Podłoża do różnicowania i identyfikacji Salmonelli

Współczesne wykorzystanie klasycznych metod hodowlanych do identyfikacji Salmonelli, silnego patogenu przenoszonego przez żywność

Zanieczyszczenie Salmonellą jest drugą główną przyczyną chorób przenoszonych przez żywność na całym świecie. Kontrolowanie ognisk Salmonelli jest ważnym zadaniem dla organów regulacyjnych ds. żywności, restauracji i przemysłu spożywczego w ogóle.

Rodzina Salmonella obejmuje ponad 2300 serotypów bakterii, ale dwa typy, Salmonella enteritidis i Salmonella typhimurium, są odpowiedzialne za około połowę wszystkich zakażeń u ludzi. Większość ognisk Salmonella jest związana z nabiałem, drobiem i produktami mięsnymi, ale Salmonella może rosnąć na prawie każdej żywności. Kurczak, jaja i ich produkty pochodne są szczególnie zagrożone.

Rysunek 1. Bakterie Salmonella

Kontrola mikrobiologiczna w przemyśle spożywczym odgrywa kluczową rolę w zapobieganiu wybuchom epidemii Salmonella. Testy i podłoża stosowane do identyfikacji Salmonella wykorzystują unikalne aspekty fizjologii lub biochemii Salmonella w stosunku do innych rodzajów z rodziny Enterobacteriaceae. Na przykład bakterie z rodzaju Salmonella są w większości fakultatywnymi beztlenowcami, ujemnymi pod względem oksydazy, dodatnimi pod względem katalazy i Gram-ujemnymi pałeczkami. Większość szczepów jest ruchliwa i fermentuje glukozę, wytwarzając zarówno kwas, jak i gaz. Podłoża stosowane obecnie do różnicowania i identyfikacji Salmonella są nadal oparte na wykrywaniu fermentacji węglowodanów wskazanej przez wskaźnik pH (patrz także Tabela 1 dla zdolności fermentacji węglowodanów), wykrywaniu aktywności proteolitycznej, produkcji siarkowodoru i selektywności. Większość nowoczesnych pożywek łączy również niektóre z tych systemów wykrywania, aby uczynić pożywki bardziej niezawodnymi. Lista najpopularniejszych mediów selektywnych i różnicujących znajduje się w Tabeli 2.

Tabela 1. Typowa zdolność Salmonelli do fermentacji węglowodanów

	Fermentacja		Nr kat. No.
Węglowodany	Kwas	Gaz	Cabohydrate Discs
Adonitol	-	-	55876
Arabinoza	+/-	+/-	80372
Cellobiose	-	-	56481
Dekstroza	+	+/-	63367
Dulcitol	+/-	+/-	73044
Fruktoza	+/-	+/-	53901
Galaktoza	+	+/-	89608
Inositol	+/-	+/-	89614
Laktoza	-	-	28816
Maltoza	+	+/-	77653
Mannitol	+	+/-	94438
Mannoza	+/-	+/-	94445
Melibioza	+	+	93196
Raffinose	-	-	94226
Rhamnose	+/-	+/-	93999
Salicyna	-	-	92971
Sorbitol	+	+/-	93998
Sacharoza	-	-	94309
Trehaloza	+	+/-	92961
Xylose	+	+/-	07411

Tabela 2.Podłoża selektywne i różnicujące Salmonella (lista niekompletna, więcej na sigma-aldrich.com/salmonella)

Marka	Kot #	Nazwa
Sigma-Aldrich	A0715	Andrade Peptone Water
Sigma-Aldrich	28943	Woda peptonowa Andrade, Vegitone
Sigma-Aldrich	95388	Agar z siarczynem bizmutu
Sigma-Aldrich	15835	BPL Agar
Sigma-Aldrich	70134	Brilliant Green Agar, modyfikowany
Sigma-Aldrich	16026	Brilliant Green Phenol Red Lactose Sucrose Agar
Sigma-Aldrich	36408	Bromcresol Purple Broth
Sigma-Aldrich	22520	China Blue Lactose Agar
Sigma-Aldrich	55420	CLED Agar
Sigma-Aldrich	70135	DCLS Agar
Sigma-Aldrich	90035	DCLS Agar No. 2
Sigma-Aldrich	D2935	Decarboxylase Broth Base, Moeller
Sigma-Aldrich	D7809	Deoxycholate Citrate Agar
Sigma-Aldrich	E5399	Endo Agar
Sigma-Aldrich	70137	ENDO Agar (Base)
Sigma-Aldrich	16447	Glucose Bromcresol Purple Agar
Sigma-Aldrich	51490	Hektoen Enteric Agar
Sigma-Aldrich	60787	Kligler Agar
Sigma-Aldrich	61792	Leifson Agar
Sigma-Aldrich	66304	Lysine Decarboxylase Broth
Sigma-Aldrich	62915	Lysine Iron Agar
Sigma-Aldrich	70143	Mac Conkey Agar No 1
Sigma-Aldrich	19352	Mac Conkey Agar No 1, Vegitone
Sigma-Aldrich	M8302, 94216	MacConkey Agar with Crystal Violet, Sodium Chloride and 0.15% soli żółci
Sigma-Aldrich	70144	MacConkey Broth
Sigma-Aldrich	75717, 16377	MacConkey broth purple
Sigma-Aldrich	63014	MacConkey MUG Agar
Sigma-Aldrich	51405	MacConkey-Agar (bez soli)
Sigma-Aldrich	69965	Mossel Broth
Sigma-Aldrich	43052	Muller-Kauffmann Tetrathionate Broth, Base (ISO)
Sigma-Aldrich	75315	OF Test Nutrient Agar
Sigma-Aldrich	81648	Pril® Mannitol Agar
Sigma-Aldrich	04584	Rappaport Vassiliadis Broth wg. wg DIN EN ISO 6579:2002
Sigma-Aldrich	17173	Rappaport Vassiliadis Broth, zmodyfikowany
Sigma-Aldrich	R0773	Rappaport Vassiliadis Medium
Sigma-Aldrich	92322.	Podłoże Rappaport Vassiliadis (baza), modyfikowane, półstałe
Sigma-Aldrich	84368	Salmonella Agar wg Önöz
Sigma-Aldrich	84370	Salmonella Enrichment Broth
Sigma-Aldrich	70153	Selenite Broth (Base)
Sigma-Aldrich	84922	Selenite Cystine Broth
Sigma-Aldrich	85438	SIM Medium
Sigma-Aldrich	85463	Simmons Citrate Agar
Sigma-Aldrich	85640	SS-Agar
Sigma-Aldrich	86352	TBG Broth
Sigma-Aldrich	88151	Tetrathionate Broth
Sigma-Aldrich	88148	Tetrathionate Enrichment Broth według Muller-Kauffmann
Sigma-Aldrich	44940	Triple Sugar Iron Agar
Sigma-Aldrich	51463	Urea Broth
Sigma-Aldrich	42376	Violet Red Bile Agar, Vegitone
Sigma-Aldrich	70189, 79873	Violet Red Bile Glucose Agar
Sigma-Aldrich	17213	Violet Red Bile Glucose Agar bez laktozy
Sigma-Aldrich	53605	Violet Red Bile Glucose Agar bez laktozy, Vegitone
Sigma-Aldrich	41270	Violet Red Bile Lactose Dextrose Agar
Sigma-Aldrich	95273	VRB MUG Agar
Sigma-Aldrich	95586	XLD Agar
Sigma-Aldrich	76721	XLT4 Agar (Base)

Dodatkowo nasza obecna technologia oferuje podłoża chromogenne, które sprawiają, że identyfikacja jest jeszcze bardziej niezawodna i szybsza, ponieważ wykrywają one charakterystyczny enzym Salmonelli. Reakcje te opierają się na rozszczepieniu substratu chromogennego, co powoduje widoczną zmianę koloru (patrz Tabela 3).

Tabela 3.Podłoża chromogenne dla Salmonelli

Marka	Cat #	Name
Sigma-Aldrich	00563	HiCrome™ MM Agar
Sigma-Aldrich	90918	HiCrome™ RajHans Medium, Modified
Sigma-Aldrich	78419	HiCrome™ Salmonella Agar
Sigma-Aldrich	05538	HiCrome™ Salmonella Agar, Improved
Sigma-Aldrich	84369	Salmonella Chromogen Agar
Sigma-Aldrich	01993	Salmonella Chromogen Agar Set

Rysunek 2. Agar HiCrome™ Salmonella, ulepszony

Wykrywanie siarkowodoru Produkcja mikroorganizmów, takich jak Salmonella

Duża liczba bakterii może wytwarzać H₂S w niewielkich ilościach z aminokwasów zawierających siarkę w pożywkach węglowodanowych. W połączeniu z octanem ołowiu, H₂S wytworzy czarny osad, powodując widoczną czarną reakcję na pasku papieru. Metoda octanu ołowiu jest bardzo czuła, umożliwiając wykrycie śladowych poziomów siarkowodoru.

Test z paskami: Zaszczepić wodę peptonową (Nr kat. 70179) podejrzanym organizmem. Włóż pasek papieru z octanem ołowiu między korek a wewnętrzną ścianę probówki, powyżej zaszczepionej pożywki i inkubuj w temperaturze 35 °C przez 18-24 godziny. Reakcja pozytywna objawia się zaczernieniem dolnej części paska. W przypadku reakcji negatywnej nie powinno pojawić się zaczernienie (patrz Rysunek 3).

Rysunek 2.1. Organizmy testowe Organizmy testowe

Rysunek 3. Paski testowe siarkowodoru

Rysunek 4. Szybki test oparty na wykrywaniu rRNA

Materiały

Przepraszamy, wystąpił nieoczekiwany błąd

Network error: Failed to fetch