Ugrás a tartalomra
Merck
KezdőlapProductsFehérje biológiaFehérje minta előkészítésFLAG® tisztítás

FLAG® tisztítás

Közelkép egy laboratóriumi környezetről. A fő hangsúly egy kék pipettán van, amely egy cseppet adagol egy kis üvegedénybe, amely részben rózsaszínű folyadékkal van töltve. A háttér, bár elmosódott, különböző más laboratóriumi eszközök vagy tartályok jelenlétét sugallja.

AFLAG® címkék lehetővé teszik a rekombináns fúziós fehérjék kiváló kimutatását és robusztus tisztítását, és bizonyítottan hasznosak számos downstream alkalmazásban a kötődési és aktivitási vizsgálatoktól a strukturális elemzésig. A FLAG® epitóp tag egy rövid, hidrofil, nyolc aminosavból álló peptid (DYKDDDDK tag), amely könnyen hasítható az enterokináz (EK) által. Kis mérete és hidrofil jellege miatt a FLAG® tag általában a fúziós fehérje felszínén helyezkedik el, minimalizálva a fúziós fehérje működésére, szekréciójára vagy transzportjára gyakorolt hatásokat. A végső alkalmazástól függetlenül rendelkezünk a FLAG® fúziós fehérjék expressziójához, tisztításához és kimutatásához szükséges eszközökkel. 

Bővebben

Sárga alapon egymáshoz kapcsolódó lila körökből és vonalakból álló mintázatot ábrázoló grafikus ábrázolás. A rajz egy egyszerűsített molekulaszerkezetre vagy egy hálózati diagramra hasonlít, az összekapcsolhatóság vagy a kapcsolatok témáját sugallva.

FLAG® tag fehérje expresszió

A FLAG® tag fehérje expressziós portfóliónk tartalmaz vektorokat rekombináns fúziós fehérjék hatékony expressziójához bakteriális és emlős rendszerekben. A SnapFast™ vektortechnológia lehetővé teszi, hogy az érdeklődésre számot tartó gént könnyen átvigyük egyik vektorból a másikba a hatékonyabb és költséghatékonyabb klónozás érdekében.

  • A standard FLAG® peptid (szekvencia: DYKDDDDK) egy kisméretű tag, amely minimális sterikus akadályozás vagy a fehérje oldhatóságára gyakorolt negatív hatás kockázata mellett építhető be
  • A 3xFLAG® tag szekvencia három tandem FLAG® epitópot egyesít a fúziós fehérjék fokozott (akár 200X) kimutatása érdekében
élénk sárga háttér, középen egy lila négyzet lekerekített sarkokkal. A négyzet belsejében egy szimmetrikus minta található három vízszintes nyíllal: egy a tetején, amely balra és jobbra mutat, egy középen, amely a középpontból mindkét oldalra mutat, és egy alul, amely a felső nyilat tükrözi. Egy függőleges vonal fut lefelé a felső és az alsó nyíl között a szimmetriapontjaikon keresztül. E nyilak körül elszórtan geometriai alakzatok vannak: körök és rombuszok vagy rombuszok.

FLAG® Tag fehérje tisztítás

FLAG® címkézett fehérjék izolálásához és tisztításához különféle agaróz-affinitás tisztító géleket, mágneses gyöngyöket, tisztító készleteket és bevont lemezeket kínálunk.

  • Agaróz affinitás gélek lehetővé teszik a fúziós címkézett fehérjék tisztítását gyöngyös agarózhoz keresztkötődött anti-FLAG® antitestek használatával, és alkalmasak kis és nagy léptékű tisztításra, ezek a gyanták alkalmasak gravitációs áramlású oszlopos tisztításra.
  • Anti-FLAG® M2 mágneses gyöngyök rekombináns fúziós címkézett fehérje tisztítására szolgálnak, mágneses állvány vagy platform segítségével a gyöngyök elválasztására és a fehérje gyors feldolgozásra történő izolálására.
  • Az Anti-FLAG® High Sensitivity M2-vel bevont 96 lyukú lemezek alkalmasak expressziós szűrésre, fehérje-fehérje kölcsönhatások vizsgálatára és ELISA vizsgálatokra.

lila vonalrajz sárga alapon, amely a "K" betű absztrakt ábrázolására hasonlít. A design egyszerű, tiszta vonalakkal és további díszítések vagy textúrák nélkül.

FLAG® Tag Detection

FLAG® és 3xFLAG™ címkék kötőhelyeket tartalmaznak a nagymértékben specifikus anti-FLAG<® monoklonális antitestek, valamint poliklonális antitestek és konjugátumok számára ELISA, blotting alkalmazások, immunfluoreszcencia, immuncitokémia, immunhisztokémia (IHC), blotting és áramlási citometria számára.

  • A M2 anti-FLAG® antitest az N-terminális FLAGhoz kötődik.sup>®, C-terminális FLAG® és Met-FLAG® fúziós fehérjéket.
  • A M1 anti-FLAG® antitest kötődése kalciumfüggő és specifikus a FLAG® tag N-terminusára.
  • A M5 anti-FLAG® antitest N-terminális FLAG® és Met-FLAG® fúziós fehérjékhez kötődik.
*IP=immunoprecipitáció; IC=immunokémia, WB=western blot, EIA=enzimhez kötött immunszorbent assay (ELISA).

Kapcsolódó források

  • Brochure: Refine Protein Preparation

    Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.

  • User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins

    The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.

  • Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

    The strength and specificity of interactions between biomolecules have been exploited for years in biochemical research. Affinity-based protein purification techniques have been used extensively to isolate and purify specific proteins or classes of proteins from complex biochemical mixtures, such as cell lysates..

Kapcsolódó termékkategóriák
Antitest fehérje tisztítása
Antitest-tisztító gyanták és előrecsomagolt oszlopok laboratóriumi, technológiai és ipari méretű munkafolyamatokhoz.
Rekombináns/Fusion Tag fehérje tisztítása
Optimalizálja a fehérjetisztítást affinitásgyanták és pufferek széles választékával többféle címkéhez és tisztítási technikához.
Fehérjeelektroforézis gélek és pufferek
Előregyártott poliakrilamid fehérje gélek, futópufferek és kézi öntő reagensek a PAGE és SDS-PAGE fehérje gélelektroforézishez használt poliakrilamid gélek kézi öntéséhez.
Fehérjeelektroforézis gélfestékek
Nagy érzékenységű kolorimetrikus és fluoreszcens fehérje gélfestékek, fixáló oldatok és festéktelenítő reagensek poliakrilamid gélekhez, agaróz gélekhez, valamint PVDF és nitrocellulóz membránokhoz.
Biotinilált fehérje tisztítása
Streptavidin és avidin gyanták és előrecsomagolt oszlopok a biotinilált fehérjék és antitestek kis- és nagyléptékű tisztításához.
Szubcelluláris frakcionálás, dúsítás és kiürítés reagensek
A szubcelluláris frakcionálás és a fehérjék dúsítása lehetővé teszi a fehérjék azonosítását és vizsgálatát a proteomikai kutatásokban. A sejtekből, szövetekből, baktériumokból, növényekből és egyéb mintatípusokból származó minták feldolgozásához szükséges készletek széles választéka áll rendelkezésre a szubcelluláris frakcionáláshoz, fehérjeextrakcióhoz, -depletióhoz és -dúsításhoz.
Sejtlízis pufferek és fehérje extrakciós reagensek
Fehérjeextrakciós készletek, sejtlízis pufferek és reagensek fehérjék szolubilizálására baktérium-, élesztő- és rovarkultúrákból, valamint növényi és emlős sejtkultúrákból és szövetmintákból.
Foszfatáz és proteáz inhibitorok
Az inhibitorok és koktélok megőrzik a fehérjeaktivitást a sejtlízis és a minta előkészítése során, megakadályozva a proteolízist és a defoszforilációt.
Kapcsolódó alkalmazások
Fehérjetisztítás
Fehérjetisztítási technikák, reagensek és protokollok rekombináns fehérjék tisztítására, többek között ioncserés, méret-kizárásos és fehérje-affinitás kromatográfiás módszerekkel.
Fehérje expresszió
Fehérje-expressziós technológiák különböző expressziós rendszerekhez, amelyek támogatják a kutatást, a terápiás szereket és a vakcinagyártást.
Lízis és fehérje extrakció
A sejtlízis és a fehérjeextrakciós módszerek áttekintése, beleértve a detergens szolubilizációt, a fagyasztás-felengedéses lízist, az ozmotikus sokkot, a szonikációt, az enzimatikus sejtlízist és a mechanikus bontási technikákat, mint például a Dounce, a Polytron és a mozsárral és pisztollyal történő homogenizálás.
Fehérje Pull-Down technikák
Vizsgálja az in vitro fehérje-fehérje kölcsönhatásokat pull-down vizsgálatokkal, az affinitás, GST pull-down, TAP és koimmunoprecipitációs módszerek alkalmazásával.
Fehérjekoncentráció és puffercsere
A fehérjeminták koncentrálására és tisztítására használt technikák áttekintése a tisztítási, biofeldolgozási és elemzési munkafolyamatokhoz. Tartalmazza a szűrési és ultraszűrési technikák, a fehérjedúsítás, valamint a dialízis, diafiltráció és kromatográfiás módszerek segítségével történő sótalanítás és puffercsere protokolljait és videóit.
Gélelektroforézis
A fehérje gélelektroforézist fehérjék elválasztására használják tisztítás, jellemzés és kimutatás céljából. Az olyan módszereket, mint a natív PAGE, az SDS-PAGE, a 2D PAGE és az izoelektromos fókuszálás (IEF), a későbbi alkalmazások, például a Western blotting, a tömegspektrometria és a proteomikai elemzés előkészítésére használják.
Western Blotting
A fehérjék kimutatására szolgáló Western blotting elveinek és alkalmazásainak áttekintése. Részletes protokollok, videók és egyéb források linkjeit tartalmazza a fehérjeextrakció, a gélelektroforézis, a PVDF- vagy nitrocellulózmembránra történő átvitel, valamint a kemilumineszcens, kolorimetrikus és fluoreszcens kimutatási módszerekhez.
A folytatáshoz jelentkezzen be

Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.

Még nem rendelkezik fiókkal?