AB19026

Anti-ADAM10-Antikörper, C-Terminus

Chemicon^®, from rabbit

• Synonym(e): A disintegrin and metalloproteinase domain 10, ADAM metallopeptidase domain 10, CD156c antigen, Kuzbanian protein homolog, Mammalian disintegrin-metalloprotease, a disintegrin and metalloprotease domain 10
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: IF, IHC, WB
• Citations: 79

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: bovine, mouse, human
• species reactivity (predicted by homology): rat
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): immunofluorescence: suitable, immunohistochemistry: suitable (paraffin), western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_001110.2
• UniProt accession no.: O14672
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: rat ... Adam10(29650)

Beschreibung

General description

80–85 kDa

ADAM10 gehört zur ADAM-Proteinfamilie (A Disintegrin And Metalloprotease). Das Enzym spaltet den membrangebundenen Vorläufer von TNF-alpha bei 76-Ala-|-Val-77 und erzeugt so dessen reife, lösliche Form. Es ist verantwortlich für die proteolytische Freisetzung von mehreren Proteinen der Zelloberfläche, darunter den Heparin-bindenden EGF-ähnlichen Wachstumsfaktor und Ephrin-A2, und für die konstitutive und regulierte Spaltung des Amyloid-Precursor-Proteins (APP) durch alpha-Sekretase. Es trägt zur normalen Spaltung des zellulären Prionenproteins bei und ist an der Spaltung des Adhäsionsmoleküls L1 an der Zelloberfläche und in freigesetzten Membranvesikeln beteiligt, was eine Vesikel-basierte Proteaseaktivität nahelegt.

Tumornekrosefaktor-alpha ist ein entzündungsförderndes Zytokin und trägt zu verschiedenen Entzündungsreaktionen auf Erkrankungen und dem programmierten Zelltod bei. Der Notch-Rezeptor und sein Ligand sind an Entscheidungen über das Schicksal von Zellen während der Entwicklung von Wirbeltieren beteiligt und werden mit mehreren menschlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht, unter anderem mit dem T-Zell-Lymphom. TNF-alpha, Notch und sein Ligand delta sind alle membrangebundene Proteine, die von Proteasen gespalten werden, um reife Proteine oder funktionale Rezeptoren freizusetzen. ADAM10, ein Metalloprotease-Disintegrin aus der Säuger-Proteinfamilie ADAM (die eine Disintegrin- und Metalloproteinase-Domäne enthält), spaltet TNF-alpha, Notch und seinen Liganden delta,(1-3) wie vor Kurzem festgestellt wurde. Die Gene, die für ADAM10 von Mensch, Maus und Rind codieren, wurden kürzlich geklont und als ADAM10, Kuzbanian (KUZ), bzw. MADM benannt.(1,2,4) Die mRNA von ADAM10 wird in einer Vielzahl von humanen und bovinen Geweben exprimiert.

Immunogen

Gewonnen anhand eines Peptids, das den Aminosäuren 732–748 von humanem ADAM10 entspricht (Rosendahl, M.S., 1997). Diese Sequenz ist identisch mit denen mit Ursprung in Rind und Ratte und unterscheidet sich von Maus-ADAM10 in einer Aminosäure (Pan, D., 1997; Howard, L., 1996).

Epitop: Aminosäuren 732–748 von humanem ADAM10

Application

Western Blot:
Verdünnung von 1:500–1:2.000. Jurkat-Ganzzelllysat kann als Positivkontrolle genutzt werden und es kann eine 85-kDa-Bande detektiert werden, die den Vorläufer darstellen könnte. Bei manchen Zelllinien einschließlich Jurkat-Zellen wurde bei 60 kDa eine schwache Bande nachgewiesen, bei der es sich um das verarbeitete reife Protein zu handeln scheint. Ein übermäßiges Vorhandensein von primärem Antikörper kann in manchen Präparaten zum Auftreten mehrerer Banden führen. Die Gegenwart von glykosylierten Formen und Abbauprodukten kann weitere Banden verursachen. Gewöhnlich wird eine prominente Pro-Form in der Nähe von 80–85 beobachtet, mit Banden bei 60 und unter 50 kDa in den meisten Fällen. Das Immunogenpeptid (Best.-Nr. AG533) ist für die Durchführung von Antikörper-Blockierungsstudien erhältlich.

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Immunhistochemie:
Eine frühere Charge dieses Antikörpers wurde verwendet, um ADAM10 in formalinfixiertem, paraffineingebettetem Nierengewebe und Nierenzellkarzinomgewebe nachzuweisen (Gutwein, P., et al. EUROPEAN JOURNAL OF CANCER. 45(2009):478–489).

Immunfluoreszenz:
Eine frühere Charge dieses Antikörpers wurde verwendet, um ADAM10 in RCC4- (Nierenzellkarzinom) und A498-Zellen nachzuweisen (Gutwein, P., et al. EUROPEAN JOURNAL OF CANCER. 45(2009):478–489).

Dieser Anti-ADAM10-Antikörper, C-Terminus, ist zur Verwendung in WB für den Nachweis von ADAM10 validiert.

Biochem/physiol Actions

Erkennt ADAM 10, C-Terminus.

Physical form

Format: Aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 ºC in unverdünnten Aliquoten 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Empfehlungen zur Handhabung:
Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Analysis Note

Kontrolle
ADAM10 wird ubiquitär exprimiert. MDA-MB231 (humane Mammakarzinom-Zelllinie, die bekanntermaßen große Mengen von ADAM10 exprimiert).

Regelmäßig in einem Western Blot an RAW264.7-Lysaten beurteilt.

Western Blot: Eine 1:500 Verdünnung dieser Charge wies ADAM10 in 10 μg RAW264.7-Lysaten nach.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Ersetzt: AB19031

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable