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Merck

N8630

Sigma-Aldrich

Nucleasa P1 from Penicillium citrinum

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

Sinónimos:

3′-fosfohidrolasa, Nucleasa 5′-nucleótido hidrolasa, Endonucleasa P1

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About This Item

Número de CAS:
Comisión internacional de enzimas:
MDL number:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54

biological source

Penicillium citrinum

Quality Level

form

lyophilized powder

specific activity

≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

secondary activity

≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase

mol wt

42-50 kDa

packaging

vial of ≥250 units (using RNA substrate)

technique(s)

DNA extraction: suitable
DNA purification: suitable

suitability

suitable for molecular biology

application(s)

cell analysis

storage temp.

2-8°C

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General description

La nucleasa P1 es una de las nucleasas específicas de una sola cadena más conocidas en biología molecular; la nucleasa P1 es una endonucleasa específica de una sola cadena (de ssDNA o ssRNA). La nucleasa P1 también puede romper regiones monocatenarias en ácidos nucleicos bicatenarios.
La nucleasa P1 de Penicillium citrinum es una endonucleasa dependiente de zinc que muestra una mayor actividad en presencia de bajas concentraciones de urea. La actividad selectiva de la nucleasa P1 ha encontrado aplicaciones útiles en estudios sobre la estructura de ácidos nucleicos.

Application

  • La nucleasa P1 escinden el ADN o el ARN monocatenarios en 5′ mononucleótidos
  • La nucleasa P1 respalda la investigación de daños y modificaciones en el ADN
  • La composición de bases de los ácidos nucleicos y el análisis estructural puede realizarlos la nucleasa P1
  • La nucleasa P1 se ha utilizado históricamente para la producción industrial de 5′mononucleótidos a partir del ARN de la levadura.
  • La eliminación de ácidos nucleicos a través de la purificación de proteínas puede hacerla la nucleasa P1
  • La nucleasa P1 es un reactivo clave para el desarrollo de métodos para estudiar la biosíntesis de aminoácidos dependiente del t-ARN y la transamidación dependiente del t-RNA
  • La nucleasa P1 de Penicillium citrinum se ha utilizado en un estudio para evaluar las estructuras de cristal utilizando sulfato de amonio o polietilenglicol 4000 como precipitante.
  • La nucleasa P1 se utilizó en un estudio para investigar un método para el análisis de secuencia directa de 20-25 nucleótidos de los extremos 3′ o 5′ del ARN marcado en el grupo final.
  • La nucleasa P1 se utiliza para mejorar la sensibilidad de un método de marcaje con 32P para la detección de aductos de ADN.
La enzima tiene una temperatura óptima de aproximadamente 70°C, pero para una incubación larga, es más adecuada una temperatura por debajo de 60°C. Es estable en el intervalo de pH de 5 - 8.
La enzima tiene una temperatura óptima de aproximadamente 70 °C, pero para una incubación larga, es más adecuada una temperatura por debajo de 60 °C. Es estable en el intervalo de pH de 5 - 8.

Biochem/physiol Actions

Cataliza la escisión endonucleolítica inespecífica del ADN y el ARN monocatenarios para producir 5′-fosfatos de nucleósidos y 5′-fosfooligonucleótidos. No degrada apreciablemente los ácidos nucleicos de doble cadena, especialmente en presencia de cloruro sódico superior a 400 mM a pH 6,0.

Features and Benefits

Se ha probado la actividad fosfodiesterasa 3′- y 5′ y la actividad nucleotidasa 3′- en nuestra nucleasa P1 de gran actividad, y es la nucleasa P1 más activa del mercado.

Physical properties

Glucoproteína dependiente del zinc que consta de 270 restos de aminoácidos. Masa molecular: 42 - 50 kDa.

Unit Definition

3′-5′-fosfodiesterasa: Una unidad liberará 1,0 μmol de nucleótidos solubles en ácido del ARN por min a pH de 5,3 a 37 °C.
3′-nucleotidasa: Una unidad hidrolizará 1,0 μmol de ortofosfato del 3′-AMP por min a pH de 7,2 a 37 °C.

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

Storage Class

11 - Combustible Solids

wgk_germany

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Fahimeh Salehi et al.
Scientific reports, 8(1), 13902-13902 (2018-09-19)
DNA targeting anticancer agents have been very successful in clinic, especially, when used in combinatorial therapy. But unfortunately, they often exhibit high levels of toxicity towards normal cells. Hence, much effort has been put into finding agents with more selectivity
Xiaohuan Jin et al.
Nucleic acids research, 47(2), 883-898 (2018-12-07)
Modified nucleosides on tRNA are critical for decoding processes and protein translation. tRNAs can be modified through 1-methylguanosine (m1G) on position 37; a function mediated by Trm5 homologs. We show that AtTRM5a (At3g56120) is a Trm5 ortholog in Arabidopsis thaliana.
Fiona J Flett et al.
Nature communications, 9(1), 24-24 (2018-01-04)
Tyrosyl-DNA phosphodiesterase (Tdp1) is a DNA 3'-end processing enzyme that repairs topoisomerase 1B-induced DNA damage. We use a new tool combining site-specific DNA-protein cross-linking with mass spectrometry to identify Tdp1 interactions with DNA. A conserved phenylalanine (F259) of Tdp1, required
A Lahm et al.
Journal of molecular biology, 215(2), 207-210 (1990-09-20)
P1 nuclease, a zinc-dependent single-strand specific endonuclease from Penicillium citrinum, has been crystallized in three different space groups using either ammonium sulphate or polyethylene glycol 4000 as the precipitating agent. The crystals diffract to between 3 A and 2.2 A.
Enhancement of nuclease P1 activity in low concentration of denaturants
Gangadhara, K. and P. Gangadhara
Enzyme and Microbial Technology, 43, 7-7 (2008)

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