A mixture of at least three proteolytic activities including an extracellular serine protease. In general, serine proteases display a wide range of substrate specificities, which are believed to be mediated by an active site composed of one Asp, one His, and a Ser residue in the molecule. This enzyme prefers to hydrolyze peptide bonds on the carboxyl side of glutamic or aspartic acid.
Spezifität
Eine Mischung aus mindestens drei proteolytischen Aktivitäten, einschließlich einer extrazellulären Serinprotease. Im Allgemeinen weisen Serinproteasen eine Vielzahl von Substratspezifitäten auf. Man nimmt an, dass diese durch ein aktives Zentrum vermittelt werden, das aus einem Asp-, einem His- und einem Ser-Rest im Molekül besteht. Dieses Enzym hydrolysiert bevorzugt Peptidbindungen auf der Carboxylseite von Glutamin- oder Asparaginsäure.
Anwendung
Dieses Enzym ist in einem höheren pH-Wert-Bereich aktiver als die bekannte alkalische Protease und zeigt sogar in 0,2 N NaOH-Lösung proteolytische Aktivität. Dieses Enzym ist für die Proteolyse von unlöslichen Proteinen und für die Strukturanalyse von Proteinen geeignet.
Protease wird typischerweise in Verfahren zur Nukleinsäureisolierung mit einer Inkubationszeit von 0,5–3,0 Stunden unter Zusatz von 0,2%igem Natriumdodecylsulfat und 10 mM EDTA eingesetzt.
Suitable for:
Nucleic acid isolation procedures in incubations
Degrade protein during nucleic acid purification
Proteolysis of insoluble protein
Structural protein studies
Physikalische Eigenschaften
Vollständig inaktiviert durch Erwärmen bei 80 °C für 15–20 Minuten.
Einheitendefinition
One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).
Angaben zur Herstellung
Aus dem Flüssigmedium einer Kultur von S. griseus isoliert.
Hinweis zur Analyse
The protease is incubated for 10 minutes at pH 7.5 at 37°C in a 6 ml reaction volume containing 0.54% casein and 0.041 M potassium phosphate buffer. The reaction is stopped by the addition of 5.0 ml of 0.11 M trichloroacetic acid.
Sonstige Hinweise
This protease is completely inactivated by heating above 80°C for 15-20 minutes. This enzyme is more active at a higher pH range, showing the proteolytic activity even in 0.2N NaOH solution.
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