05-949

Anti-Histidin-markiert-Antikörper, Klon HIS.H8

clone HIS.H8, Upstate^®, from mouse

• Synonym(e): HIS-Tag-Antikörper
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.43
• eCl@ss: 32160702
• Clone: HIS.H8, monoclonal
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• Application: ICC, IP, WB
• Citations: 57

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• clone: HIS.H8, monoclonal
• species reactivity (predicted by homology): all
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2b
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified

Beschreibung

General description

Das His-Tag ist eine Reihe von mindestens 6 Histidinresten, die als Tag-Motiv am N- oder C-Terminus von rekombinanten Proteinen verwendet wird. Die relativ geringe Größe dieses Tags im Vergleich zu anderen häufig eingesetzten Tags wie GST (30 kDa) sorgt für eine geringere Wahrscheinlichkeit einer Störung der Zielproteinstruktur oder -funktion. Seine geringe Größe macht es geeigneter für die Verwendung unter denaturierenden Bedingungen. His-Tags werden oft für Affinitätsaufreinigungen und Bindungsassays eingesetzt. His-Tags binden mit hoher Affinität an Nickel- oder Cobaltionen und diese Wechselwirkung mit Metallionen ist die Grundlage vieler Affinitätsmedien auf His-Tag-Basis. Das His-Tag-Epitop wird verbreitet eingesetzt, um die Expression von rekombinanten Proteinen in Bakterien-, Hefe-, Insekten- und Säugetiersystemen nachzuweisen.

Immunogen

6x-His synthetisches Peptid.

Application

Dieser Anti-Histidin-markierte-Antikörper, Klon HIS.H8, ist zur Verwendung in IC, IP und WB für den Nachweis von Histidin-Markierungen validiert.

Forschungskategorie
Epitop-Tags & Allgemeine Verwendung

Forschungsunterkategorie
Epitop-Tags

RNA-Bindungsprotein (RBP)

Immunzytochemie:
2 μg/ml einer früheren Charge zeigten eine positive Immunfärbung für His-markiertes Akt1/PKBα in transfizierten HELA-Zellen.

Immunpräzipitation:
Von einem unabhängigen Labor wurde berichtet, dass dieser Antikörper His-markierte Proteine immunpräzipitiert.

Biochem/physiol Actions

Erkennt die Tag-Sequenz HHHHHH entweder am N- oder C-Terminus eines rekombinanten Fusionsproteins; für die Erkennung des 6x-Tags sind keine weiteren Aminosäuren erforderlich, die die 6x-His-Tag-Sequenz umgeben.

Physical form

Aufgereinigt

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG2b in Puffer mit PBS, pH-Wert 7,4, und 0,05% Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Empfehlungen zur Handhabung:
Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Analysis Note

Kontrolle
RIPA-Lysate von transfizierten HeLa-Zellen.

Regelmäßig mittels Western Blot und Immunzytochemie an transfizierten HeLa-Zellen beurteilt.

Western-Blot-Analyse:
0,5–2 μg/ml dieser Charge wiesen His-markiertes Akt1/PKBα in RIPA-Lysaten von transfizierten HeLa-Zellen nach.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 2