Fehérjeelektroforézis gélfestékek
Az elektroforézissel történő elválasztás után a fehérje sávokat általában gélfestékkel teszik láthatóvá. A fehérje gélfestékek vagy festékkötő, vagy színt előállító kémiai reakciót alkalmazva szelektíven reagálnak a fehérjékkel, és festett gélt eredményeznek. A fehérje gélfestékeket általában a kiindulási mintaméret, a kívánt kimutatási módszer és a későbbi elemzés kompatibilitási követelményei alapján választják ki.
Bővebben
Kapcsolódó termékforrások
- Protein Staining Reagents Selection Guide
Sigma offers EZBlue™ and ProteoSilver™ reagents for protein visualization, suitable for proteomics and traditional PAGE formats.
- Handbook: Protein Blotting Tips and Tricks
This handbook represents the collective experience of our application scientists, who are actively engaged in advancing the science of protein blotting and detection. It also includes many of the most common recommendations provided by our technical service specialists who are contacted by scientists worldwide for assistance.
- Brochure: Rethink Western Blotting
Explore our products designed to improve each step of the Western blotting workflow.
Fixáló oldatok
A gélelektroforézis után a fehérjéket általában "rögzítik" a gélben, hogy a festés előtt megakadályozzák a fehérjék szétszóródását. Bizonyos gélfestékek olyan vegyszereket tartalmaznak, amelyek kiküszöbölik a festés előtti gélrögzítés szükségességét.
Colorimetric Protein Gel Stains
- A comassie briliáns kéket a fehérjék poliakrilamid géleken történő festésére használják a fehérjék amino- és karboxilcsoportjaival való elektrosztatikus kölcsönhatások révén.
- A ReadyBlue™ Protein Gel Stain egy gyors és érzékeny kolloidális Coomassie festék poliakrilamid gélekhez, amelyet használatra kész oldatként biztosítanak, lehetővé téve a gyorsabb és egyszerűsített protokollt. A ReadyBlue™ kolorimetriás vagy IR fluoreszcencia módszerekkel képezhető le. Ez a biztonságos készítmény nem tartalmaz szerves oldószereket vagy foszforsavat, és akár 3-szor is újra felhasználható. A ReadyBlue™ érzékenységét sávonként akár 2 ng-ig is kimutatták.
- AzEZBlue™ gélfestő reagens egy kényelmes, érzékeny és biztonságos Coomassie Brilliant Blue G-250 kolloid fehérjefesték, amely javítja a fehérjeelektroforézis eredményeit, miközben jelentősen csökkenti a festési időt. Kolloid festékként csak a fehérjékkel reagál, magával a géllel nem. A háttérfestés csökken, így a fehérje sávok szinte azonnal láthatóvá válnak a poliakrilamid géleken és PVDF membránokon. Nincs szükség festéktelenítési lépésre, bár egy vizes mosás felerősítheti a sávokat és tisztíthatja a hátteret. Az EKBlue™ reagens rendkívül érzékeny, már 5 ng fehérje kimutatására is alkalmas.
- A Reversible Protein Detection Kit egy egyedülálló kimutatási rendszer, amelyet a fehérjék nejlon-, nitrocellulóz- és PVDF-membránokon vagy PAGE-géleken történő festésére terveztek, a Coomassie-festékekhez hasonló kimutatási érzékenységgel. A legtöbb más festék a membránnal való erős töltéskölcsönhatás miatt magas hátteret eredményez nylonmembránokon. A festés könnyen visszafordítható EDTA-oldattal, így a folt újra felhasználható Western blottinghoz vagy aminosav szekvenciaelemzéshez.
- A naftol kék fekete festék használható fehérjék festésére poliakrilamid géleken, agaróz géleken és nitrocellulóz membránokon. Az elektroforézis után a fehérjék gélben történő rögzítése ajánlott. Ezután a gélt legalább 2 órán keresztül 0,1%-os naftol kékfekete festékkel festjük 7%-os (v/v) ecetsavban, majd 7%-os (v/v) ecetsav szolúcióval festjük. A kimutatási érzékenység körülbelül 20%-a a Coomassie Blue érzékenységének
- A ProteoSilver™ Silver Stain Kit a legmagasabb érzékenységet biztosítja, ≥0,1 ng fehérje érzékenységgel sávonként, 3-12 perces inkubációs idővel. Ez a festék nagyon alacsony fehérjetartalmú fehérjékhez ajánlott, és kompatibilis a MALDI-TOF alkalmazásokkal.
Fluoreszcens fehérje gélfestékek
- EZFluor™. 1 lépéses fluoreszcens fehérje gélfesték egy használatra kész fluoreszcens fehérje gélfesték, amely mindössze egyetlen 5-30 perces festési lépést igényel fixálás nélkül, és már kb. 1-10 ng fehérjét képes sávonként kimutatni. A festés teljes mértékben kompatibilis a tömegspektrometriával és az Edman-alapú szekvenálással.
- AzEZFluor™ UV 1-step Fluorescent Protein Gel Stain egy használatra kész fehérje gélfesték, amelyet UV transzilluminátor és etídium-bromid szűrővel történő, tömegspektrometriával kompatibilis képalkotásra terveztek.
- A SYPRO® Ruby fehérje gélfesték egy használatra kész, ultraérzékeny, fluoreszcens festék a poliakrilamid gélelektroforézissel (PAGE) elválasztott fehérjék kimutatására. Ez a folt, amelyet kifejezetten 2D PAGE-hez terveztek, kiváló választásnak bizonyult az 1-D PAGE és az izoelektromos fókuszálás (IEF) gélekhez is. A SYPRO® Ruby fehérje gélfesték számos ezüstfestési technikához hasonló érzékenységet ér el.
- A SYPRO® Orange hasonló a SYPRO® Redhez, bár valamivel fényesebb és valamivel nagyobb háttér-fluoreszcenciát ad. A festék UV- vagy széles sávú megvilágítással hatékonyan gerjeszthető. Nem alkalmas fehérjék festésére blotokon vagy IEF-géleken, és csökkent érzékenységet mutat 2-D géleken lévő fehérjék festésekor.
Festéktelenítő-reagensek
- A CooZap a Coomasie kék festék gyors eltávolítására szolgál. Az egyedülálló CoZap párna közvetlenül a festéktelenítő tálcába kerül, és felszívja az összes szabad festéket az oldatban, így nincs szükség a festéktelenítő oldat cseréjére.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?