05-480

Anti-Eck/EphA2-Antikörper, Klon D7

clone D7, Upstate^®, from mouse

• Synonym(e): EPH receptor A2, Epithelial cell kinase, Tyrosine-protein kinase receptor ECK, ephrin receptor EphA2, epithelial cell receptor protein tyrosine kinase, protein tyrosine kinase, receptor protein tyrosine kinase regulated by p53 and E2F-1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: D7, monoclonal
• Application: ICC, IP, WB, activity assay
• Citations: 54

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: D7, monoclonal
• species reactivity: mouse, canine, human, rat, bovine
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): activity assay: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1
• NCBI accession no.: NM_004431
• UniProt accession no.: P29317
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: bovine ... Epha2(512798) ; human ... EPHA2(1969)

Beschreibung

General description

140 kDa

EPH und EPH-ähnliche Rezeptoren sind an der Vermittlung von Entwicklungsereignissen beteiligt, insbesondere im Nervensystem. Rezeptoren der EPH-Unterfamilie weisen in der Regel eine einzelne Kinasedomäne und eine extrazelluläre Region auf, die eine Cys-reiche Domäne und zwei Fibronektin-Typ III-Repeats enthält. Die Ephrin-Rezeptoren sind auf der Grundlage der Ähnlichkeit ihrer extrazellulären Domänesequenzen und ihrer Affinität für die Bindung von Ephrin-A- und Ephrin-B-Liganden in zwei Gruppen unterteilt.
Proteinkinasen sind Enzyme, die eine Phosphatgruppe von einem Phosphat-Donator, in der Regel das G-Phosphat von ATP, an eine Akzeptor-Aminosäure in einem Substratprotein übertragen. Durch diesen grundlegenden Mechanismus vermitteln Proteinkinasen die meisten Signalübertragungen in eukaryotischen Zellen, regulieren Zellmetabolismus, Transkription, Zellzyklusfortschritt, zytoskelettale Umlagerung und Zellbewegung, Apoptose und Differenzierung.

Immunogen

Natives Protein, das durch Aufreinigung von Phosphotyrosin-haltigen Proteinen isoliert wurde. Klon D7.

Application

Dieser Anti-Eck/EphA2-Antikörper, Klon D7, ist zur Verwendung in IC, IP, EA und WB für den Nachweis von Eck/EphA2 validiert.

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Forschungsunterkategorie
Wachstumskegel & axonale Wegfindung

Proteinkinase-Assay:
Eine frühere Charge dieses Antikörpers wurde Berichten zufolge in einem Immunpräzipitations-Autophosphorylierungs-Assay mit einem Mn-PIPES-Reaktionspuffer eingesetzt (Romer, L., 1994).

Immunpräzipitation:
Eine frühere Charge dieses Antikörpers immunpräzipitierte Berichten zufolge Eck aus 500 µg einer humanen Brustepithelzelllinie, die in TBS mit 1 % Triton X-100 lysiert wurde. Verwenden Sie 1–4 µg je Reaktion.

Immunzytochemie:
Eine frühere Charge dieses Antikörpers immunfärbte Berichten zufolge Eck in humanen und murinen Epithelzellen, die mit 3,7 % Formaldehydlösung fixiert und mit 0,5 % Triton X-100 in TBS permeabilisiert wurden.

Biochem/physiol Actions

Dieser Antikörper erkennt die Epithelzellkinase (Eck/EphA2), Molekülmasse 140 kDa

Physical form

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG1 in Puffer mit 0,2 mol/l Tris-Glycin, pH-Wert 7,4, 0,15 mol/l NaCl, 0,05% Natriumazid und 30 % Glycerin.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Handhabungsempfehlungen:
Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können. HINWEIS: Ein Abfallen der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Analysis Note

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Art.-Nr. 12-301, nichtstimuliertes A431-Zelllysat. 2,5 µl 2-Mercaptoethanol/100 µl Lysat zugeben und 5 Minuten einkochen, um das Präparat zu reduzieren. Jede Bahn für Minigele mit 20 µg reduziertem Lysat beladen.

Regelmäßig mittels Immunblot an RIPA-Lysaten von humanen A431-, Vorhaut-Fibroblasten-, Maus-3T3/A31- oder Ratten-L6-Zellen beurteilt.

Western-Blot-Analyse:
0,5–2 µg/ml dieser Charge wiesen Eck in RIPA-Lysaten von humanen A431-Zellen nach. Zuvor wurde Eck in RIPA-Lysaten von Vorhaut-Fibroblasten-, Maus-3T3/A31- und Ratten-L6-Zellen nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 1