Áramlási citometria
A flow-citometria olyan technológia, amely egyetlen vagy több lézert használ az egyes sejtek multiparametrikus elemzéséhez. Minden egyes sejtet vagy részecskét látható fényszórással vagy fluoreszcenciával elemeznek, miközben a sejtek gyorsan elhaladnak az egyes lézerek mellett. A fényszórás-elemzéstől függetlenül a fluoreszcencia-mérések a szokásos fluoreszcens fehérjék (pl. zöld fluoreszcens fehérje, GFP) transzfekciójával és expressziójával, valamint fluoreszcens konjugált antitestekkel vagy fluoreszcens festékekkel történő festéssel érhetők el. Az áramlási citometria nagy teljesítményű technológia, amelyet gyakran alkalmaznak molekuláris és sejtbiológiai kutatási alkalmazásokban, beleértve az immunológiát, a rákbiológiát és a betegségkutatást.
Kapcsolódó műszaki cikkek
- Uncover tips for multicolor flow cytometry experiments, including the challenges in multicolor flow cytometry, steps for how to build a multicolor flow cytometry panel, tandem dyes, and tools for multicolor assay design.
- Flow cytometry dye selection tips match fluorophores to flow cytometer configurations, enhancing panel performance.
- A hibaelhárítási útmutató megoldásokat kínál a gyakori áramlási citometriás problémákra, biztosítva a jobb elemzési teljesítményt.
- Elérhető fluoreszcens in situ hibridizációs (FISH) eljárások, reagensek és berendezések.
- A fluoreszcencia élettartam mérés előnyös az intenzitás alapú mérésekkel szemben. Alkalmazásai közé tartoznak a fluoreszcencia élettartam-mérések, az érzékelés és az FLI.
- Mindent látni (14)
Kapcsolódó protokollok
- Explore our flow cytometry guide to uncover flow cytometry basics, traditional flow cytometer components, key flow cytometry protocol steps, and proper controls.”
- Ismerje meg az áramlási citometriás protokollok legfontosabb lépéseit, hogy a következő áramlási citometriás kísérletet könnyedén elvégezhesse.
- Immunofluorescence Protocol details Prestige Antibodies' subcellular localization studies in A-431, U-2 OS, and U-251MG cell lines.
- Hogyan festhetünk organoidokat? Az organoid kultúrák immunfluoreszcens (IF) és immuncitokémiai (ICC) festésének teljes, lépésről-lépésre történő protokollja antitestek felhasználásával.
- View instructional videos and download User Manuals for Milli-Q® SQ 2Series lab water systems. You’ll be up and running in no time. Buy online systems, accessories, cartridges and services.
- Mindent látni (8)
További cikkek és protokollok keresése
Áramlási citometria antitestek és címkék
Az áramlási citometriai elemzések elvégzéséhez különböző áramlási citometriai antitesteket és címkéket kell használni. Az áramlási citometriás antitestek specifikusan kötődnek a különböző sejtmarkerekhez, segítve a sejttípus jellemzését és a kísérlet részeként a fehérjeexpresszióban bekövetkező változások értékelését. A kísérleti tervtől függően számos típusú jelölőanyag használható az antitestek vizualizálására az áramlási citométerben történő kimutatáshoz, beleértve a nukleinsavfestékeket, a sejtéletképességi festékeket, a polimerfestékeket, a kvantumpontokat, a kis szerves molekulákat és a fluoreszcens fehérjéket. Az antitestek jelölése jellemzően közvetlen konjugálással (akár kereskedelmi forgalomban kapható termékként, akár a végfelhasználó számára a reakció elvégzését lehetővé tevő konjugációs készletként) vagy másodlagos antitestek alkalmazásával történik.
Áramlási citometria alkalmazásai
Az áramlási citometriát számos tudományterület használja, és gyakran több paramétert elemeznek különböző sejtpopulációkban. A gyakori molekuláris biológiai alkalmazások közé tartozik a rekombinánsan expresszált fluoreszcens fehérjék elemzése, amelyeket különböző sejttípusokban indukáltak expresszióra a génfunkció tisztázása vagy a sejtek in vivo nyomon követése céljából. Míg a DNS festése lehetővé teszi a sejtciklus elemzését, addig az antitestek használata az elemzések széles körét teszi lehetővé, beleértve a jelátvitelt, az RNS- és fehérjeexpressziót. Az immunfenotipizálás azonban az áramlási citometria egyik leggyakrabban használt alkalmazása. Az immunfenotipizálás során fluorokróm-konjugált antitestek több sejtfelszíni antigént céloznak meg, hogy a sejtpopuláción belül specifikus immunsejteket azonosítsanak.
Áramlási citometriás adatelemzés
Az áramlási citometriás adatelemzés gyakran magában foglalja a sejtek egy adott régiójának vagy klaszterének azonosítását és további paraméterek alkalmazását a kísérletben, beleértve annak vizsgálatát, hogy további sejtazonosító faktorok jelen vannak-e, hogy további betekintést nyerjünk a sejtek identitásába. Számos számítógépes szoftverprogram áll rendelkezésre, amelyeket általában az ilyen típusú adatelemzés és egyéb sejtciklus-elemzések megkönnyítésére használnak.
Áramlási citometria műszerelés
Az áramlási citométerekben használt elsődleges összetevők összefoglalása az elektronikát, az optikát és a fluidikát foglalja magában. A fluidika folyadékszállító rendszerként szolgál, amely a mintát az optikai komponensekhez irányítja, amelyek a gerjesztő optikából (lézer) és a gyűjtőoptikából állnak, amelyek fotodiódákból és fotomultiplier csövekből (PMT-k) állnak. Fontos, hogy az elektronikai alkatrészek a detektoroktól származó információkat digitális jelekké alakítják, amelyeket a számítógépek értelmeznek. A további rendszerek kombinációi elősegítik a fejlettebb mintaelemzéseket, beleértve a sejtválogatók használatát a minták tisztítására és gyűjtésére, valamint a képalkotó citométereket, amelyek az áramlási citometriát és a fluoreszcens mikroszkópiát is kombinálják.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?