Sejtdiszszociációs reagensek
A natív környezetük reprodukálása érdekében az adherens sejtfenotípusokat (például a hámsejteket) általában szövetkultúrával kezelt felületekre ültetik, amelyekhez a túlélés és a szaporodás érdekében kapcsolódnak. A szaporításhoz, a számbavételhez és a későbbi elemzéshez az adherens sejteket és a szilárd szövetekből származó sejteket szuszpenziók létrehozása érdekében szét kell választani. Egysejtes szuszpenziókra van szükség a sejtszámláláshoz, a szubkultúrához való újratelepítéshez és a sejtvizsgálatokhoz/elemzésekhez.
A disszociációs reagensek között lehetnek természetes módon előforduló enzimek vagy kíméletesebb, nem enzimatikus alternatívák. Ezek a reagensek úgy működnek, hogy kalcium-kelátorként megakadályozzák a káderinek felszínhez vagy egymáshoz való kötődését, így a sejtek a tenyésztési folyamat során elszabadulnak ezekről a felületekről. A sejttenyésztési munkafolyamatban használt sejtdiszszociációs reagensek specifikusak lehetnek az extracelluláris mátrix (ECM) szubsztrátokra.
Products
Tripszin, rekombináns tripszin, StableCell™ Trypsin
A tripszin egy szerin proteáz és az egyik leggyakoribb leválasztó enzim, amelyet adherent sejtvonalak és szöveti disszociációhoz használják. A nyers tripszin-készítmények általában mindkét alkalmazásban hatékonyabbnak bizonyultak, de a sejtek magas tripszin-koncentrációval vagy túl hosszú ideig történő inkubálása a sejtmembránok károsodását kockáztatja, és elpusztíthatja a sejteket. A tenyésztett sejteket leggyakrabban EDTA-val (etiléndiamintetraecetsavval) kombinált tripszinnel történő kezeléssel távolítják el a tenyésztési szubsztrátból, amelyben a tripszin koncentrációja 0,025% és 0,5% között lehet.
StableCell™ Trypsin oldatokat úgy fejlesztettük ki, hogy a sejtek leválasztását a standard tripszinoldatokhoz hasonlóan végezzék el, anélkül, hogy a tripszint aliquotálni, lefagyasztani és felolvasztani kellene. Ez jelentős időmegtakarítást eredményez, mivel a sejtek passzázsához vagy kísérletekhez nem kell aliquotálni és várni a tripszin felolvasztására, és értékes helyet szabadít fel a laboratóriumi fagyasztóládákban. StableCell™ tripszin oldatainkat 2-8 °C-on ajánlott tárolni, de vizsgálataink szerint a StableCell™ tripszin 37 °C-on tárolva is megőrzi >90%-os aktivitását és teljesítményét.
Kollagenáz és diszpáz
A kollagenáz hasítja a peptidkötéseket a natív, hármas héjú kollagénben. A natív kollagén hidrolizálására való egyedülálló képessége miatt széles körben használják állati szövetekből történő sejtek izolálásához. A kollagenázok számos mikroorganizmusban és számos különböző állati sejtben fordulnak elő. A leghatásosabb az anaerob baktérium Clostridium histolyticum által szekretált "nyers" kollagenáz.
A diszpázok gyors, hatékony, kíméletes és semleges proteázok, amelyek képesek a kultúrában lévő ép hámlemezeket leválasztani a szubsztrátumról. A Dispase I-t tüdőszövetek emésztésére és sejtek feldolgozására használták áramlási festéshez, valamint egér CD4 T-sejtek izolálására.
Diszszociációs reagensek speciális kultúrákhoz
Az olyan sejt- és szövettípusok disszociációjához vagy leválasztásához, amelyekhez kíméletesebb enzimaktivitás szükséges, a Accutase® és Accumax™ oldatok hatékony enzimeket használnak alacsonyabb koncentrációban. Ezek az oldatok:
- Hatékonyan leválasztják az embrionális és neuronális őssejteket
- Kíméletesen leválasztják a sejtek életképességének megőrzése érdekében & fokozhatják a sejtek hozamát
- Nem igényelnek semlegesítést /li>
Egysejtes analízis
Az egysejtes analízishez életképes egysejtűekre van szükség, amikor szövetmintákkal dolgozik. Ezekkel az elemzésekkel a kutatók őssejt-, immunológiai és rákkutatáshoz tanulmányozhatják a sejtkultúra-populációk variációit. Fedezze fel kiváló minőségű disszociációs reagenseinket, amelyek elengedhetetlenek a protokollok optimalizálásához, a legjobb gyakorlatok kialakításához és a megbízható egysejtes analízis adatok biztosításához.
Kapcsolódó források
- Brochure: Enzymes for Cell Dissociation and Lysis
Including enzymes for cell detachment and tissue dissociation, enzymes for cell lysis and protoplast preparation, and proteases for mitochondria isolation
- Trypsin Cell Dissociation Protocol
Trypsin is commonly used for dissociating adherent cells from surfaces. A wide variety of trypsin solutions are available to meet your specific cell line requirements.
- Szöveti disszociációs útmutató: Kollagenáz, diszpáz és liberáz enzimtípusok
Kollagenáz útmutató.A kollagenázokat, az állati szöveteket összetartó natív kollagént lebontó enzimeket számos mikroorganizmus és számos különböző állati sejt állítja elő.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?