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Anthrax-Schutzantigen, Bacillus anthracis, nicked, rekombinant, B. anthracis

Synonym(e):

PA 63

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General description

Rekombinantes Bacillus anthracis-Anthrax-Schutzantigen (nicked), das in einem speziellen Stamm von B. anthracis exprimiert wird. PA63 ist das carboxyterminale 63-kDa-Fragment, das durch die proteolytische Spaltung des rezeptorgebundenen Schutzantigens (PA, protective antigen), einem der drei Proteine, die das Anthraxtoxin bilden, erhalten wird. Anders als natives PA oligomerisiert PA63, um ein ringförmiges Heptamer zu bilden, das kompetitiv und mit hoher Affinität (Kd ~1 nmol/l) an bis zu drei Kopien von EF und/oder LF bindet. Während natives PA auf der Zelloberfläche bleibt, wird das Heptamer endozytiert; wahrscheinlich, weil die Oligomerisation den Anthraxtoxinrezeptor aggregiert. Die endozytierten toxischen Komplexe werden in endosomale Kompartiments transportiert, wo der niedrige pH-Wert das PA63-Heptamer dazu veranlasst, in die Membran einzugliedern und einen mit Wasser gefüllten Kanal zu bilden.

Biochem/physiol Actions

Primärziel
EF und/oder LF
Produkt konkurriert nicht mit ATP.
Reversibel: nein
Zellpermeabel: nein

Physical form

Aus 100 mmol/l NaCl, 10 mmol/l BIS-Tris-Propan, 1,25 % Trehalose, pH-Wert 8,5, lyophilisiert.

Preparation Note

In sterilem 50%igem Glycerin oder sterilem, destilliertem H₂O auf eine Endkonzentration von 1 mg/ml rekonstituieren. Die Zugabe von BSA bis zu einer Konzentration von 1 mg/ml kann die Stabilität verbessern.
Nach der Rekonstitution in Aliquote aufteilen und für die langfristige Lagerung einfrieren (-20 °C oder -70 °C) oder für die kurzfristige Lagerung (wenige Stunden) im Kühlschrank (4 °C) aufbewahren. Schnelle Einfrier-Auftau-Zyklen für Lösungen vermeiden. Stammlösungen sind bei -20 °C oder -70 °C bis zu 3 Monate haltbar.

Analysis Note

Einzelne Hauptbande bei 63 kDa auf SDS-PAGE

Other Notes

Mogridge, J., et al. 2002. Proc. Natl. Acad. Sci. USA99, 7045.
Nassi, S., et al. 2002. Biochemistry41, 1445.
Singh, Y., et al. 1999. Infect. Immun.67, 1853.
Leppla, S.H. 1988. Methods Enzymol.165, 103.

Legal Information

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxizität: Standard-Handhabung (A)

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soluble (Reconstitute in sterile 50% glycerol or sterile, distilled H2O to a final concentration of 1 mg/ml. Addition of BSA to a concentration of 1 mg/ml may enhance stability.)

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soluble (Reconstitute in 100 µl sterile, distilled H2O to yield a final concentration of 1 mg/ml.)

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