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SCT152

Ensayo doble de luciferasa de luciérnaga o Renilla

Flash-type dual luciferase assay that allows measurement of both Firefly and Renilla luciferase activity in the same sample with high sensitivity and linearity.

Sinónimos:

Firefly Luciferase Assay, Dual Luciferase Assay, Bioluminescent Assay

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NACRES:
NA.54
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technique(s)

cell based assay: suitable

detection method

chemiluminescent

shipped in

ambient

storage temp.

-65 to -96°C

General description

La luciferasa de luciérnaga se utiliza mucho como reportero para estudiar la regulación y la función génica, y para el cribado farmacéutico. Es un reportero genético muy sensible debido a la ausencia de actividad luciferasa endógena en las células o tejidos de mamíferos. La luciferasa de renilla se ha utilizado como gen reportero para estudiar la regulación y la función genética in vitro e in vivo. Suele utilizarse en ensayos de reportero transcripcional múltiple o como control de transfección normalizador para ensayos de luciferasa de luciérnaga.

El ensayo de luciferasa doble de luciérnaga/Renilla permite medir la actividad luciferasa de luciérnaga y Renilla en la misma muestra con gran sensibilidad y linealidad. Primero se mide la actividad luciferasa de la luciérnaga, luego se agrega el tampón de ensayo de luciferasa de Renilla 2.0 para extinguir la actividad luciferasa de luciérnaga y medir simultáneamente la actividad luciferasa. de Renilla El tampón para el ensayo luciferasa Renilla 2.0 extingue la actividad luciferasa de la luciérnaga al nivel de las células no transfectadas, permitiendo la medición secuencial de la actividad luciferasa de luciérnaga y Renilla en la misma muestra. Se trata de un ensayo de tipo flash que requiere medir la luminiscencia inmediatamente después de agregar los reactivos de detección a la muestra de luciferasa. La señal de la luciérnaga va decayendo en el transcurso de unos 12 minutos, mientras que la señal de Renilla desaparece en el transcurso de unos 2 minutos, aunque esto puede variar dependiendo de las concentraciones de enzima.

Application

Categoría de investigación
Comunicación celular
Ensayo de luciferasa de luciérnaga
Ensayo de luciferasa doble de tipo flash que permite medir la actividad luciferasa de luciérnaga y renilla en la misma muestra con gran sensibilidad y linealidad.
Subcategoría de investigación
Tinción de células vivas

Physical form

Líquido

Preparation Note

Conservar el ensayo de la luciferasa doble de luciérnaga/renilla a -80°C. Los amortiguadores del ensayo luciérnaga y renilla se mantienen estables a -80°C durante al menos seis meses desde la fecha de recepción. Otros componentes son estables a -20°C o menos durante al menos seis meses desde la fecha de recepción. Los componentes del kit y las disoluciones de stock de D-luciferina y coelenterazina Aquaphile en agua son estables durante al menos 5 ciclos de congelación/descongelación.

Other Notes

1) 1X Tampón de lisis pasiva de luciferasa 2.0 (CS224514): 15 ml

2) Tampón de ensayo de luciferasa de luciérnaga 2.0 (CS224591): 15 ml

3) D-luciferina (CS224551): 3 X 1 mg

4) Tampón de ensayo de luciferasa de renilla 2.0 (CS224580): 15 ml

5) Coelentarazina Aquaphile (CS224581): 3 X 200 µg

Disclaimer

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.

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storage temp.

-65 to -96°C

storage temp.

-65 to -96°C

storage temp.

-10 to -25°C

storage temp.

-65 to -96°C

detection method

chemiluminescent

detection method

chemiluminescent

detection method

chemiluminescent

detection method

chemiluminescent

shipped in

ambient

shipped in

ambient

shipped in

ambient

shipped in

ambient


Clase de almacenamiento

10 - Combustible liquids



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Artículos

Firefly luciferase is a sensitive reporter for gene studies due to its absence in mammalian cells or tissues.


Xinyu Tang et al.
Bioengineered, 12(1), 4643-4653 (2021-07-30)
Non-small cell lung cancer (NSCLC) is one of the main causes of death in the world. To improve the diagnostic level and find new biological targets,GSE datasets were selected from GEO databaseto analyze the differential expression genes and construct ceRNA
Joseph M Chan et al.
Cancer cell, 39(11), 1479-1496 (2021-10-16)
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Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. What volume of reagent, how many assays from one kit, what plates are needed and how is assay run? - very little information currently on webpage.

    1 answer
    1. The SCT152 kit is sufficient for approximately 150 reactions. Here is the data sheet: https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/815/113/sct152ds.pdf

      Helpful?

  2. How many reactions is it designed for?

    1 answer
    1. This kit includes a several components, including 3 x 200 ug Aquaphile Coelenterazine. Each 200 ug vial is sufficient to perform 50 tests when used as directed. Please see the link below to review the kit protocol:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/815/113/sct152ds.pdf

      Helpful?

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