nach, während nach Probenreduktion eine stark verringerte Reaktivität beobachtet wurde (mit freundlicher Genehmigung von Amber Hummel, Mayo Clinic, Rochester, MN).
Durchflusszytometrie-Analyse: Eine repräsentative Charge band an immobilisierte rekombinante humane PR3 über ein anderes Epitop als die von den Klonen MCPR3-2 und MCPR3-7 (Art.-Nr. MABT340 bzw. MABT403) erkannten Epitope, wie durch die FACS-Analyse des Bead-basierten Konkurrenz-Bindungstests festgestellt wurde (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).
Durchflusszytometrie-Analyse: Eine repräsentative Charge band mit rekombinantem menschlichem PR3, aber nicht mit murinem PR3 beschichtete TALON-Beads, wie durch FACS-Analyse bestimmt. (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).
ELISA-Analyse: Eine repräsentative Charge wurde auf einer Well-Oberfläche immobilisiert und zum Einfangen von rekombinanter humaner PR3 verwendet. Anschließend wurde ein Affinitäts-Pull-down von PR3-Autoantikörpern (Anti-Neutrophile zytoplasmatische Antikörper oder ANCA) aus Patientenserumproben durch das eingefangene PR3 durchgeführt und die gebundenen ANCA anschließend durch mit alkalischer Phosphatase konjugiertem Anti-Human-IgG der Ziege nachgewiesen. (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308; Sun, J., et al. (1998). J. Immunol. Methods. 211(1-2):111-123).

Biochem/physiol Actions

Der Klon MCPR3-3 konkurrierte mit PR3-aktivitätsneutralisierenden Autoantikörpern (neutralisierenden ANCAs) um die PR3-Bindung. Die Verhältnisse der OD-Werte, die mit dem PR3-komplexierten Klon MCPR3-2 (Art.-Nr. MABT340) erhalten wurden, zu den entsprechenden ODs, die mit dem PR3-komplexierten Klon MCPR3-3 in ELISA-basierten Serum-ANCA-Messungen erhalten wurden, korrelieren gut mit der neutralisierenden Aktivität von ANCAs in Serumproben von Patienten (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).

Physical form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG1κ-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Preparation Note

Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Analysis Note

Identitätsbestätigung durch Isotypenprüfung.

Isotypenanalyse: Die Identität dieses monoklonalen Antikörpers wurde durch Isotypenprüfung als IgG1κ bestätigt.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Disclaimer

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