ABS2202

Anti-Cas9

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonym(e): SpCas9, CRISPR-associated endonuclease Cas9
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: ICC, WB
• Citations: -

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: affinity isolated antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: Streptococcus pyogenes, bacteria
• packaging: antibody small pack of 25 μg
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_269215.1
• UniProt accession no.: Q99ZW2
• shipped in: ambient
• target post-translational modification: unmodified

Beschreibung

General description

158,44 kDa berechnet.

CRISPR-assoziierte Endonuklease Cas9/Csn1 (UniProt: Q99ZW2; auch bekannt als SpCas9, SpyCas9) wird vom Cas9-Gen (auch Csn1 genannt) (Gen-ID: 901176) in Streptococcus pyogenes kodiert. CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat) ist ein adaptives Immunsystem, das Schutz vor mobilen genetischen Elementen (Viren, Transposonen und konjugativen Plasmiden) bietet. CRISPR-Cluster enthalten Spacer, die als Sequenzen die Vorläufer von mobilen Elementen ergänzen und auf eindringende Nukleinsäuren gerichtet sind. Cas9 weist eine doppelt gelappte Architektur mit einem Erkennungslappen (Reste 41–425) und einem diskontinuierlichen Nukleaselappen (NUC, Reste 1–40 und 453–1053) auf; die crRNA-Ziel-DNA liegt in einem Kanal zwischen den 2 Lappen. Der NUC-Lappen weist 2 Endonuklease-Domänen auf. Die diskontinuierliche RuvC-ähnliche Domäne im NUC-Lappen spaltet die Ziel-DNA, die nicht zur crRNA komplementär ist, während die HNH-Nuklease-Domäne die Ziel-DNA spaltet, die zur crRNA komplementär ist. Cas9 fungiert als RNA-gesteuerte DNA-Endonuklease, die doppelsträngige DNA-Ziele mit einem Protospacer Adjacent Motif (PAM) und komplementär zur Guide-RNA spaltet. Da die homologe Region des Staphylococcus aureus mit der Aminosäurensequenz in Streptococcus pyogenes nicht eng verwandt ist, wird dieses Protein vom Antikörper nicht erkannt.

Immunogen

An KLH konjugiertes lineares Peptid, das 18 Aminosäuren aus der C-terminalen Region von Streptococcus pyogenes entspricht.

Epitop: C-Terminus

Application

Anti-Cas9-Antikörper, Best.-Nr. ABS2202, ist ein hochspezifischer polyklonaler Kaninchenantikörper, der auf Cas9 gerichtet ist und für die Verwendung in der Immunzytochemie und in Western Blots getestet wurde.

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge in einer Verdünnung von 1:100 wurde Cas9 in mit Cas9 aus Streptococcus pyogenes transfizierten HEK293-Zellen nachgewiesen.

Immunzytochemische Analyse: Mit 1 µg/ml aus einer repräsentativen Charge wurde Cas9 in untransfizierten HEK293H- und mit pCDNA3.0-Cas9 transfizierten HEK293H-Zellen nachgewiesen.

Western-Blot-Analyse: Mit 10 µg/ml einer repräsentativen Charge wurde Cas9 in HEK293H-Zelllysat aus mit pCDNA3.0-Cas9 transfizierten Zellen nachgewiesen.

Biochem/physiol Actions

Dieser polyklonale Kaninchenantikörper detektiert Cas9 in Streptococcus pyogenes. Er zielt auf ein Epitop in 18 Aminosäuren der C-terminalen Region ab. Dieser Antikörper reagiert nicht mit Cas9 aus Staphylococcus aureus.

Physical form

Affinitätsgereinigt

Aufgereinigter polyklonaler Kaninchenantikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Preparation Note

Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot an mit Cas9 aus Streptococcus pyogenes transfizierten HEK293-Zellen.

Western-Blot-Analyse: Mit einer Verdünnung dieses Antikörpers im Verhältnis 1:500 wurde Cas9 in mit Cas9 aus Streptococcus pyogenes transfizierten HEK293-Zellen nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

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