ENDOARGS-RO

Endoproteinasa Asp-N Calidad de secuenciación

from Pseudomonas fragi

• Sinónimos: proteasa
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.24.33 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 12352204

Propiedades

• Ensayo: ≥90% (SDS-PAGE)
• Formulario: lyophilized
• actividad específica: ≥20000 units/mg protein
• mol peso: 27 kDa
• envase: pkg of 2 μg (11420488001); pkg of 3 × 2 μg (11054589001)
• fabricante / nombre comercial: Roche
• pH óptimo: 7.0-8.0
• intervalo de pH: 6.5-9.0
• temp. de almacenamiento: 2-8°C

Descripción

Descripción general

El tipo natural de Pseudomonas fragi segrega una metaloproteasa que rompe los enlaces peptídicos N-terminales en los aminoácidos hidrófilos pequeños. Mutante de esta cepa produce la endoproteinasa Asp-N de calidad para la secuenciación, que se aísla como una proteasa muy purificada y específica.

Especificidad

La endoproteinasa Asp-N calidad de secuenciación es una metaloproteasa. Disoluciones tampón de fosfato, acetato o Tris a pH 6,0–8,5, hidroliza de manera específica los enlaces peptídicos N-terminales de los ácidos aspártico y cisteico. Si la cisteína está reducida o alcalinizada, sólo se hidroliza -↓-Asp-X.
La especificidad de la endoproteinasa Asp-N calidad de secuenciación se verifica con el glucagón como sustrato. Se incuban concentraciones elevadas de endoproteinasa Asp-N de calidad de secuenciación (una parte en peso de encima con 10 partes en peso de glucagón) para detectar trazas de impurezas como proteasas contaminantes.
Inactivación por calor: La proteasa se detiene mediante ebullición durante 5 minutos.

Aplicación

Utilice la endoproteinasa Asp-N calidad de secuenciación para análisis de la estructura proteica y análisis de secuencia.[1][2]

Nota de preparación

Concentración de trabajo: 2 μg /50 μl de agua bidestilada
Un vial (= 2 μg de encima) se disuelve en 50 μl de agua bidestilada, produciendo una concentración amortiguadora de Tris-HCl 10 mM pH 7,5.
disolución de trabajo: El disolvente recomendado es el agua bidestilada.
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): de -15 a -25 °C
Una disolución en agua bidestilada es estable durante1 semana como máximo entre 2 y 8 °C, y en torno a 1 mes entre -15 y -25 °C; deben evitarse los descongelamientos repetidos.

Reconstitución

La endoproteinasa Asp-N grado secuenciación liofilizada se reconstituye en 50 μl de agua bidestilada. Esto produce una concentración amortiguadora de Tris-HCl 10 mM, pH 7,5. Para evitar la autólisis, la temperatura de incubación no debe superar los 37 °C.

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash