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07-1570

Sigma-Aldrich

Anti-Monomethyl-Histon H4 (Lys20)-Antikörper

from rabbit, purified by affinity chromatography

Synonym(e):

H4K20me1, Histone H4 (mono methyl K20), H4 histone family, member A, histone 1, H4a, histone cluster 1, H4a

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Biologische Quelle

rabbit

Qualitätsniveau

Antikörperform

affinity isolated antibody

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

polyclonal

Aufgereinigt durch

affinity chromatography

Speziesreaktivität

human

Methode(n)

ChIP: suitable
dot blot: suitable
inhibition assay: suitable (peptide)
western blot: suitable

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

dry ice

Posttranslationale Modifikation Target

monomethylation (Lys20)

Angaben zum Gen

human ... H4C1(8359)

Allgemeine Beschreibung

Histone sind hochkonservierte Proteine und dienen bei der Organisation von Zellkern-DNA zu Chromatin als Strukturgerüst. Histonmodifikationen regulieren die DNA-Transkription, -Reparatur, -Rekombination und -Replikation. Die am häufigsten untersuchten Modifikationen sind Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinylierung. Diese Modifikationen können die lokale Chromatinarchitektur verändern oder trans-agierende Faktoren rekrutieren, die spezifische Histon-Modifikationen erkennen (die „Histon-Code“-Hypothese). Methylierung von Histon H4 an Lysin 20 wurde mit transkriptionaler Aktivierung, Gen-Silencing, Heterochromatinbildung, Mitose und DNA-Reparatur in Verbindung gebracht. Histon H4 wird während der G(2)-, M- und G(1)-Phasen des Zellzyklus progressiv am Lys20 methyliert, und die Methylierung von H4Lys20 ist ein Marker für Heterochromatin. Bei Säugern wird das weibliche X-Chromosom von der Xist-RNA beschichtet, was ein wichtiger Schritt für die Stummlegung ist, und es wird hauptsächlich durch Methylierung von H3Lys9, H3Lys27 und H4Lys20 markiert.

Spezifität

Basierend auf der Sequenzhomologie wird eine breite artenübergreifende Kreuzreaktivität erwartet.
Erkennt monomethyliertes Histon H4
(Lys20), Mr 11 kDa.

Anwendung

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin, präpariert aus HeLa-Zellen (2 X 106 Zelläquivalente pro IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation unterzogen, wobei 4 μg eines negativen Kontrolle-Antikörpers oder eines Anti-Monomethyl-Histon H4
(Lys20)-Antikörpers und das Magna ChIP A Kit (Best.-Nr. 17-610) verwendet wurden. Die erfolgreiche Immunpräzipitation der Monomethylhiston H4 (Lys20)-assoziierten DNA-Fragmente wurde mittels qPCR verifiziert, wozu GAPDH-kodierende Regions-ChIP-Primer gegenüber den dem GAPDH-Promoter entsprechenden Kontrollprimern zum Einsatz kamen (siehe Abbildungen). Daten werden als protzentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Eingabe von Chromatin dargestellt, wobei die immungefällte DNA vom negativen Kontroll-Antikörper als (-) und vom Monomethyl-Histon H4 (Lys20) als (+) angegeben wird.
Für experimentelle Details beziehen Sie sich bitte auf das Protokoll EZ-Magna ChIP A (Best.-Nr. 17-408) oder EZ-ChIP (Best.-Nr. 17-371).

Dot Blot-Analyse:
Absurance Histon H3 Antikörperspezifitäts-Array (Best.-Nr. 16-667) und Absurance Histon H2A, H2B, H4-Antikörperspezifizitäts-Array (Best.-Nr. 16-665), die Histon-Peptide mit verschiedenen Modifikationen enthalten, wurden mit Best.-Nr. 07-1570 Anti-Monomethyl-Histon-H4 (Lys20) in einer Verdünnung von 1:1.000 untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG vom Esel und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.

Peptid-Blockierungsassay:
40 μg Histon H4 Peptid, das Monomethyl-Lysin 20 enthielt, hemmte die Detektion von Histon H4 durch Anti-Monomethyl-Histon H4 (Lys20) in der Immunblot-Analyse von Säureextrakten der HeLa-Zellen
Der Anti-Monomethyl-Histon H4 (Lys20)-Antikörper ist ein polyklonaler Kaninchen-Antikörper zum Nachweis von Monomethyl-Histon H4 (Lys20), das auch also H4K20me1, Histon H4 (Monomethyl K20), H4-Histonfamilienmitglied A bekannt ist und in WB validiert wurde.

Qualität

Regelmäßig mittels Western Blot-Analyse beurteilt.

Zielbeschreibung

~ 11 kDa

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Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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James J Pesavento et al.
Molecular and cellular biology, 28(1), 468-486 (2007-10-31)
Methylation of histone H4 at lysine 20 (K20) has been implicated in transcriptional activation, gene silencing, heterochromatin formation, mitosis, and DNA repair. However, little is known about how this modification is regulated or how it contributes to these diverse processes.
A trans-tail histone code defined by monomethylated H4 Lys-20 and H3 Lys-9 demarcates distinct regions of silent chromatin.
Sims, Jennifer K, et al.
The Journal of Biological Chemistry, 281, 12760-12766 (2006)
H Nakshatri et al.
Cell death & disease, 6, e1608-e1608 (2015-01-23)
The transcription factor nuclear factor-kappaB (NF-κB) is constitutively active in several cancers and is a target of therapeutic development. We recently developed dimethylaminoparthenolide (DMAPT), a clinical grade water-soluble analog of parthenolide, as a potent inhibitor of NF-κB and demonstrated in
Radiation-induced alterations of histone post-translational modification levels in lymphoblastoid cell lines.
Maroschik, B; Gurtler, A; Kramer, A; Ro?ler, U; Gomolka, M; Hornhardt, S; Mortl, S; Friedl, AA
Radiation Oncology (London, England) null

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