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03-310

Reactivo SHAPE in vivo para análisis de estructura de ARN celular in vivo

liquid

Sinónimos:

Reactivo SHAPE

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Acerca de este artículo

UNSPSC Code:
12161503
NACRES:
NA.32
eCl@ss:
32161000
Form:
liquid
Storage temp.:
-10 to -25°C
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Servicio técnico
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Nombre del producto

Reactivo SHAPE in vivo para análisis de estructura de ARN celular in vivo, permits the analysis of RNA structure in living cells

Quality Level

form

liquid

manufacturer/tradename

Upstate®

concentration

2 M

technique(s)

activity assay: suitable (reverse transcriptase)

shipped in

dry ice

storage temp.

-10 to -25°C

General description

Características y ventajas
  • Disolución sin ARNasa lista para usar
  • Baja toxicidad que permite su uso con células vivas
  • Gran permeabilidad celular para una rápida modificación del ARN
  • Reacciona con todos los nucleótidos de ARN sin sesgo para cartografía se alta resolución


El reactivo SHAPE in vivo se utiliza para determinar la estructura del ARN. Este reactivo contiene una forma muy pura de imidazolida del ácido 2-metilnicotínico (NAI). Este compuesto forma aductos 2’-O en regiones monocatenarias del ARN que pueden ser detectadas por la acilación selectiva de los grupos 2’-hidroxilo y analizada por extensión del cebador (SHAPE).

A diferencia de otros reactivos utilizados para el método SHAPE, el reactivo SHAPE in vivo basado en NAI– se absorbe rápidamente en las células y está formulado para tener bajos niveles de toxicidad, por lo que resulta ideal para utilizar en células vivas. A diferencia de otros reactivos utilizados para el análisis SHAPE, el reactivo SHAPE in vivo reacciona por igual con los cuatro nucleótidos de ARN. Esta combinación de baja toxicidad, rápida absorción y ausencia de sesgo de nucleótido permite el análisis de alta resolución de la estructura del ARN en una variedad de sistemas vivos.
Plegarse en estructuras de orden superior permite a los ARN funcionar en el interior de las células vivas y formar complejos dinámicos con las proteínas efectoras. Predecir estas estructuras tridimensionales es un reto y, por lo tanto, se han desarrollado una serie de técnicas de sondeo para estudiar el plegamiento del ARN.

Compuestos como la imidazolida del ácido 2-metilnicotínico (NAI) contenidos en reactivo SHAPE in vivo dan lugar a la formación de aductos 2-O. Estos aductos se forman rápidamente en el ARN monocatenario no emparejado y mucho más despacio en el ARN con bases emparejadas (bicatenario). A continuación puede analizarse el ARN modificado por extensión del cebador. Los nucleótidos modificados no son extendidos por las ADN polimerasas dependientes del ARN, lo que permite detectar los sitios de modificación.

Physical form

NAI 2 M en DMSO
Vial de 0,5 ml que contiene NAI (>97 % puro) 2 M en disolución de DMSO

Preparation Note

Conservar el NAI a -20°C en un congelador no frost protegido de la luz. Con el almacenamiento adecuado (protegido de la luz y evitando excesivos ciclos de congelación-descongelación) este producto es estable durante un máximo de 6 meses a partir de la fecha de recepción.

Analysis Note

La pureza del compuesto NAI se prueba mediante HPLC.

Other Notes

Imidazolida del ácido 2-metilnicotínico (NAI) en DMSO

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.


Clase de almacenamiento

10 - Combustible liquids

wgk

WGK 3



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Kevin A Wilkinson et al.
Nature protocols, 1(3), 1610-1616 (2007-04-05)
Selective 2'-hydroxyl acylation analyzed by primer extension (SHAPE) interrogates local backbone flexibility in RNA at single-nucleotide resolution under diverse solution environments. Flexible RNA nucleotides preferentially sample local conformations that enhance the nucleophilic reactivity of 2'-hydroxyl groups toward electrophiles, such as
Robert C Spitale et al.
Nature chemical biology, 9(1), 18-20 (2012-11-28)
RNA structure has important roles in practically every facet of gene regulation, but the paucity of in vivo structural probes limits current understanding. Here we design, synthesize and demonstrate two new chemical probes that enable selective 2'-hydroxyl acylation analyzed by



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