Ugrás a tartalomra
Merck

Cell Health elemzés

Élő/halott sejtek kettős festése

A sejtek egészségi állapotának elemzésére szolgáló reagensek, készletek és eszközök a sejtkultúra vitalitásának általános és specifikus mutatóit mérik. Az életképességi vizsgálatok a sejtek egészségének általános mérésére vagy a kezelés hatásainak értékelésére használhatók a citotoxicitási vizsgálatokkal együtt. A proliferációs vizsgálatok gyakran a DNS-szintézist és a sejtosztódást használják a sejtek metabolikus aktivitásának mérésére a körülmények vagy kezelések hatására. A citotoxicitási készletek a metabolikus aktivitás értékelésére bioredukciós kijelzéseket alkalmazhatnak.  

A hatékony és megbízható sejttenyésztés egyik leggyakoribb akadálya a kultúra szennyeződése. Bár egyes szennyeződések a tenyészetek lelkiismeretes mikroszkópos vizsgálatával kimutathatók, az olyan szennyeződések, mint a mikoplazma, elkerülik a vizuális kimutatási módszereket. A kultúrákat ezért inkább rutinszerűen kell szűrni olyan készletekkel és reagensekkel, amelyek megbízhatóan kimutatják a mikrobiális szennyeződéseket. Az olyan reagensek, amelyek minimalizálják és megszüntetik a kontaminációt, amikor az előfordul, a steril technikát és a helyes tenyésztőtermi gyakorlatot kiegészítő alapvető fontosságú tenyésztőhelyiségek.

Átfogó sejtegészségügyi kínálatunk tartalmazza

Cell-életképesség és proliferációs vizsgálatok

Az sejtproliferáció és életképesség a kultúrában lévő sejtek reakciójának és egészségének nyomon követésére szolgálnak a különböző ingerekkel való kezelés után. A vizsgálati módszer megfelelő kiválasztása a vizsgálandó sejtek számától és típusától, valamint a várt eredménytől függ. A sejtproliferációs vizsgálatokkal a sejtek számát, a sejtosztódások számát, a metabolikus aktivitást vagy a DNS-szintézist lehet nyomon követni. Az olyan életképességi festékeket, mint a trypánkék vagy kalcein-AM használó sejtszámlálás mind a proliferáció mértékét, mind az életképes sejtek százalékos arányát meg tudja adni. 5(6)-Karboxifluoreszcein-diacetát N-szuccinimidil-észter (CFSE)  (21888, SCT110) népszerű választás egy populációban végbement sejtosztódások számának mérésére. A sejtbe jutva a CFSE-t az intracelluláris észterázok hasítják a fluoreszcens vegyület kialakulásához, és a szukcinimidil-észter csoport kovalensen reagál az intracelluláris fehérjék primer aminjaival. Minden egyes osztódáskor az egyes leánysejtek fluoreszcencia-intenzitása megfeleződik, lehetővé téve a sejtosztódások számának egyszerű kimutatását áramlási citometriával.

Az MTT metabolizmusa formazán sókká az életképes sejtek által, amint az 96 lyukú lemezen látható.

Az MTT metabolizmusa formazán sókká az életképes sejtek által, amint az 96 lyukú lemezen látható.

A sejtek életképességének és proliferációjának mérésére szolgáló átfogó eszközeink és megoldásaink különböző módszereket alkalmaznak, többek között:

  • DNS-szintézis proliferációs próbák
  • Metabolikus proliferációs próbák
  • Lumineszcens sejtéletképességi próbák
  • Fluoreszcens festékkel végzett proliferációs vizsgálatok
  • Live/Dead/Total Cell Triple Staining for 3D Cultures
  • Trypan Blue Dye Exclusion Viability Counting

Citotoxicitási próbák

A metabolikus aktivitást mérő próbák alkalmasak a proliferáció, az életképesség és a citotoxicitás elemzésére. A tetrazoliumsók, mint például az MTT és XTT redukciója színes formazánvegyületekké vagy a rezazurin bioredukciója  (R7017, TOX8) csak metabolikusan aktív sejtekben történik. Az aktívan proliferáló sejtek növelik anyagcsere-aktivitásukat, míg a stresszes sejtek, például a toxinoknak kitett sejtek csökkent aktivitást mutatnak.

Apoptózisvizsgálatok

A sejthalál számos normális élettani funkcióhoz szükséges mind a fejlődés, mind a homeosztázis során. A daganatos sejtek azon képessége, hogy elkerülik a programozott sejthalált, más néven apoptózist, a legtöbb ráktípus egyik jellemzője. A sejtfehérjék széles skálája, beleértve a sejtfelszíni receptorokat, adaptorokat, proteázokat és mitokondriális komponenseket, szabályozza a sejtek túlélése és az apoptózis általi elhalás közötti finom egyensúlyt. Az átgondolt tesztválasztás segíthet nemcsak a sejttenyésztési körülmények és kezelések sejtek egészségére gyakorolt hatásainak elemzésében, hanem azoknak a mechanizmusoknak az elemzésében is, amelyekkel a sejtek egészségét befolyásolják. Assay-termékek teljes skáláját kínáljuk a korai, középső és késői fázisban történő apoptózis kimutatásához.

Cellaszennyeződések kimutatása és megszüntetése

A sejtalapú kutatásokban alapvető fontosságú a szennyeződésmentes sejtkultúrák fenntartása. A legelterjedtebb sejttenyésztési problémák közé tartozik a mikoplazmával való szennyeződés, egy olyan baktériumnemzedékkel, amelynek morfológiáját a szubmikronos méret és a sejtfal hiánya jellemzi, ami miatt ezeket a baktériumokat nehéz vagy lehetetlen mikroszkópiával kimutatni, és számos antibiotikummal szemben rezisztensek. Bár a mikoplazmák általában nem okoznak sejthalált, a tenyésztett sejtekre gyakorolt különféle hatásokért felelősek, amelyek közé tartozik a szabályozatlan anyagcsere, a csökkent proliferáció és a kromoszóma-rendellenességek. Röviden, a mikoplazma-szennyeződés veszélyezteti az érintett sejtvonalak érvényességét az élettudományi kutatásokhoz szükséges érdemi adatok szolgáltatásában.

Az olyan gyakori DNS-kimutató szerek, mint a DAPI vagy a Hoechst, fluoreszcens mikroszkópiával mutatják ki a mikoplazma jelenlétét a fertőzött kultúrákban.

Az eszközeink a mycoplasma kimutatás és elimináció tartalmazzák:

  • LookOut® Mycoplasma PCR Detection Kit és más PCR és qPCR kitek a sejtkultúrákban lévő mikoplazmák megbízható, érzékeny leleplezéséhez
  • Triptóz-foszfát tápoldat és más reagensek a mikoplazma tenyésztéssel történő kimutatásához
  • /li>
  • DNS-festékek a mikoplazma kimutatásához fluoreszcens DNS-festési módszerrel
  • LookOut® Mycoplasma Erase spray és reagensek a mikoplazma-mentesítéshez


Kapcsolódó termékforrások



A folytatáshoz jelentkezzen be

Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.

Még nem rendelkezik fiókkal?