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ChIPAb+-Acetyl-Histon H3 (Lys9), aufgereinigt - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from rabbit, purified by using Protein A

• Synonym(e): H3K9Ac, Histone H3 (acetyl K9)
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: human, mouse
• Application: ChIP, ICC, IP, WB
• Citations: 49

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• clone: polyclonal
• purified by: using Protein A
• species reactivity: human, mouse
• species reactivity (predicted by homology): mammals
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: Q66I33
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... H3F3B(3021)

Beschreibung

General description

17 kDa

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-Acetyl-Histon-H3(Lys9)-Set enthält den Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper, einen Negativkontrolle-Antikörper (aufgereinigtes Kaninchen-IgG) und qPCR-Primer, die eine Sp1-Bindungsstelle des humanen p21(WAF1/CIP1/CDKN1A)-Promotors flankieren und ein 105-Basenpaare-PCR-Produkt amplifizieren. Das Acetyl-Histon H3 (Lys9) und die Negativkontrolle-Antikörper werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von Acetyl-Histon-H3(Lys9)-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Immunogen

Der aufgereinigte Acetyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper wurde gegen ein Peptid (an Lys9 acetyliert), das den Aminosäuren 1–12 von Histon H3 entspricht, entwickelt.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus unbehandelten oder mit UV-Strahlung behandelten (50 J/m², 6 h) U2OS-Zellen (3 x 10⁶ Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 5 μg normalem Kaninchen-IgG oder Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper und dem Magna ChIP A (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Acetyl-Histon H3 (Lys9) assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit Kontrolle ChIP-Kontrollprimern für p21, die den humanen p21-(WAF1/CIP1/CDKN1A)-Promotor flankieren, verifiziert (siehe Abbildungen). Die Daten werden als x-fache Anreicherung der normalisierten prozentualen Eingabe jeder IP-Probe relativ zu behandeltem oder unbehandeltem Chromatin dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna A ChIP (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr- 17-371).

Western-Blot-Analyse:
Säureextrahierte Proteine aus normalen HeLa-Zellen (Bahn 1) und für 24 Stunden mit 5 mmol/l Natriumbutyrat behandelten HeLa-Zellen (Bahn 2) wurden durch Elektrophorese aufgelöst, auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys9) (1 μg/ml) geprüft. Die Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert (siehe Abbildungen).

Dieses Set aus ChIP-validiertem aufgereinigtem ChIPAb+-Acetyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.

Forschungs-Unterkategorie
Chromatin-Biologie

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Biochem/physiol Actions

Acetyl-Histon H3 (Lys9)

Packaging

25 Assays je Kit, ~5 μg je Chromatin-Immunpräzipitation

Physical form

Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys9) (polyklonales Kaninchen-IgG). Ein Fläschchen mit 125 μg mit Protein A aufgereinigtem Antikörper in 125 μl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid und 30 % Glycerin.

Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 μg aufgereinigtem Kaninchen-IgG in 125 μl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid.

ChIP-Primer, p21. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für eine Region von humanem p21(WAF1/CIP1/CDKN1A)-Promotor.
FÜR: GTG GCT CTG ATT GGC TTT CTG
REV: CTG AAA ACA GGC AGC CCA AG

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus mit UV-Strahlung behandelten (50 J/m², 6 h) U2OS-Zellen (3 x 10⁶ Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 5 μg normalem Kaninchen-IgG oder Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys9)-Antikörper und dem Magna ChIP A (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Acetyl-Histon-H3(Lys9)-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Kontrollprimern für p21 verifiziert, die den humanen p21-Promotor (WAF1/CIP1/CDKN1A) flankieren (siehe Abbildungen).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna A ChIP (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

Kontrolle
Einschließlich aufgereinigtes Kaninchen-IgG als Negativkontrolle-Antikörper und für den humanen p21(WAF1/CIP1/CDKN1A)-Promotor spezifische Primer.

Legal Information

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