Ugrás a tartalomra
Merck

Sejtszámlálás és egészségügyi elemzés

Tudós, aki egy automatizált kézi Coulter-számlálóval számolja a sejteket

A tenyészetben lévő sejteket meg kell számolni a megduplázódási idő nyomon követéséhez és a kísérletek vagy gyártási folyamatok előtti mennyiségi meghatározáshoz. A tenyésztett sejtek nemcsak a proliferáció, hanem az életképesség, a citotoxicitás és a sejtek egészségének egyéb mérőszámai tekintetében is rutinszerű megfigyelést igényelnek. A vizsgálat kiválasztása a tenyészetben lévő sejtek típusától, a vizsgálati alkalmazástól és a kívánt áteresztőképességtől függ. Kritikus fontosságú a tenyésztett sejtek számszerűsítése vagy megszámlálása a továbbtenyésztés vagy a transzfekciókban, genomikai vizsgálatokban, krioprezerválásban vagy más manipulációkban történő későbbi felhasználás előtt.     



Kiemelt kategóriák

Emlős sejtvonalak
Emlős sejtvonalak

Hitelesített, szennyeződésmentes sejtvonalakat kínálunk, sok esetben az ECACC-vel együttműködve; ezek kritikus eszközök a fehérje-, antitest-, vírus- és vakcinagyártáshoz.

Termékek boltja
Elsődleges sejtkultúrát bemutató dia
Elsődleges sejtkultúra

Fedezze fel a PromoCell® humán primer sejtek, a BioIVT primer vér- és immunsejtjei és egyéb, validált humán primer sejtek gyűjteményét.

Termékek boltja
H9 humán ES sejtek festése alkalikus foszfatázzal (AP)
Őssejtek

Az ES és iPS sejtek minősített termékei megbízható tenyésztési megoldásokat kínálnak az őssejtkutatók számára, beleértve a médiumokat és a differenciálási eszközöket.

Termékek boltja
Üveg és műanyag palack savak
Sejtszámláló berendezés

Pontos sejtszámlálás: a kézi coulter számláló pontos és gyors eredményeket biztosít. Opt  eldobható hemocitométerekhez fertőző környezetben.

Termékek boltja

Cell counting using Trypan Blue dye and a hemocytometer

Kézi sejtszámlálás

A Neubauer-rácsokkal ellátott hemocitométerhez hasonló sejtszámláló kamrák a kézi/visuális sejtszámlálás gyakori eszközei. Egy kis aliquot sejt-szuszpenziót töltünk a ráccsal ellátott, precíziósan csiszolt üveg eszköz kamrájába , ahol a sejtek kapilláris hatásra szétoszlanak a maratott rácson. A sejteket mikroszkóp alatt vizualizálják és kézi számlálóval megszámolják. A sejtkoncentráció kiszámításához a kamra előre meghatározott térfogatát és a rácsrendszert használják. Léteznek képalkotás-alapú rendszerek, amelyek automatizálják a számlálási folyamatot.

Automatizált sejtszámlálás

Néhány automatizált sejtszámláló eszköz ugyanazokat a vizuális számláló festékeket és elveket használja, mint a hemocitometriában. A tárgyfelismerésre támaszkodó automatizált sejtszámláló készülékekkel ellentétben a Coulter-elvre épülő eszközök a használhatóság és a pontosság miatt váltak népszerűvé. A Coulter-számlálók a sejtszuszpenziókat egy érzékelőn keresztül pumpálják, amely az elektromos ellenállás változása alapján érzékeli a sejteket. Ez lehetővé teszi a sejtek, még a kis sejtek megbízhatóbb felismerését és a nagy pontosságú sejtszámlálást. A hordozható, kézben tartott (pipettához hasonló) modellek lehetővé teszik a közvetlen sejtszámlálást a tenyészkamrából.

Cellaviabilitási vizsgálatok

DNS-szintézis: A sejtekben zajló aktív DNS-szintézis nyomon követése az alapja egyes sejtproliferációs vizsgálatoknak. A DNS-replikáció mérhető módosított nukleozidok, például radioaktív 3H-thimidin vagy nem radioaktív bromodeoxiuridin (BrdU) beépítésével, amelyet antitesttel detektálnak.

Metabolikus aktivitás: A metabolikus aktivitást mérő kalorimetriás vizsgálatok alkalmasak a sejtproliferáció, a sejtek életképességének és a citotoxicitás elemzésére. A tetrazoliumsók, például az MTT, XTT és WST-1 redukciója színes formazánvegyületekké csak metabolikusan aktív sejtekben történik. Az ATP jelenléte szintén a metabolikus aktivitás indikátora. A szentjánosbogár luciferáz riporter tesztben az osztódó sejtek által termelt ATP-t a D-Luciferin oxidációjára használják, amely biolumineszcens fényt ad ki leolvasásként.

Festékkizárás: A Trypan-kék festést általában az életképes sejtek számbavételére használják. Ez a módszer azon az elven alapul, hogy az élő sejtek nem veszik fel a festéket, míg az elhalt sejtek felveszik a festéket, és mikroszkóp alatt kéknek tűnnek.

Fluoreszcens sejtéletképességi vizsgálatok: Az 5(6)-Karboxifluoreszcein-diacetát N-szuccinimidil-észter (CFSE) jelölés népszerű választás a sejtpopulációban befejezett sejtosztódási ciklusok számának mérésére. Egy másik membránáteresztő festék, a Calcein-AM önmagában nem fluoreszkál, de erős zöld fluoreszcenciát bocsát ki, amint egy életképes sejtben hidrolizálódik. Ezzel szemben a nukleáris festék, a propídium-jodid (PI) csak az elhalt sejtek sérült membránján keresztül juthat el a sejtmagba. Mivel mind a Calcein, mind a PI-DNS 490 nm-es fénnyel gerjeszthető, az élő/holt sejtek egyidejű megfigyelése egy egyszeri gerjesztésű fluoreszcencia-mikroszkóppal lehetséges.

Dokumentum keresés
Konkrétabb információkat keres?

Látogasson el dokumentumkeresőnkbe adatlapok, tanúsítványok és műszaki dokumentációk kereséséhez.

Dokumentumok keresése

      A folytatáshoz jelentkezzen be

      Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.

      Még nem rendelkezik fiókkal?

      Ügyfeleink kényelme érdekében ezt az oldalt géppel fordítottuk le. Törekedtünk arra, hogy ez a fordítás pontos legyen. A gépi fordítás azonban nem tökéletes. Ha nem elégedett a gépi fordítással, kérjük, tekintse meg az angol nyelvű változatot.