ABN83

Anti-vesikulärer-Nukleotidtransporter-(VNUT)-Antikörper

serum, from guinea pig

• Synonym(e): Solute carrier family 17 member 9
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: IF, WB
• Citations: 7

Eigenschaften

• biological source: guinea pig
• conjugate: unconjugated
• antibody form: serum
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: mouse, rat
• technique(s): immunofluorescence: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_898984
• UniProt accession no.: Q8VCL5
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: mouse ... Slc17A9(228993) ; rat ... Slc17A9(362287)

Beschreibung

General description

Mitglied 9 der SLC-Transporter-Familie 17 (UniProt; auch bekannt als vesikulärer Nukleotidtransporter, VNUT) wird vom Gen Slc17a9 (auch Vnut genannt) (Gen-ID 228993) in Mausspezies kodiert. VNUT ist ein Mitglied der Anionentransporter-Familie, die die aktive Akkumulation von Nukleotiden (d. h. ATP, ADP und UTP) in Sekretionsvesikeln sowie die Exozytose von ATP aus verschiedenen Gewebetypen vermittelt. VNUT wird von Tyrosin-Hydroxylase-/TH-positiven dopaminergen (DA) Amakrin-/interplexiformen Zellen (IPC) in der Retina sowie von DA- und nicht-DA-Neuronen im Mittelhirn exprimiert. Neben dem Slc17a9-Transkript mit 447 Aminosäuren (NM_183161) wurden putative proteinkodierende Isoformen auf Basis automatisierter rechnerischer Analysen prognostiziert (X1, XM_006500589; X2, XM_006500590; X3, XM_006500591). In Retina- und Kortex-Gewebe der Maus wurden mittels Immunblotting zwei Banden mit einem Molekulargewicht von ~ 75 und ~50 kDa identifiziert, wobei die ~ 75-kDa-Bande der kanonischen VNUT-Isoform mit 447 AS entspricht und die ~ 50-kDa-Bande vermutlich Isoform X1/X2 repräsentiert. Darüber hinaus wird von einer weiteren Form mit ~ 60 kDa berichtet, die entweder eine weitere gespleißte Form oder eine weniger glykosylierte Form repräsentiert. Murines VNUT ist ein vesikuläres Protein mit 11 Transmembranen (AS 40–60, 74–94, 103–123, 129–149, 169–189, 192–212, 252–272, 287–307, 327–347, 380–400, 413–433) mit einem extrazellulären/vakuolaren N-terminalen Ende (AS 1–39) und einem zytoplasmischen C-terminalen Ende (AS 434–447) mit 5 zytoplasmischen und 5 extrazellulären/vakuolaren Schleifen dazwischen.

~ 75/60/50 kDa gemessen. Das Zielband scheint aufgrund der Glykosylierung größer als das berechnete Molekulargewicht von 48,48 kDa. In manchen Lysaten können uncharakterisierte Banden auftreten.

Immunogen

An KLH konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz aus der sekundären extrazellulären Schleife des vesikulären Nukleotidtransporters (VNUT) der Maus entspricht.

Epitop: Zweite extrazelluläre Schleife.

Application

Dieser Anti-vesikulärer-Nukleotidtransporter-(VNUT)-Antikörper ist für die Verwendung in WB und IF zum Nachweis des vesikulären Nukleotidtransporters (VNUT) validiert.

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Forschungsunterkategorie
Entwicklungsneurologie

Immunfluoreszenz-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge in einer Verdünnung von 1:1000 wurden die Amarkin-/interplexiformen Zellen (IPC) mittels immunhistochemischer Fluoreszenzfärbung von in 4%igem Paraformaldehyd fixierten, in OCT eingebetteten vertikalen Kryoschnitten der Retina von Maus und Ratte sowie in Flatmount-Präparaten der Mäuse- und Rattenretina nachgewiesen (mit freundlicher Genehmigung von Dr. Erica Fletcher, The University of Melbourne, Australien).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge in einer Verdünnung von 1:500 wurde aufgereinigter rekombinanter VNUT in voller Länge sowie endogener VNUT in Mäuseretina-Extrakt nachgewiesen (mit freundlicher Genehmigung von Dr. Erica Fletcher, The University of Melbourne, Australien).
Immunfluoreszenz-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge in einer Verdünnung von 1:1000 wurden VNUT-positive Neuronen in der Substantia nigra (SN) mittels immunhistochemischer Fluoreszenzfärbung von in 4%igem Paraformaldehyd fixierten, nicht eingebetteten Maushirn-Kryoschnitten nachgewiesen (mit freundlicher Genehmigung von Dr. Erica Fletcher, The University of Melbourne, Australien).
Immunfluoreszenz-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden Tyrosin-Hydroxylase-/TH-positive Amarkin-/interplexiformen Zellen (IPC) in der inneren nukleären Schicht (Inner Nuclear Layer, INL) mittels immunhistochemischer Fluoreszenzfärbung von in 4%igem Paraformaldehyd fixierten, in OCT eingebetteten vertikalen Kryoschnitten der Retina von Maus und Ratte sowie in Flatmount-Präparaten der Mäuseretina nachgewiesen (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Immunfluoreszenz-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden Tyrosin-Hydroxylase-/TH-positive dopaminerge Neuronen in der Substantia nigra (SN) und im vetralen tegmentalen Areal (VTA) mittels immunhistochemischer Fluoreszenzfärbung von in 4%igem Paraformaldehyd fixierten, nicht eingebetteten Maushirn-Kryoschnitten nachgewiesen (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden die ~ 75-kDa- und ~ 50-kDa-X1/X2-VNUT-Isoformen in Retina- und Kortex-Homogenaten der Maus nachgewiesen, während in Nieren-Homogenat keine VUNT-Expression detektiert wurde. Die Immunogenpeptid-Blockierung blockierte den Nachweis der Zielbanden (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).

Biochem/physiol Actions

Mit diesem polyklonalen Meerschweinchen-Serum wurden die VNUT-Zielbanden mit ~ 75 kDa, ~ 60 kDa und ~ 50 kDa (VNUT-Isoformen X1/X2) in Retina- und Kortex-Homogenaten der Maus nachgewiesen. Die Immunogenpeptid-Blockierung blockierte den Nachweis der Zielbanden.

Physical form

Nicht aufgereinigt

Polyklonales Meerschweinchen-Serum mit 0,05 % Natriumazid.

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot in Hirngewebelysat der Maus.

Western-Blot-Analyse: Mit einer Verdünnung dieses Antikörpers im Verhältnis 1:500 wurde der vesikuläre Nukleotidtransporter (VNUT) in 10 µg Hirngewebelysat der Maus nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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