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Merck

A2547

Sigma-Aldrich

Anti-actina, α-músculo liso monoclonal

clone 1A4, ascites fluid

Sinónimos:

SMA

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100 μL
$622.000
0.2 ML
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About This Item

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41

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biological source

mouse

Quality Level

conjugate

unconjugated

antibody form

ascites fluid

antibody product type

primary antibodies

clone

1A4, monoclonal

mol wt

antigen ~42 kDa

contains

15 mM sodium azide

species reactivity

human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake

technique(s)

immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable using smooth muscle cells
immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells
indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix
western blot: suitable using smooth muscle cells

isotype

IgG2a

UniProt accession no.

application(s)

research pathology

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

target post-translational modification

unmodified

Gene Information

human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)

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General description

El anticuerpo (también conocido como anti-α-Sm-1) es específico para la isoforma α-actina de músculo liso. Reacciona de manera específica con la α-actina del músculo liso en análisis de inmunotransferencia y marca las células del músculo liso en cortes de tejido incluidas en parafina congeladas o fijadas con formalina.
Las actinas son proteínas citoesqueléticas que regulan la motilidad celular. Diversas proteínas de andamiaje, comunicación y unión a la actina regulan las interconversiones entre las actinas filamentos F sanas y las actinas monómeras G. Las actinas celulares de varias especies tienen propiedades físicas e inmunológicas muy similares. Por consiguiente, el uso de anticuerpos monoclonales frente a la actina proporciona una herramienta específica y útil para estudiar la localización, la estructura y la función de las proteínas actina. La actina 2 (ACTA2), la actina del músculo liso está codificada en el cromosoma humano 10q23.31.
El anticuerpo monoclonal de ratón anti-α-actina de músculo liso se une a la actina de humanos, ratón, rata, bovinos, pollo, ranas, cabras, conejillos de indias, conejos, perros, ovejas y serpientes.
El anticuerpo monoclonal anti-α actina de músculo liso (isotipo IgG2a de ratón) se obtiene del hibridoma producido por la fusión de células de mieloma de ratón y esplenocitos de una ratón inmunizado. Se utilizó el decapéptido sintético NH2 terminal de la α-actina de músculo liso acoplado con hemocianina de lapa de ojo de cerradura (KLH) como inmunógeno. El isotipo se determinó utilizando el kit ImmunoTypeTM Sigma (Sigma Stock No. ISO-1) y mediante un inmunoanálisis de difusión doble utilizando reactivos de isotipado de anticuerpos monoclonales de ratón (Sigma nº de ISO-2).

Specificity

El anticuerpo monoclonal anti-α actina de músculo liso es específico de la isoforma α-actina. Reacciona de manera específica con una actina del músculo liso utilizando inmunotransferencia y marcaje mediante inmunofluorescencia indirecta de cortes de tejido incluidos en parafina o congelados y fijados en formalina. El anticuerpo puede utilizarse para la localización inmunocitoquímica de la α actina del músculo liso por medio de técnicas de inmunoperoxidasa, inmunofluorescencia, ELISA o inmunotransferencia. El anticuerpo reacciona en humanos, ratón, rata, bovinos, pollo, ranas, cabras, conejillos de indias, conejos, perros, ovejas y serpientes.

Immunogen

Decapéptido N-terminal sintético de la α-actina de músculo liso.

Application

El anticuerpo monoclonal de ratón anti-α-actina del músculo liso se ha utilizado para análisis mediante western blot utilizando homogeneizados de riñón completo en células de cáncer tiroideo anaplásico humano. El producto se ha utilizado para análisis de inmunohistoquímica utilizando cortes de tejido de ratón, de hígado y uterinos.
El anticuerpo monoclonal anti-α-actina de músculo liso se ha utilizado en la detección de actina 2 en fibroblastos de mama utilizando tinción de inmunofluorescencia.
Se realizó inmunocitoquímica en células de músculo liso de aortas bovinas utilizando el anticuerpo monoclonal anti-ACTA2. Las células se cultivaron primero en cubreobjetos de vidrio y se fijaron en acetona al 50%/EtOH durante 10 minutos a 4 grados.
Se tiñeron inmunohistoquímicamente cortes incluidos en parafina de injertos de tejido testicular de rata con anticuerpos monoclonales anti-actina de músculo liso.
Se realizó análisis mediante IHC de tejido cardiaco de ratón teñido con x-gal utilizando el anticuerpo monoclonal primario anti-actina de músculo liso de ratón para identificar los miofibroblastos.

Biochem/physiol Actions

La actina es una de las proteínas eucariotas más conservadas; se expresa en mamíferos y aves como seis isoformas caracterizadas por electroforesis y análisis de secuencia de aminoácidos. Cuatro de las seis isoformas constituyen marcadores de diferenciación de los tejidos musculares. Las isoformas de la actina muestran >90 % de homología de secuencia total, pero sólo un 50-60% de homología en sus 18 residuos NH2-terminales. La región NH2 terminal de la actina parece una importante región antigénica y puede intervenir en la interacción de la actina con otras proteínas como la miosina. Se ha demostrado que la proporción relativa de las isoformas de la actina son diferentes en los músculos lisos de órganos diferentes y cambian dentro de la misma población de células de músculo liso durante el desarrollo, en situaciones patológicas y en condiciones de cultivo diferentes.
Mutaciones en la actina 2 se asocian con una disfunción de los músculos lisos de las arterias y están implicadas en ciertas coronariopatías. Mutaciones en ACTA2 contribuyen al desgarro y agrandamiento de la aorta en los aneurismas de la aorta torácica (TAAD).

Physical form

El anticuerpo se suministra como un líquido ascítico que contiene acida sódica 15 mM como conservante.

Storage and Stability

Para su uso continuo, debe conservarse entre 2 y 8 °C durante un máximo de un mes. Para una conservación prolongada, la disolución puede congelarse en alícuotas de trabajo. No se recomienda congelar y descongelar repetidamente. Si aparece una turbidez ligera tras una conservación prolongada, clarifique mediante centrifugación antes de su uso.

Other Notes

Para ver una guía de selección de anticuerpos anti-actina, visite www.sigmaaldrich.com/actin.

Disclaimer

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10 - Combustible liquids

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Questions

1–8 of 8 Questions  
  1. Does this antibody work for IF staining of cultured cells on a cover slip? What secondary would you recommend?

    1 answer
    1. We do not test this product for IF on cells. However, it has been used in this application. You can use a secondary antibody like Product No. Anti-Mouse IgG (Fab specific)-FITC antibody produced in goat.

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  2. Which is the suggested concentration for IHC in FF tissue?

    1 answer
    1. The recommended concentration will be listed on the lot-specific Certificate of Analysis. For example, lot 0000221557 has an optimum concentration of 1:800.
      Please see the sample Certificate of Analysis for more information: https://www.sigmaaldrich.com/certificates/sapfs/PROD/sap/certificate_pdfs/COFA/Q14/A2547-.2ML0000246371.pdf

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  3. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  4. What is the molecular weight of actin, Products  A2066 and A2547?

    1 answer
    1. Actin has a molecular weight of 42 kDa.

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  5. Can Product A2547,  Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody detect beta actin?

    1 answer
    1. No, Product A2547,  Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody will not cross react with beta actin.

      Helpful?

  6. Is there a protocol for using Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse, in immunohistochemistry?

    1 answer
    1. This antibody is used in our Immunohistochemistry Kit, Product No. IMMH2.

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  7. What is the antibody concentration of Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse?

    1 answer
    1. This antibody is ascities fluid.  The amount of protein present and the amount of IgG1 present is indicated on the Lot-specific Certificate of Analysis.

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  8. Why do I have 3 bands on my western blot when using Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse?

    1 answer
    1. While actin should run as a 42 kDa band when detected by Western blotting, there are recent observations that cleavage products can be seen in cells undergoing apoptosis. Initial cleavage gives a band at 41 kDa, which may appear as a doublet on the blot. In addition, further cleavage results in a major band at 30 kDa and a small band at 14 kDa which have been shown to be cleavage products due to the action of interleukin 1 -converting enzyme. This may explain the detection of smaller bands when blotting with this antibody. This banding pattern may be detected with other actin antibodies as well. Kayalar, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:2234-2238, (1996).

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