MAB353

Anti-Nestin-Antikörper, Klon 401 (Ratte)

clone rat-401, Chemicon^®, from mouse

• Synonym(e): rat401
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: rat-401, monoclonal
• Application: ICC, IHC (p), WB
• Citations: 503

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: rat-401, monoclonal
• species reactivity: mouse, rat
• should not react with: human
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable, western blot: suitable

Beschreibung

General description

200–220 kDa

Nestin ist ein großes Intermediärfilament-Protein (Typ VI), das während der Entwicklung in Muskel-Sehnen-Übergängen und neuromuskulären Endplatten exprimiert wird. Die Nestin-Expression ist beschränkt und endet normalerweise im Embryonalstadium E18. Nestin wird als zuverlässiger neuronaler Marker angesehen. Allerdings haben jüngste Studien gezeigt, dass Nestin-Expression auch in anderen Zelltypen wie Endothelzellen vorliegt (Mokry und Nemecek, 1998). Nestin identifiziert das primitivste Neuroeptihel, kann allerdings auch anderes embryonales Gewebe identifizieren und ist daher nicht spezifisch für das ZNS. Nestin-Expression ist in fast allen GBMs (Glioblastomen) und vielen (sowohl primären als auch metastatischen) Melanomen anzutreffen, aber nicht in metastatischen Karzinomen.

Immunogen

Aus embryonalem Ratten-Rückenmark aufgereinigtes Nestin.

Application

Forschungs-Unterkategorie
Neurale Stammzellen

Forschungskategorie
Stammzellenforschung

Nachweis von Nestin mit diesem Anti-Nestin-Antikörper, Klon 401 (Ratte), der für die Verwendung in IC, IH, IH(P) & WB validiert wurde.

Western Blot:
200–220 kDa in Reduktionsgelen von Zellextrakten neugeborener Ratten und Mäuse. Es ist zu beachten, dass ursprünglich (aber fälschlicherweise) berichtet wurde, dass Nestin bei ca. 440 kDa mittels SDS-PAGE migriere (Kachinsky, 1995).
Für Western Plots Proben zur Vorbereitung in 4 Lösungen erhitzen, die 125 mM Tris (pH 6,8), 10 % 2-Mercaptoethanol, 10 % Glycerin und 4,6 % SDS enthalten. 5 %-PAGE-Gele werden empfohlen. Membranen mit Milch oder BSA blockieren. Den primären Antikörper nicht in milchhaltigem Puffer verdünnen. Bei Proben, die eingefroren und wieder aufgetaut werden, sowie bei Proben, die nicht bei -85 °C aufbewahrt werden, kann sich Nestin in manchen Fällen in mehrere Fragmente zersetzen.

Immunhistochemie:
Es wurde eine 1:20–1:200-Verdünnung einer früheren Charge verwendet. Das Gewebe zur Verwendung in der Lichtmikroskopie mit 4 % Paraformaldehyd (pH 7,4) perfundieren; zur Verwendung in der EM entweder mit 4% Paraformaldehyd (pH 10,0) oder mit 4% Paraformaldehyd mit 0,1% Glutaraldehyd (pH 7,4) perfundieren. Für gefrorene und paraffineingebettete Gewebeschnitte geeignet.

Immunzytochemie:
Es wurde eine 1:20–1:200-Verdünnung einer früheren Charge verwendet. Zellen in 4 % Paraformaldehyd fixieren, das mit 50 mM Natriumborat, pH 9,5, gepuffert wurde.

Die optimalen Arbeitsverdünnungen und Protokolle müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Biochem/physiol Actions

Nager-Nestinprotein mit Ratte und Maus bestätigt. Ratte-401 ist nicht mit menschlichem Nestinprotein reaktiv.

Physical form

Aufgereinigter monoklonaler IgG1 der Maus in Puffer mit 0,09 % Natriumazid.

Aufgereinigtes Protein A

Format: Aufgereinigt

Preparation Note

Bei 2–8 ºC ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Immunhistochemie (Paraffin):
Nestin (Kat.- Nr. MAB353, Klon 401) Färbung von Mäusepankreas; Gewebe wurde mit Citratpuffer, pH 6,0, vorbehandelt. Eine frühere Charge dieses Antikörpers wurde mit IHC-Select-Detektionsreagenz mit HRP-DAB auf 1,25 µg/mL verdünnt. Immunreaktion zeigt sich in den Langerhans-Inseln.
Optimale Färbung der monoklonalen Nestin-Antikörper: Mäusepankreas

Kontrolle
Embryonales Hirngewebe der Maus

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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