We test the solubility of this product at 10 mg/mL in a 0.1 M phosphate buffer (pH 6.0). In regards to solution stability of this product, the following information has been listed under Preparation Note on the product's webpage: Solutions of this product at 1 mg/mL in 0.1 M phosphate buffer (pH 6.0) remain active for at least two weeks at room temperature. The solution retains activity after 5 freeze-thaw cycles.
P6782
Peroxidasa from horseradish
Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, 950-2000 units/mg solid (using ABTS), ≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
Sinónimos:
Donante:peróxido de hidrógeno oxidorreductasa, Peroxidasa de rábano picante
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| A ustedes/SKU | Disponibilidad | Precio |
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5 mg | Comprobar disponibilidad del carrito | $86.900 |
10 mg | Comprobar disponibilidad del carrito | $165.000 |
25 mg | Comprobar disponibilidad del carrito | $205.000 |
50 mg | Comprobar disponibilidad del carrito | $354.000 |
100 mg | Comprobar disponibilidad del carrito | $609.000 |
Acerca de este artículo
Número CAS:
eCl@ss:
32160410
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-668-6
MDL number:
Specific activity:
≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)
Servicio técnico
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Type VI-A
Quality Segment
form
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)
mol wt
~44 kDa
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble
application(s)
diagnostic assay manufacturing
storage temp.
2-8°C
SMILES string
[O+H2]O[O-]
InChI
1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChI key
JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
General description
La peroxidasa de rábano picante se aísla de las raíces de rábano picante (Amoracia rusticana) y pertenece al grupo de ferroprotoporfirina de las peroxidasas. La HRP es un polipéptido monocatenario que contiene cuatro puentes bisulfuro. Es una glucoproteína que contiene un 18 % de carbohidratos. La composición de los carbohidratos consiste en galactosa, arabinosa, xilosa, fucosa, manosa, manosamina y galactosamina dependiendo de la isoenzima específica. Su peso molecular (~44 kDa) incluye la cadena polipeptídica (33 890 dalton), la hemina más Ca2+ (~700 dalton) y los carbohidratos (~9 400 dalton). Existen al menos siete isoenzimas de la HRP. El punto isoeléctrico de las isoenzimas de la peroxidasa de rábano picante oscila entre 3,0 y 9,0.
Application
La peroxidasa de rábano picante (HRP) se aísla de las raíces de rábano picante (Amoracia rusticana). Se utiliza en aplicaciones bioquímicas como las transferencias Western, el ELISA y la inmunohistoquímica. La peroxidasa de rábano picante se utiliza para amplificar una señal débil y aumentar la detectabilidad de una molécula específica, como una proteína. El producto P6782 es de tipo VI-A y es esencialmente un polvo liofilizado sin sal. Se utiliza para cuantificar el colesterol y los ésteres de colesterol[1] y para estudiar la deposición de lípidos in vitro en lentes de contacto de hidrogel y de hidrogel de silicona[2].
La enzima de Sigma se ha utilizado en el desarrollo de un biosensor de galactosa oxidasa-peroxidasa rápido y sensible para la detección de galactosa con estabilidad prolongada. Se ha utilizado como componente de una placa de medios (agar MRS) que contiene 3,3′,5,5′-tetrametilbencidina (TMB) para el crecimiento del género Lactobacillus. La TMB actúa como sustrato cromógeno de la peroxidasa. La peroxidasa genera O2 a partir del H2O2 producido por los lactobacilos, y la TMB tiñe las colonias de color azul en presencia de O2. Por tanto, después de 48 horas de incubación en CO2 al 5 %, las colonias que producen H2O2 en agar MRS aparecen de color azul oscuro. Las bacterias no productoras deH 2O2 son incoloras.[3] Se ha utilizado para estudiar el efecto estabilizador del alcohol polivinílico sobre la peroxidasa de rábano picante. También se utiliza para la determinación de glucosa y peróxidos en disolución.
Biochem/physiol Actions
Cuando se incuba con un sustrato, la peroxidasa de rábano picante produce un derivado coloreado, fluorimétrico o luminiscente de la molécula marcada, lo que permite su cuantificación. Se ha demostrado que la peroxidasa de rábano picante reduce ligeramente el nivel de inhibición en un mutante cydAB.
La HRP se combina fácilmente con el peróxido de hidrógeno (H2O2) y el complejo resultante [HRP-H2O2] puede oxidar una amplia variedad de donantes de hidrógeno. El pH óptimo es 6,0-6,5 y la enzima es más estable en el intervalo de pH de 5,0-9,0. La HRP puede conjugarse con anticuerpos mediante diversos métodos diferentes, como el empleo de glutaraldehído, la oxidación de peryodato, los enlaces disulfuro y también a través de reticulantes de amino y tiol dirigidos. Es más pequeña y más estable que las etiquetas enzimáticas β-galactosidasa y fosfatasa alcalina. Por lo tanto, es la etiqueta más deseada. Además, su glucosilación induce una menor unión inespecífica. Acida sódica, cianuros, L-cistina, dicromatos, etilenotiourea, hidroxilamina, sulfuros, vanadatos, ácido p-aminobenzoico, así como los iones Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, NI2+ y Pb2+ inhiben la actividad enzimática.
Packaging
Envasados en mg sólidos
Preparation Note
Las disoluciones de este producto a 1 mg/ml en tampón fosfato 0,1 M (pH 6,0) permanecen activas al menos durante dos semanas a temperatura ambiente. La disolución retiene la actividad después de 5 ciclos de congelación y descongelación.
Analysis Note
Este producto se analiza utilizando ABTS para facilitar la comparación con la unidad de otros proveedores: aproximadamente 1 000 unidades por mg de sólido
La RZ (Reinheitszahl) es la relación de absorbancia A403/A275 determinada a 0,5-1,0 mg/ml en agua desionizada. Es una medida del contenido de hemina, no de la actividad enzimática. Incluso preparaciones con RZ elevada pueden tener una actividad enzimática baja.
Other Notes
Similar a P8375
Una unidad de ABTS oxidará 1 μmol de ABTS por minuto a 25 °C a pH 5,0
Una unidad de pirogalol formará 1,0 mg de purpurogalina a partir de pirogalol en 20 segundos a pH 6,0 a 20 °C.
Véase más información sobre la peroxidasa en www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
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| specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS) | specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) | specific activity 150-250 units/mg solid (using pyrogallol) | specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) |
| form essentially salt-free, lyophilized powder | form essentially salt-free, lyophilized powder | form essentially salt-free, lyophilized powder | form essentially salt-free, lyophilized powder |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - |
| mol wt ~44 kDa | mol wt ~44 kDa | mol wt ~44 kDa | mol wt ~44 kDa |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C |
| solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble | solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0) | solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0), H2O: soluble | solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0), H2O: soluble |
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signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Clase de almacenamiento
11 - Combustible Solids
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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Can I dissolve 10mg HRP powder by splitting into certain concentrations like 1mg/ml,4mg/ml and 5mg/ml by weighing 1mg,4mg and 5mg amount and dissolving it separately instead of made it to 10mg/ml in phosphate buffer as mention catalog. Will it work?
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