Molekuláris klónozás és fehérjeexpresszió
A molekuláris klónozás célja, hogy az érdekes gént beillesszük egy plazmidvektorba, egy olyan kör alakú DNS-darabba, amely különböző elemeket tartalmaz a klónozás, a klónszelekció és a fehérjeexpresszió megkönnyítése érdekében. A kutatók gyakran használnak DNS-restrikciós enzimeket és ligázt a GOI in-frame beillesztéséhez az expressziós vektorba a későbbi fehérjeexpresszió érdekében. Ezt a vektort ezután beillesztik egy olyan sejtbe, amely kifejezi a GOI által kódolt fehérjét, vagy a fehérje expresszióját sejtmentes fehérjeszintézis rendszerek segítségével valósítják meg.
Amikor a fehérje kifejeződött, a fehérje funkciója tanulmányozható, mivel befolyásolja a sejt jelátvitelt, a morfológiát vagy más szempontokat a sejten belül. Alternatívaként a fehérje nagy mennyiségben kifejezhető, tisztítható és felhasználható számos downstream alkalmazásban. További információkért fedezze fel megbízható reagensek és erőforrások átfogó kínálatát, amelyek a klónozás és a bélyegző; expressziós munkafolyamatok rovar, baktérium és emlős fehérje-expressziós rendszerekhez állnak rendelkezésre.
Bővebben
- Resztrikciós enzimek és DNS-módosító enzimek
- Cell-Free Expression Systems and Expression Vectors using CMV Promoters and FLAG® Tag Technology<./li>
- Novagen® pET rendszer, SnapFast™ vektorok, Simplicon™ vektorok és UCOE™ vektorok. Protein Expression Systems
- Bakteriális és élesztő transzformációs reagensek és források
Kapcsolódó termékforrások
- Article: Cell-Free Protein Synthesis or Expression
Cell-free protein synthesis rapidly produces recombinant proteins without cells, utilizing translation machinery from different cell types for efficiency.
- Article: Competent Cell Selection & E. coli Markers Guide
Select competent cells by application, transformation efficiency, and genotype. We also present a list of E. coli markers for reference.
- Article: Simplicon™ in vivo Protein Expression System
Simplicon: A non-genome integrating, tunable and sustained protein expression system in human cells, based on a single, polycistronic, and self-replicating synthetic RNA.
- Brochure: Genomics
Streamline your molecular biology workflow.
Resztrikciós enzimek és DNS-módosító enzimek
A molekuláris klónozás során a kutatók gyakran két általános enzimtípust használnak: restrikciós enzimeket a DNS elvágására, és módosító enzimeket a nukleinsav-módosításra, gyakran a ligációs lépés előtt. Fedezze fel a restrikciós enzimek és más módosító enzimek, például az alkalikus foszfatáz, a proteáz, a T7 RNS-polimeráz, a Ribonukleáz A és a T4 DNS-ligáz széles választékát minden kutatási igényéhez.
Cellamentes expressziós rendszerek és expressziós vektorok CMV promóterek és FLAG® tag technológia használatával
.Klónozási és expressziós portfóliónk olcsóbbá és hatékonyabbá teszi a géntechnológiát azáltal, hogy sokoldalú vektorok gyűjteményét kínálja egyszerűsített protokollokkal és klónozási készletekkel. Válasszon a klónozó és expressziós rendszerek széles választékából, beleértve a Cellmentes fehérjeszintézis vagy expressziós rendszer, mint például a Next Generation Cell-Free Protein Expression Kit (Wheat Germ) (termékszám CFPS700) és az ALiCE® kit (Cat. No. AL0103000). Fedezze fel továbbá a bakteriális és emlős FLAG® expressziós vektorokat a periplazmatikus vagy citoplazmatikus expresszióhoz tranziens vagy stabil transzfekciós rendszerekben, és magabiztosan fejezze ki FLAG<® vagy 3X FLAG® szekvenciát az N- vagy C-terminálison, szükség esetén enterokináz (Ek) hasítóhellyel a fúziós tag eltávolításához.
Novagen® pET rendszer, SnapFast™ Vektorok, Simplicon™ vektorok, és az UCOE™ fehérjeexpressziós rendszerek
Minden E. coli expressziós vektorok és rovar expressziós vektorok ampicillinrezisztenciát biztosítanak a pozitív transzformánsok könnyű szelekciója érdekében. Fedezze fel a Novagen® pET rendszert, a rekombináns fehérjék bakteriális expresszióban történő klónozásának és expressziójának arany standardját. Az Oxford Genetics által kifejlesztett SnapFast™ vektorcsalád gyors és egyszerű protokollt kínál, amely lehetővé teszi egy GOI átvitelét egyik vektorból a másikba a SnapFast™ vágási helyek segítségével, rovar, élesztő, baktérium & emlős expressziós rendszerekkel kompatibilis vektorokat létrehozva. A Ubiquitous Chromatin Opening Element (UCOE™) expressziós vektor technológiánkkal kevesebb mint 30 nap alatt grammnyi fehérjét érhet el stabilan transzfektált emlőssejtekben. Az UCOE™ expressziós technológia megakadályozza a transzgének elnémulását, és a kromoszómális integrációs helytől függetlenül konzisztens, stabil és magas szintű, a hagyományos vektorokhoz képest akár 20-szor magasabb szintű génexpressziót biztosít. A Simplicon™ In Vivo fehérje-expressziós rendszer egy nem genomintegráló, hangolható és szintetikus, önreprodukáló RNS-alapú expressziós rendszer, amely több gén azonnali, magas fenntartású fehérje-expresszióját hozza létre transzfektált emberi sejtekben a genomintegráció kockázata nélkül. További információkért tekintse meg A hatékony humán iPSC-k előállítására használt Simplicon™ technológia videónkat.
Bakteriális és élesztő transzformációs reagensek és források
A bakteriális transzformáció az idegen DNS baktériumokba történő bejuttatásának folyamata olyan módszerek segítségével, mint a hősokk és az elektroporáció. Kompetens sejtekből álló portfóliónkat a legnehezebb rekombináns fehérjék optimális kifejeződésére terveztük. Böngésszen Kompetens sejtek kiválasztási útmutatója című oldalunkon, és válasszon a legkülönbözőbb alkalmazásokhoz, többek között fehérjeexpresszióhoz, rutinszerű vagy nehéz klónozáshoz és könyvtárak létrehozásához szükséges új bakteriális kompetens sejtek közül. Emellett a Saccharomyces cerevisiae-ben történő rekombináns fehérjeexpresszió számos előnnyel jár, mint például az egyszerű protokollok, az alapvető reagensek használata és a méretezhetőség. Fedezze fel az élesztő transzformációhoz rendelkezésre álló számos terméket a fehérjeexpressziós munkafolyamat részeként. A NovaBlue® kompetens sejtjeink, amelyeket a transzfekciós hatékonyságra és a plazmidok megőrzésére optimalizáltunk, támogatják a kiváló könyvtárkészítést és a plazmidok stabilitását. Emellett a Novagen® kompetens sejteket úgy tervezték, hogy elősegítsék a fehérjék megfelelő hajtogatását, a megnövelt oldhatóságot vagy a citotoxikus fehérjék expresszióját. A legnépszerűbb márkák a Rosetta™, Origami™ és Overnight Express™ rendszerek.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?