PRON-RO

Pronase

from Streptomyces griseus

• Synonym(e): Unspezifische Protease
• UNSPSC Code: 12352204
• EG-Nummer: 3.4.24.4 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Biological source: Streptomyces griseus
• Concentration: 0.5-2 mg/mL

Eigenschaften

• biological source: Streptomyces griseus
• sterility: non-sterile
• form: lyophilized powder
• packaging: pkg of 1 g (10165921001), pkg of 5 g (11459643001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 0.5-2 mg/mL
• parameter: 35-40 °C optimum reaction temp.
• technique(s): DNA extraction: suitable
• color: white
• optimum pH: 7.0-8.0
• pH range: 6.0-9.0
• solubility: water: soluble 10-20 g/L
• suitability: suitable for molecular biology
• NCBI accession no.: WP_012381357.1
• UniProt accession no.: B1W0S5, P00776
• application(s): life science and biopharma
• foreign activity: Deoxyribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.), Ribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
• storage temp.: 2-8°C
• Gene Information: Streptomyces griseus ... SGR_RS27460(6214424)

Beschreibung

General description

Bei 40 °C mit Casein als Substrat, pH 7,5, entspricht ca. 1270 PU/mg oder ca. 25 PUK/mg

Application

Pronase kann für eine vollständige Hydrolyse von Proteinen in Forschungsanwendungen verwendet werden. Pronase wird für den Abbau von Proteinen bei der Isolierung von DNA und RNA verwendet, z. B. bei der Extraktion von Phagen-DNA oder Isolierung von Plasmid-DNA. Eine Selbstverdauung der Pronase vor der Verwendung ist nicht notwendig. Es wird auch in der Histochemie und in Zellkulturen für die Gewebedissoziation in Verbindung mit Collagenase und Trypsin sowie für die Produktion von Glykopeptiden aus aufgereinigten Glykoproteinen verwendet. Auch für die Dechorionation von Zebrafischembryonen wurde es verwendet.

Biochem/physiol Actions

Pronase weist eine breite Spezifität auf und spaltet fast alle Proteine in deren Aminosäuren auf; löst Carboxylsäuren und Alkohole auf.

Pronase besitzt eine weitreichende Spezifität. Daher wird sie häufig verwendet, wenn ein umfassender oder vollständiger Abbau von Proteinen erforderlich ist. Zu den Anwendungen gehören die Proteinanalyse in Zellorganellen, die Entfernung von Proteinen während der DNA- und RNA-Isolierung sowie die Produktion von Proteinhydrolysaten für die Aminosäureanalyse. Darüber hinaus übertrifft Pronase Trypsin in seiner Fähigkeit, fibroblastische Zelllinien zu dispergieren, was sowohl bei der Ablösung des Monolayers als auch bei der Erstellung von Einzelzellsuspensionen entscheidend ist.

Preparation Note

Stabilisatoren: Schützende Wirkung von Calciumionen

Die Präparation enthält 20 % Calciumacetat zur Erhaltung der Stabilität. Nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren ist sie frei von Stärke. Die Aktivität der verdünnten Lösung, die 0,01 – 0,1 M Calcium enthielt, war bei einem neutralen pH-Wert und einer Temperatur von 4 bis 8 °C über 24 Stunden stabil. Geringe Mengen Calcium schützen die Pronase auch vor einer Hitzeinaktivierung.
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2 mg/ml
Arbeitslösung: Lösungsmittel in destilliertem Wasser wird empfohlen.
Zur Herstellung der Stammlösung wird Pronasepulver in destilliertes Wasser gegeben (10 bis 20 mg/ml).
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C

Das Lyophilisat ist in Wasser löslich (10 bis 20 mg/ml).

Trocken lagern

Other Notes

Bei +40 °C und einem pH-Wert von 7,5 beschleunigt eine Einheit der unspezifischen Proteasenaktivität die Freisetzung von folin-positiven Aminosäuren und Peptiden aus Casein. Für eine Einheit (U) wird 1 μmol/min Tyrosin freigesetzt und für die Einheit „PU“ gilt ein Wert von 1 μg/Minute (1 U = 181 PU); für die Einheit „PUK“ gilt 0,1/Minute (gemessen wird die Änderung der Extinktion von Molybdänblau, welches durch die Reaktion mit dem Folin-Reagenz unter Bedingungen wie 1 PUK = 50 PU entsteht).

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash
• hcodes: H315,H319,H334,H335