Terpenos en el cannabis: perfil e importancia
El perfilado de los terpenos es fundamental para demostrar la identidad y la eficacia médica de las variedades o cepas del cannabis. Los terpenos son los principales componentes orgánicos de las resinas y los aceites esenciales del cannabis con olor característico y propiedades organolépticas distintivas. Compuestos por combinaciones volátiles y semivolátiles de subunidades de C5 isopreno, se propone que los terpenos potencian sinérgicamente los efectos terapéuticos de los cannabinoides mediante el “efecto séquito”. Dado que el tipo y las cantidades de terpenos difieren entre los linajes genéticos del cannabis, como Cannabis sativa, Cannabis indica y Cannabis ruderalis, se requieren métodos y patrones de análisis sólidos para la identificación de las variedades, así como la validación científica de sus propiedades medicinales y farmacológicas.
- Requisitos legales y normativos para el análisis de los terpenos en el cannabis
- Procedimiento de trabajo para el perfilado de los terpenos del cannabis
- Preparación de muestras de terpenos del cannabis mediante extracción o espacio de cabeza-SPME
- Patrones de calibración para la cuantificación de los terpenos del cannabis
- Análisis mediante GC-MS de los terpenos en el cannabis
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REQUISITOS LEGALES Y NORMATIVOS PARA EL ANÁLISIS DE LOS TERPENOS EN EL CANNABIS
El consumo creciente del cannabis como droga recreativa o medicinal exige una normativa estricta de las prácticas de fabricación y de los patrones de calidad derivados de los materiales de origen del cannabis. Para abordar las preocupaciones sobre la eficacia terapéutica, la inocuidad y la calidad de los productos derivados del cannabis, deben realizarse pruebas de control de la calidad del cannabis para determinación de los terpenos en distintas zonas geográficas, como Estados Unidos y Canadá, donde el panorama de la legalización está cambiando rápidamente.
PROCEDIMIENTO DE TRABAJO PARA EL PERFILADO DE LOS TERPENOS DEL CANNABIS
El procedimiento analítico típico de los terpenos en el cannabis, el cáñamo y sus productos consiste en la preparación de las muestras mediante extracción con disolvente o microextracción en fase sólida basada en espacio de cabeza, preparación de patrones y calibración, separación mediante cromatografía de gases seguida de detección espectrométrica de masas y análisis de datos del perfil de terpenos.
PREPARACIÓN DE MUESTRAS DE TERPENOS DEL CANNABIS MEDIANTE EXTRACCIÓN O ESPACIO DE CABEZA- SPME
Los laboratorios de análisis utilizan hoy en día de forma destacada una de las dos técnicas siguientes para la preparación de muestras en el análisis de terpenos del cannabis: Extracción con disolvente simplificada o microextracción en fase sólida basada en el espacio de cabeza (HS-SPME) . La preparación de la muestra suele preceder al análisis mediante GC-FID o GC-MS.
La técnica HS-SPME ofrece las siguientes ventajas:
- garantizar que no se extraigan juntos los componentes no volátiles de la matriz
- proporcionar resultados con mayor sensibilidad
- determinar de manera simultánea los terpenos del cannabis y los disolventes residuales que permanecen después de su uso en la extracción con alcoholes e hidrocarburos
- eliminar la necesidad de instrumentos especiales
- permitir la preparación manual de las muestras o con automuestreador
La extracción con disolventes tampoco requiere instrumentación especial y es una alternativa cómoda cuando las interferencias de la matriz no son críticas.
PATRONES DE CALIBRACIÓN PARA LA CUANTIFICACIÓN DE LOS TERPENOS DEL CANNABIS
El perfilado y la cuantificación de los terpenos en los productos del cannabis requiere el uso de patrones de referencia auténticos y precisos. Dadas las propiedades isoméricas de muchos terpenos, las referencias que caracterizan el isómero o el enantiómero pueden ser importantes para la identificación y cuantificación. Los materiales de referencia certificados (CRM) fabricados de acuerdo con la ISO17034 ofrecen precisión de concentración con incertidumbre y trazabilidad, y se recomiendan para una cuantificación precisa. Los CRM suelen diluirse en patrones de trabajo y se realizan curvas de calibración en el rango de referencia para el análisis de la muestra.
ANÁLISIS MEDIANTE GC- MS DE LOS TERPENOS EN EL CANNABIS
Los métodos basados en GC-MS y GC-FID están a la vanguardia del perfilado y la cuantificación de terpenos en las pruebas de terpenos del cannabis con una excelente respuesta de ionización bajo fuentes de ionización electrónica (EI).
La GC-MS es una técnica eficaz y sólida para investigar los terpenos en productos de cannabis, proporcionando resolución, identificación y cuantificación cromatográficas. Las columnas quirales para GC pueden mejorar la identificación al superar los retos planteados por los isómeros y las diferencias en el carácter aromático de los terpenos. Las técnicas de GC x GC son adecuadas para el perfilado de los terpenos en matrices de cannabis complejas, con indexación del tiempo de retención para una mayor precisión.
El uso de patrones, reactivos y fungibles cromatográficos de gran calidad es un requisito previo para la detección y el análisis precisos y fiables de los terpenos en cultivos de cannabis y productos derivados del cannabis. La elección correcta de los CRM, los patrones analíticos de referencia, los disolventes de gran pureza y las columnas constituyen la base del desarrollo y validación de los métodos, la calibración de los instrumentos, el control de calidad y la comprobación de idoneidad del sistema.
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