Immunhisztokémia
Immunhisztokémiai (IHC) és immunfluoreszcens (IF) kimutatási módszerek
Az immunhisztokémia (IHC) egy olyan biokémiai módszer, amely olyan antitesteket használ, amelyek a szövet egy részén található specifikus antigénekhez kötődnek. Hasonlóképpen, az immuncitokémia (ICC) alkalmas az egyes sejtrétegekben lévő antigének azonosítására. Az IHC-t általában az egészséges és beteg szövetekben, például rákos daganatokban található fehérjék, szénhidrátok és lipidek láthatóvá tételére használják. A specifikus molekuláris markerek olyan sejtes eseményekre jellemzőek, mint a proliferáció vagy a sejthalál (apoptózis). Az IHC-t az alapkutatásban is széles körben használják a biomarkerek és a különbözőképpen kifejeződő fehérjék eloszlásának és lokalizációjának megértésére a biológiai szövetek különböző részeiben.
Kiemelt kategóriák
Tapasztalja meg a ZooMAb® rekombináns antitesteket, amelyeket kivételes konzisztenciára és teljesítményre terveztek a különböző alkalmazásokban
.
A Milli-Q® rendszerek innovatív víztisztítási technológiákat kínálnak, amelyeket a laboratóriumi kutatási igények, fenntarthatósági célok és egyéb fontos követelmények támogatására terveztek.
IHC-szövet-előkészítés, antigénnyerés és előkezelés
A szöveteket tipikusan rögzítik, paraffinba ágyazzák, és az IHC-elemzéshez mikrotom segítségével metszik. A kezdeti szövetelőkészítést követő jelentős lépés az antigén visszanyerése. Erre azért van szükség, hogy a fixálás során kialakult fehérje keresztkötéseket fel lehessen bontani, és a rejtett antigénhelyeket fel lehessen fedni. Az antigén visszanyerési és előkezelési feltételeket empirikusan kell meghatározni, mivel az antigén epitóp hozzáférhetősége számos biológiai tényezőtől függően jelentősen változhat. Például egyes antigének agresszívebb előkezelést igényelhetnek az antitestkötő epitópjaik "leleplezéséhez", míg egyes antigének esetében egyáltalán nem szükséges az előkezelés. Két gyakori antigén-visszanyerési előkezelési módszer a hőindukált epitóp-visszanyerés (HIER), ahol hőforrást használnak pufferekkel és enzimekkel (proteináz K) együtt. A második módszer, a proteolitikus indukált epitóp visszanyerés (PIER) egy másik antigén-visszanyerési módszer, ahol különböző proteázok használhatók, például proteináz k, tripszin, kimotripszin vagy pepszin.
IHC-festés és detektálás
A szövetek előkészítését és az antigén-visszanyerés előkezelését követően az antitest-antigén kölcsönhatás vizualizálása többféle módon is megvalósítható. Az egyik gyakori módszer olyan primer antitestet használ, amelyet egy enzimhez, például torma-peroxidázhoz vagy alkalikus foszfatázhoz konjugáltak, amely egy színképző reakciót katalizál. Az immunfluoreszcencia (IF) módszer alternatívaként fluorofórral, például fluoreszceinnel, rodaminnal vagy Alexa Fluorral jelölt ellenanyagot használ. Egy másik lehetőség egy nem jelölt primer antitest használata, indirekt antigén kimutatással egy jelölt másodlagos antitest vagy összetettebb kimutatási rendszerek segítségével. Ebben az esetben minden egyes vizsgálathoz meg kell határozni mind az elsődleges, mind a másodlagos ellenanyag optimális titerét.
Látogasson el dokumentumkeresőnkbe adatlapok, tanúsítványok és műszaki dokumentációk kereséséhez.
Kapcsolódó cikkek
- NBT-BCIP substrate system aids in western blotting and immunohistological staining, producing a blue-purple insoluble end product.
- Using antibodies in the lab from selection, antibody concentration and antibody storage
- ZooMAb® Antibodies Frequently Asked Questions
- Sigma® Antibody Bioguarantee – Complete peace of mind with your antibody purchase. Exemplary scientific support and a full credit or replacment product if you ar not complete satisfied
- Az alkalikus foszfatáz enzimek és szubsztrátok széles választékát kínáljuk, amelyeket az Ön speciális alkalmazási igényeihez optimalizáltunk antitestekhez és más fehérjékhez való konjugációra.
- Mindent látni (25)
Kapcsolódó protokollok
- Használja ezt a protokollt a teljes immunhisztokémiai (IHC) eljáráshoz a paraffinba ágyazott szöveti metszetek specifikus antigének festésén és vizualizálásán keresztül.
- In the midst of beeping lab timers, presentations and grant deadlines, it is easy to take for granted the quality of lab reagents.
- Subcellular protein location often correlates with function; nucleus proteins implicated in gene regulation, mitochondria proteins in energy production.
- Prestige Antigens™ and the corresponding Prestige Polyclonals or Monoclonals are recommended to use according to the standard Prestige Antigen-blocking protocol
- Prestige Antibody Immunohistochemistry Procedure protocol using standardized tissue microarray slides for antibody validation.
- Mindent látni (9)
További cikkek és protokollok keresése
Hogyan tudunk segíteni
Kérdés esetén kérjük, küldjön ügyféltámogatási kérelmet
vagy beszéljen ügyfélszolgálatunkkal:
Emailt küldjön custserv@sial.com
vagy hívja a +1 (800) 244-1173-as telefonszámot
További támogatás
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Számológépek és alkalmazások
Web Toolbox - tudományos kutatási eszközök és források az analitikai kémia, az élettudomány, a kémiai szintézis és az anyagtudomány számára.
- Customer Support Request
Ügyfélszolgálat, beleértve a megrendelésekkel, termékekkel, számlákkal és a weboldal technikai kérdéseivel kapcsolatos segítséget.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?