Two references cite pH 7.5 as optimal for this enzyme: (a) Ricks et al., Biotechnol. Prog., 8, 197-203 (1992), (b) Doswald et al., Bioorg. Med. Chem., 2, 403-410 (1994).
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P8038
Proteinase, bakteriell
Type XXIV, 7.0-14.0 units/mg solid, lyophilized powder
Synonym(e):
Proteinase aus Bacillus licheniformis, Alkalische Protease, Protease aus Bacillus licheniformis, Subtilopeptidase A
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Über diesen Artikel
CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
EC Number:
232-752-2
NACRES:
NA.54
MDL number:
Specific activity:
≤0.05 Kunitz units/mg solid RNase, ≤5.0 Kunitz units/mg solid DNase, 7.0-14.0 units/mg solid
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Unterstützung erhaltentype
Type XXIV
Quality Segment
form
lyophilized powder
specific activity
≤0.05 Kunitz units/mg solid RNase, ≤5.0 Kunitz units/mg solid DNase, 7.0-14.0 units/mg solid
mol wt
27 kDa
purified by
crystallization
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
General description
Subtilisin ist eine nicht-glycosylierte Einzelpolypeptidkette ohne Disulfidbindungen und besitzt ein Molekulargewicht von 27 KDa.
Application
Das Enzym von Sigma wurde zur Optimierung der Freisetzung aller mitochondrialen Populationen aus homogenisiertem Ventrikelgewebe von Rattenherzen eingesetzt. [1] Es wurde außerdem bei der Vorhybridisierungsbehandlung formalinfixierter Paraffinschnitte von Leberproben zum Nachweis humaner und viraler DNA verwendet.[2]
Dieses Produkt ist ein proteolytisches Enzym, das aus der Fermentation von Bacillus licheniformis isoliert wird. Es ist eine Serin-Endoproteinase mit einer breiten Spezifität für native und denaturierte Proteine, die unter alkalischen Bedingungen aktiv ist. Produkt P8038, auch als Subtilisin Carlsberg bekannt, wurde zur Hydrolyse von Herzzellen für die Untersuchung der Stilllegung von kardialen mitochondrialen NHE1[3] eingesetzt.
Biochem/physiol Actions
Proteinase katabolisiert Proteine durch Hydrolyse von Peptidbindungen. Proteasen werden durch Serin-Aktivstelleninhibitoren wie Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) und Diisopropylfluorphosphat inaktiviert.
Subtilisin A gehört zur Familie der Serin S8-Endoproteinasen. Es weist eine breite Spezifität mit Präferenz für ein großen ungeladenen Rest an Position P1 auf. Es hydrolysiert native und denaturierte Proteine und ist unter alkalischen Bedingungen aktiv.
Analysis Note
Aminosäureanalyse und isoelektrische Fokussierungselektrophorese entsprechend Subtilisin Carlsberg.
Other Notes
Eine Einheit hydrolysiert die Caseinmenge, die eine Färbung entsprechend 1,0 μmol (181 μg) Tyrosin pro min bei pH 7,5 und 37 °C produziert (Farbe vom Folin-Ciocalteu Reagenz).
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|---|---|---|---|
| description Type XXIV, 7.0-14.0 units/mg solid, lyophilized powder | description lyophilized powder, for use in Total Dietary Fiber Assay, TDF-100A | description Type VIII, lyophilized powder, 7-15 units/mg solid | description ≥2.4 U/g |
| specific activity ≤0.05 Kunitz units/mg solid RNase, 7.0-14.0 units/mg solid, ≤5.0 Kunitz units/mg solid DNase | specific activity - | specific activity 7-15 units/mg solid | specific activity ≥2.4 U/g |
| form lyophilized powder | form lyophilized powder | form lyophilized powder | form aqueous solution |
| mol wt 27 kDa | mol wt 27 kDa | mol wt 27 kDa | mol wt - |
| storage temp. −20°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. −20°C | storage temp. 2-8°C |
| shipped in wet ice | shipped in wet ice | shipped in - | shipped in - |
| purified by crystallization | purified by - | purified by crystallization | purified by - |
signalword
Danger
Hazard Classifications
Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Lagerklasse
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 2
ppe
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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What is the pH optimum for Product P8038, Proteinase, bacterial?
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What is the molecular weight (MW) of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 answer-
The enzyme has a MW of 27.5-27.6 kDa. See DeLange & Smith, J. Biol. Chem., 243(9), 2134-2142 (1968).
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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How long can I store stock solutions of Product P8038, Proteinase, bacterial?
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Our notes indicate that a 0.1% solution (1 mg/mL) in PBS or TBS can be stored for about a week at 0-4°C. For longer term storage, we would advise freezing the stock solution in aliquots.
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What is the pI of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 answer-
One reference gives a pI of 9.4 for subtilisin Carlsberg. See: Zacharis, E. et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 96, 1201-1205 (1999).
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