Dulbecco's Modified Eagle Medium F12 (DMEM F12)
Az elmúlt években a kutatók számos sejtvonal szérummentes táptalajon történő tenyésztéséről számoltak be, amely a szérum helyett tápanyagokat, növekedési faktorokat és hormonokat tartalmaz. Mather és Sato (BBRC, 1985) beszámoltak a Leydig- és Sertoli-sejtek sikeres tenyésztéséről olyan szérummentes táptalajban, amely inzulint, transzferrint, epidermális növekedési faktort, leutinizáló hormont vagy follikulus-stimuláló hormont, szomatomedint és növekedési hormont tartalmazott.
Bár a hormonok és koncentrációik a vizsgált sejttípusra specifikusak, a vizsgálatokhoz optimálisnak talált táptalaj a Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) és a Ham's F-12 tápanyagkeverék 1:1 arányú keveréke volt. Ez a DMEM/F12 médiumként ismert keverék többek között 21 aminosavat, 10 vitamint, glükózt, vasat és cinket tartalmaz.
A DMEM/F12 gazdagabb és összetettebb médium, mint a DMEM. A készítménybe HEPES puffer is bekerülhet 15 mM végkoncentrációban, hogy kompenzálja a pufferkapacitás veszteségét, amely a szérum eltávolításával keletkezik. Ez a szintetikus táptalaj nem tartalmaz szérumot, fehérjéket, lipideket vagy növekedési faktorokat, ezért a sejttenyésztés típusától függően szükség lehet a fetal bovine serum (FBS) kiegészítésére. Egyes kereskedelmi készítmények tartalmazhatnak vagy nem tartalmazhatnak glutamint vagy fenolvöröset.
DMEM/F12 Alkalmazások
A DMEM/F12 fejlett bázikus táptalajt gyakran használják olyan alkalmazásokban, amelyek alacsony szérumtartalmú vagy szérummentes táptalajt igényelnek, például 3D organoidok tenyésztése vagy őssejtkultúra. A DMEM/f12 médiumok az alacsony szérum- vagy szérummentes körülményeket igénylő sejttranszfekciók optimalizálásához is használhatók.
A gyakran csökkentett szérum- vagy szérummentes környezetet igénylő őssejttenyésztés mellett az elsődleges sejtek DMEM/F12 médiumban is tenyészthetők. Ide tartoznak a fibroblasztok, MDCK sejtek, neuronális sejtvonalak, gliasejtek és simaizomsejtek, amelyek a magas szérumkoncentrációval kiegészített primer sejtekkel egyenértékű vagy jobb növekedést és működést mutatnak. A DMEM/F12 tápfolyadékkal tenyésztett sejtek ugyanolyan sejtmorfológiát mutatnak, mint a magas szérumtartalmú körülmények között tenyésztett sejtek.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?