Ugrás a tartalomra
Merck

Mikrobiális sejtkultúra

Bakteriális sejttenyészet agar lemezeken

A mikrobiális sejtkultúrákat a molekuláris biológiában klónozásra és rekombináns fehérjék expressziójára használják. Klinikai alkalmazásokban is használják őket a betegséget okozó mikrobák izolálására, kimutatására és azonosítására. A mikrobiológiai tenyésztés lehetővé teszi a sejtek növekedését és osztódását ellenőrzött laboratóriumi körülmények között. A baktériumok és más mikrobák folyékony táptalajon vagy szilárd tápanyag-agar táptalajon termeszthetők aszeptikus technikák alkalmazásával a szennyeződés megelőzése érdekében.  

Klónozás és rekombináns fehérjeexpresszió

A baktériumtenyészeteket rekombináns fehérjeexpresszióra, plazmidklónozásra és -amplifikációra, valamint bakteriális mesterséges kromoszóma (BAC) és kozmid klónozásra használják. A baktériumsejtek transzformációval megváltoztathatók, hogy exogén géneket és plazmidokat vegyenek fel és építsenek be. A kompetens sejtek transzformációja általában elektroporációval vagy kémiailag kezelt kompetens sejtek hősokkolásával történik.  

A transzformált baktériumokat ezután a rekombináns plazmid DNS által közvetített szerzett antibiotikum-rezisztencia alapján vagy a β-galaktozidázt markerként expresszáló rekombináns baktériumok azonosítására szolgáló "kék-fehér" szűréssel azonosítják és szelektálják. Élesztő is transzformálható elektroporációval és más módszerekkel élesztő-kéthibrid és riportergén vizsgálatokhoz a fehérjeexpresszió és a fehérje kölcsönhatások tanulmányozására.

Kultiválás mikrobák izolálásához és azonosításához

A mikrobakultúrák orvosi szempontból fontosak a fertőző betegségeket okozó baktériumok és más mikrobák izolálása, kimutatása és megkülönböztetése szempontjából. A tenyésztési módszerekkel történő jellemzés és azonosítás a mikrobák fenotípusára és genotípusára egyaránt támaszkodik. A sejteket csíkos lemez beoltásával lehet izolálni, hogy tiszta kolóniákat hozzanak létre. Szelektív táptalajok segítségével gátolják a mikrobák bizonyos csoportjainak növekedését, lehetővé téve mások növekedését. A differenciáló táptalajok olyan vegyületeket tartalmaznak, amelyek lehetővé teszik a mikrobák vizuális megkülönböztetését a kolóniák megjelenése vagy a környező táptalajok metabolikus vagy hemolitikus aktivitásbeli különbségekből eredő változásai alapján. Ezek a táptalajok a megkülönböztetés és az elimináció révén segítik a baktériumok és más mikrobák azonosítását.


Kapcsolódó műszaki cikkek

  • Bevezetés a mikrobiális közegek típusaiba, felhasználásukba és alkalmazásukba. Tartalmazza a készítményeket és a termékválasztási útmutatót.
  • Antifoams are supplied as two basic types of composition or mixtures of the two. Organic antifoams are of synthetic origin. Silicone-based antifoams are generally considered to be siloxane polymers and are also synthetic.
  • Streptococci- Overview of Detection, Identification, Differentiation and Cultivation Techniques
  • Sejtvonalak vakcina előállításához és a SARS CoV-2 és más vírusok tenyésztéséhez. Primer, humán diploid és folyamatos tenyésztésű sejtvonalak vírusok és vírusalapú vakcinák szaporítására.
  • Yeast is one of the most important microorganisms known and utilised by mankind. Ancient Middle Eastern civilisations used the organism to bake bread and to produce mead, beer and wine.
  • Mindent látni (20)

Kapcsolódó protokollok

További cikkek és protokollok keresése




A folytatáshoz jelentkezzen be

Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.

Még nem rendelkezik fiókkal?