MABC604

Anti-MLKL-Antikörper, Klon 3H1

clone 3H1, from rat

• Synonym(e): Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 3H1, monoclonal
• Application: ICC, IP, WB
• Citations: 123

Eigenschaften

• biological source: rat
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 3H1, monoclonal
• species reactivity: mouse
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NP_083281
• UniProt accession no.: Q9D2Y4
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: mouse ... Mlkl(74568)

Beschreibung

General description

MLKL (mixed lineage kinase domain-like protein) wird vom Gen MLKL codiert; dieses interessante Protein ist erforderlich für die Ausführung programmierter Nekrose oder Nekroptose, beispielsweise in Reaktion auf TNF-α-induzierte Nekrose. MLKL ist ein Bestandteil des „Nekrosoms“, also des Multiproteinkomplexes, der den Tumornekrosefaktor (TNF)-induzierten Zelltod durch Nekroptose auslöst. Für die von TNF-α induzierte programmierte Nekrose sind auch die Aktivitäten der Rezeptor-interagierenden Serin-/Threonin-Kinasen RIP1 und RIP3 erforderlich, die ebenfalls direkt mit dem Protein MLKL interagieren. Für die Nekroptose ist RIP3 eine essenzielle vorgeschaltete Kinase. Die Pseudokinase MLKL fungiert als Substrat von RIP3 für die Vermittlung nachgeschalteter Signalwege; bei einer Komplexbildung mit MLKL wird der RIP3-MLKL-Komplex mittels AMP-PNP stabilisiert und geht in eine inaktive Konformation über.

~52 kDa gemessen. 54,48/30,28 (Isoform 1/2 des Menschen) und 54,32/53,38 kDa (Isoform 1/2 der Maus) berechnet. In manchen Zelllysaten können uncharakterisierte Bänder auftreten.

Immunogen

Epitop: Brace-Region.

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz der Helix-Linker-Region (Brace) entspricht, die das N-Terminal mit der Pseudokinase-Domäne von Maus-MLKL verbindet (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Application

Dieser Anti-MLKL-Antikörper, Klon 3H1, ist zur Verwendung mit Immunzytochemie, Immunpräzipitation und Western Blot für den Nachweis von MLKL validiert.

Immunzytochemische Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF) des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (mit freundlicher Genehmigung von Prof. James M. Murphy, Walter and Eliza Hall Institute, Australien).

Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde MLKL aus einem löslichen Extrakt dermaler Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen immungefällt, die eine Doxycyclin-induzierbare Maus-MLKL-Expression des Wildtyps nur nach, nicht aber vor der Behandlung mit Doxycyclin enthielten (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde die durch eine Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) induzierte Translokation des N-terminalen MLKL-Fragments von Maus und Pferd (a.a. 1–180 bzw. 1–189) detektiert, das in dermalen Fibroblasten von Mlkl-/- Mäusen exogen exprimiert wird (Tanzer, M.C., et al. (2016). Cell Death Differ. Im Druck).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies MLKL in menschlichen HT-29- und U937-Zellen nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265).

Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Membrantranslokation in dermalen Fibroblasten von Mäusen (MDF) nach einer Behandlung mit Q-VD-OPh (TSQ; Best.- Nr. 551476) nach (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255–265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).

Western-Blot-Analyse: Repräsentative Chargen wiesen die MLKL-Expression in L292-Mausfibroblasten sowie in dermalen Fibroblasten der Maus (MDF), im embryonalen Fibroblasten der Maus (MEF) und in Knochenmarksmakrophagen (BMDM) von Mäusen des Wildtyps nach, nicht aber bei Mlkl-/- Mäusen (Cook, W.D. et al., 2014). Cell Death Differ. 21(10):1600–1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies rekombinantes Maus-MLKL in voller Länge sowie a.a. 1–180 und a.a. 124–464, nicht aber a.a. 1–125 oder a.a. 179–464 MLKL-Fragmente nach (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072–15077).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies eine MLKL-Expression in allen getesteten Geweben von Wildtyp-Mäusen mit Ausnahme des Gehirns nach, während kein Gewebe von Mlkl-/- Mäusen eine Zielbande ergab (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443–453).

Physical form

Aufgereinigtes Ratten-IgG in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH 7,4); 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot in Herzgewebe-Lysat von Mäusen.

Western-Blot-Analyse: 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wiesen MLKL in 10 µg Herzgewebe-Lysat von Mäusen nach.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable