Mikrobiális sejtkultúra
A mikrobiális sejtkultúrákat a molekuláris biológiában klónozásra és rekombináns fehérjék expressziójára használják. Klinikai alkalmazásokban is használják őket a betegséget okozó mikrobák izolálására, kimutatására és azonosítására. A mikrobiológiai tenyésztés lehetővé teszi a sejtek növekedését és osztódását ellenőrzött laboratóriumi körülmények között. A baktériumok és más mikrobák folyékony táptalajon vagy szilárd tápanyag-agar táptalajon termeszthetők aszeptikus technikák alkalmazásával a szennyeződés megelőzése érdekében.
Klónozás és rekombináns fehérjeexpresszió
A baktériumtenyészeteket rekombináns fehérjeexpresszióra, plazmidklónozásra és -amplifikációra, valamint bakteriális mesterséges kromoszóma (BAC) és kozmid klónozásra használják. A baktériumsejtek transzformációval megváltoztathatók, hogy exogén géneket és plazmidokat vegyenek fel és építsenek be. A kompetens sejtek transzformációja általában elektroporációval vagy kémiailag kezelt kompetens sejtek hősokkolásával történik.
A transzformált baktériumokat ezután a rekombináns plazmid DNS által közvetített szerzett antibiotikum-rezisztencia alapján vagy a β-galaktozidázt markerként expresszáló rekombináns baktériumok azonosítására szolgáló "kék-fehér" szűréssel azonosítják és szelektálják. Élesztő is transzformálható elektroporációval és más módszerekkel élesztő-kéthibrid és riportergén vizsgálatokhoz a fehérjeexpresszió és a fehérje kölcsönhatások tanulmányozására.
Kultiválás mikrobák izolálásához és azonosításához
A mikrobakultúrák orvosi szempontból fontosak a fertőző betegségeket okozó baktériumok és más mikrobák izolálása, kimutatása és megkülönböztetése szempontjából. A tenyésztési módszerekkel történő jellemzés és azonosítás a mikrobák fenotípusára és genotípusára egyaránt támaszkodik. A sejteket csíkos lemez beoltásával lehet izolálni, hogy tiszta kolóniákat hozzanak létre. Szelektív táptalajok segítségével gátolják a mikrobák bizonyos csoportjainak növekedését, lehetővé téve mások növekedését. A differenciáló táptalajok olyan vegyületeket tartalmaznak, amelyek lehetővé teszik a mikrobák vizuális megkülönböztetését a kolóniák megjelenése vagy a környező táptalajok metabolikus vagy hemolitikus aktivitásbeli különbségekből eredő változásai alapján. Ezek a táptalajok a megkülönböztetés és az elimináció révén segítik a baktériumok és más mikrobák azonosítását.
Kapcsolódó műszaki cikkek
- Bevezetés a mikrobiális közegek típusaiba, felhasználásukba és alkalmazásukba. Tartalmazza a készítményeket és a termékválasztási útmutatót.
- Antifoams are supplied as two basic types of composition or mixtures of the two. Organic antifoams are of synthetic origin. Silicone-based antifoams are generally considered to be siloxane polymers and are also synthetic.
- Streptococci- Overview of Detection, Identification, Differentiation and Cultivation Techniques
- Sejtvonalak vakcina előállításához és a SARS CoV-2 és más vírusok tenyésztéséhez. Primer, humán diploid és folyamatos tenyésztésű sejtvonalak vírusok és vírusalapú vakcinák szaporítására.
- Yeast is one of the most important microorganisms known and utilised by mankind. Ancient Middle Eastern civilisations used the organism to bake bread and to produce mead, beer and wine.
- Mindent látni (20)
Kapcsolódó protokollok
- Technikai cikk a kompetens sejtekről. A transzformáció olyan folyamat, amelynek során egyes baktériumok idegen genetikai anyagot (csupasz DNS-t) vesznek fel a környezetből.
- Initiating a Starter Culture
- General protocols for growth of competent cells in microbial medium.
- The selection of plasmids in yeast is based on the use of auxotrophic mutant strains, which cannot grow without a specific medium component (an amino acid, purine, or pyrimidine)
- Listeria is a public health concern, affecting elderly, pregnant, newborns, and immunocompromised individuals.
- Mindent látni (8)
További cikkek és protokollok keresése
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?