07-596

Anti-Histon-H4(Citrullin 3)-Antikörper

Upstate^®, from rabbit

• Synonym(e): Cit-H4R3, H4Cit3, Histone H4, Arg3 citrullinated
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: mouse, human
• Application: ChIP, ICC, IHC, WB
• Citations: 36

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• antibody form: affinity purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: mouse, human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable (paraffin), western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_003529

Beschreibung

General description

Histon H4 (UniProt: P62805; auch bekannt als H4-Histon-Familienmitglied A, Histon 1 H4a), wird beim Menschen von dem Gen HIST1H4A (auch als H4/A, H4FA bekannt, Gen-ID 8359) kodiert. Histon H4 ist eines der wichtigsten Histonproteine, die in sowohl prokaryotischen als auch eukaryotischen Zellen zu der Chromatinstruktur beitragen. Histon H4 kann verschiedene Arten von epigenetischen Modifikationen durchlaufen, welche die Zellabläufe, einschließlich Methylierung und Acetylierung an Lysin- und Arginin-Resten, Phosphorylierung an Serin- und Threonin-Resten sowie Umwandlung von Arg3 in einen Citrullin-Rest durch die Peptidylarginindeiminase PAD4 katalysierte Deiminierungsreaktion (auch als Citrullinierung bekannt), beeinflusst. Die Citrullinierung an Arg3 von Histon H4 (H4Cit3) schwächt die Histon-DNA-Wechselwirkung als Folge einer Konformationsänderung und einer verringerten positiven Ladung am N-terminalen Ende von Histon H4. Bakterielle Infektionen stimulieren H4Cit3 in Neutrophilen und bilden die stark dekondensierte extrazelluläre Chromiatinstruktur NET (Neutrophil Extracellular Traps), die Mikroorganismen einfangen und abtöten kann. Andererseits werden citrullinierte Proteine als Nicht-Eigenproteine erkannt und aktivieren folglich Immunsysteme. Ein funktioneller Haplotyp des PADI4-Gens steht durch die Einleitung der Antigenität von Proteinen mit der Pathogenese von rheumatoider Arthritis in Verbindung. H4Cit3 wird als Reaktion auf DNA-Schäden durch den p53-PADI4-Signalweg eingeleitet, was zur Hochregulierung der H4Cit3-Immunreaktivität um fragmentierte Zellkerne in apoptotischen Zellen führt. Außerdem korreliert das Maß von H4Cit3 negativ mit der p53-Proteinexpression und Tumorgröße in Gewebe von nicht-kleinzelligem Lungenkrebs (NSCLC), was auf eine wesentliche Rolle von H4Cit3 bei der Karzinogenese hindeutet.

~ 12 kDa gemessen. 11,24/11,37 kDa (H4 mit/ohne Entfernung von Met1) berechnet. In einigen Lysaten können nichtcharakterisierte Banden auftreten.

Immunogen

Epitop: N-Terminus

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–10 (SG[cit]GKGGKGL-C) von humanem Histon H4 (Met1 entfernt) entspricht, wobei [cit] für citrulliniertes Arg3 steht. Ein C-terminales Cystein wurde für Konjugationszwecke hinzugefügt.

Application

Anti-Histon-H4(Citrullin 3)-Antikörper, Katalognr. 07-596, ist ein hochspezifischer polyklonaler Kaninchen-Antikörper, der auf die Histon H4-Citrullinierung (H4Cit3) abzielt und in Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), Immunzytochemie, Immunhistochemie und Western Blot geprüft wurde.

Forschungs-Unterkategorie
Histone

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Biochem/physiol Actions

Basierend auf der Sequenzhomologie von 100 % wird eine weitreichende artenübergreifende Reaktivität erwartet.

Dieser polyklonale Kaninchen-Antikörper wies die durch PAD4 katalysierte Arg3-Citrullinierung von rekombinantem Histon H4 und H2A sowie die durch Calcium-Ionophor eingeleitete Arg3-Citrullinierung (H4Cit3) in HL-60-Zellen nach. Die Herunterregulation von zellulärer PAD4 (Peptidylarginindeiminase 4) verminderte die durch Ionophor eingeleitete H4Cit3 stark, während die Antikörper-Blockierung mit dem Immunogenpeptid den Nachweis der Zielbande verhinderte (Tanikawa, C., et al. (2012). Nat. Commun. 3:676; Wang, Y., et al. (2004). Science. 306(5694):279-283).

Physical form

Affinitätsgereinigt.

Aufgereinigter polyklonaler Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Preparation Note

Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot in HL-60-Zelllysat.

Western-Blot-Analyse: Eine 1:1000-Verdünnung dieses Antikörpers wies die durch Differenzierung eingeleitete Citrullinierung an Arg3 von H4 (H4Cit3) in 10 µg Lysat von mit Calcium-Ionophor behandelten HL-60-Zellen nach.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

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• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
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