MABC604

Anticuerpo anti-MLKL, clon 3H1

clone 3H1, from rat

• Sinónimos: Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 3H1, monoclonal
• Application: ICC, IP, WB
• Citations: 123

Propiedades

• biological source: rat
• Quality Level: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 3H1, monoclonal
• species reactivity: mouse
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NP_083281
• UniProt accession no.: Q9D2Y4
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: mouse ... Mlkl(74568)

Descripción

General description

La MLKL, también conocida como proteína de tipo dominio de cinasa de linaje mixto, y codificada por el gen MLKL, es una proteína interesante que se requiere para la ejecución de necrosis o necroptosis programadas, por ejemplo en respuesta a la necrosis inducida por TNF-alfa. La MLKL es un componente del “necrosoma”, el complejo multiproteico que desencadena la muerte celular por necroptosis inducida por el factor de necrosis tumoral (TNF). La necrosis programada inducida por TNF-α también requiere las actividades de las serina-treonina cinasas RIP1 y RIP3 que interactúan con los receptores y también interactúan directamente con la proteína de tipo dominio de cinasa de linaje mixto MLKL. RIP3 es una cinasa final esencial en la necroptosis. La pseudocinasa MLKL funciona como un sustrato de RIP3 para intervenir en la señalización posterior y cuando forma un complejo con la MLKL, el complejo RIP3-MLKL es estabilizado por AMP-PNP para adoptar una conformación inactiva.

~52 kDa observados. 54,48/30,28 (isoforma 1/2 humana) y 54,32/53,38 kDa (isoforma 1/2 de ratón) calculados. En algunos lisados celulares pueden observarse bandas no caracterizadas.

Immunogen

Epítopo: Región corchete.

Péptido lineal conjugado con KLH que corresponde a una secuencia de la región N-terminal del conector de doble hélice (corchete) hasta el dominio pseudocinasa de la proteína MLKL de ratón (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077; Murphy, J.M., et al. (2013). Inmunidad. 39(3):443-453).

Application

Análisis de inmunocitoquímica: Un lote representativo detectó la MLKL en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF) de ratones naturales, pero no en ratones Mlkl-/- (cortesía del Prof. James M. Murphy, Walter and Eliza Hall Institute, Australia).

Análisis de inmunoprecipitación: Un lote representativo causó inmunoprecipitación de MLKL a partir de un extracto soluble de fibroblastos dérmicos de ratón Mlkl-/- (MDF) que albergan la construcción de expresión de MLKL de ratón natural inducible por doxiciclina solo después del tratamiento con doxiciclina, pero no antes (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó Q-VD-OPh (TSQ; Nº de ref. 551476) la translocación de membrana inducida por el tratamiento del fragmento N-terminal de la MLKL-N murina y equina (a.a. 1-180 y 1-189, respectivamente) expresada exógenamente en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF) de ratones Mlkl-/- (Tanzer, M.C., et al (2016). Cell Death Differ.. En prensa).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó la MLKL células HT-29 y U937 humanas(Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Lotes representativos detectaron translocación de membrana de MLKL en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF) tras tratamiento con Q-VD-OPh (TSQ; Nº de ref. 551476) (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Lotes representativos detectaron la expresión de MLKL en fibroblastos de ratón L292, así como en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF), fibroblastos embrionarios de ratón (MEF) y macrófagos de médula ósea (BMDM) de ratones naturales, pero no Mlkl-/- (Cook, W.D., et al. (2014). Cell Death Differ. 21(10):1600-1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Inmunidad. 39(3):443-453).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó la MLKL de longitud completa recombinante de ratón, así como los fragmentos de la MLKL a.a. 1-180 y los a.a. 124-464, pero no los fragmentos de a.a. 1-125 ni a.a. 179-464, (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia:: Un lote representativo detectó la expresión de MLKL en todos los tejidos analizados excepto el cerebro de ratones naturales, mientras que no se observó ninguna banda específica en los tejidos de los ratones Mlkl-/- (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).

Este anticuerpo anti-MLKL, clon 3H1, está validado para utilizar en inmunocitoquímica, inmunoprecipitación e inmunoelectrotransferencia (western blot) para la detección de MLKL.

Physical form

IgG de rata purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Analysis Note

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de tejido cardiaco de ratón.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (Western blot): 0,5 µg/ml de este anticuerpo detectaron la MLKL en 10 µg de lisado de tejido cardiaco de ratón.

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

Información de seguridad

• Clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable