Klasická média a vyrovnávací paměti
Varianty médií pro buněčné kultury byly zdokonaleny tak, aby vyhovovaly potřebě fyziologicky relevantnějších prostředí pro různé kultury savčích buněk. Tato média a soli spolu s jejich složkami byly kvalifikovány pro širokou škálu aplikací buněčných kultur a jsou vyráběny v našich nejmodernějších zařízeních. Vyberte si média vhodná pro vaši aplikaci podle vašich parametrů, včetně koncentrace glukózy, L-glutaminu nebo doplnění stabilního glutaminu, zařazení pH indikátoru fenolové červeně a práškových nebo tekutých formátů.
Products
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) je mezi definovanými médii pro buněčné a tkáňové kultury nejvhodnějším médiem pro mnoho adherentních buněčných fenotypů. Dulbeccova modifikace je vylepšený doplňkový přípravek, který zvyšuje obsah vybraných aminokyselin a vitaminů původního Eagleova média až čtyřnásobně. Náš výběr zahrnuje řadu koncentrací glukózy a také formulace s L-glutaminem a bez něj. Pro aplikace citlivé na estrogeny jsou k dispozici produkty bez pH indikátoru fenolové červeně a naše komplexní nabídka zahrnuje pohodlné tekuté formáty připravené k použití i ekonomická prášková média pro snadnější skladování a delší skladovatelnost.
RPMI 1640 Media
Pojmenován po institutu Roswell Park, kde jej Moore a kol vyvinuli, Média RPMI 1640 jsou optimalizována pro kultivaci neadherentních typů buněk, jako jsou lymfocyty a další krevní buňky. Složení vychází z řady médií RPMI 1630 s využitím hydrogenuhličitanového pufrovacího systému a změn v množství aminokyselin a vitaminů. Médium RPMI 1640 bylo použito pro kultivaci lidských normálních a neoplastických leukocytů. Při správném doplnění prokázal tento přípravek širokou použitelnost pro podporu růstu mnoha typů kultivovaných buněk, včetně čerstvých lidských lymfocytů v 72hodinovém testu stimulace fytohemaglutininem (PHA).
DMEM/F12 Media Formulations
V posledních letech vědci informovali o kultivaci různých buněčných linií v bezsérovém médiu, které obsahovalo místo séra doplněk živin, růstových faktorů a hormonů. Mather a Sato (BBRC, 1985) oznámili úspěšnou kultivaci Leydigových a Sertoliho buněk v bezsérovém médiu, které obsahovalo inzulin, transferin, epidermální růstový faktor, leutinizační hormon nebo folikuly stimulující hormon, somatomedin a růstový hormon. Ačkoli jsou hormony a jejich koncentrace specifické pro studovaný typ buněk, médium, které se pro tyto studie ukázalo jako optimální, bylo 1:1 směs Dulbeccova modifikovaného média Eagle's Medium (DMEM) a Ham's F-12 Nutrient Mixture, známá také jako DMEM/F12. Pufr HEPES lze do přípravku zahrnout v konečné koncentraci 15 mM, aby se kompenzovala ztráta pufrovací kapacity vzniklá odstraněním séra.
MEM (Minimum Essential Medium)
Vyvinul ho Harry Eagle pracující v NIH, Minimální esenciální médium (MEM) obsahuje esenciální aminokyseliny univerzální pro potřeby více druhů a je jedním z nejpoužívanějších syntetických médií pro kultivaci buněk. První pokusy o kultivaci normálních savčích fibroblastů a některých subklonů HeLa buněk odhalily, že mají specifické nutriční požadavky, které nemohou být splněny Eaglovým základním médiem (BME). Následné studie s použitím těchto a dalších buněk v kultuře ukázaly, že je možné přidat do BME přídavky, které napomohou růstu širší škály náročných buněk. MEM, který zahrnuje tyto úpravy, obsahuje vyšší koncentrace aminokyselin, takže se médium více přibližuje složení proteinů savčích buněk.
MEM byl použit pro kultivaci široké škály buněk pěstovaných v monovrstvách. Volitelné doplnění neesenciálních aminokyselin do přípravků, které obsahují Hanksovy nebo Earleovy soli, rozšířilo použitelnost tohoto média. Složení bylo dále upraveno volitelným vyloučením vápníku, aby bylo možné pěstovat buňky v suspenzi.
Mediální přípravky Ham's F-10 a F-12
Směsi živin Ham's byly původně vyvinuty pro podporu růstu několika klonů ovariálních buněk čínského křečka (CHO), jakož i klonů HeLa a myších L-buněk, ale jsou vhodné i pro kultivaci hepatocytů, virové fúze a testy toxicity. Tyto směsi byly vytvořeny pro použití s doplněním séra nebo bez něj, v závislosti na typu kultivovaných buněk.
- Hamův F-10 prokázal podporu růstu lidských diploidních buněk, bílých krvinek a primárních explantátů potkaních, králičích a kuřecích tkání.
- Ham's F-12 byl použit pro růst primárních potkaních hepatocytů a epiteliálních buněk potkaní prostaty. Byl popsán test klonální toxicity s použitím buněk CHO s použitím přípravku Ham's F-12, který je k dispozici také s 25 mM HEPES, který poskytuje účinnější pufrování v optimálním rozmezí pH 7,2 - 7,4
- Modifikace přípravku Ham's F-12 od firmy Coon byla vyvinuta pro kultivaci hybridních buněk vzniklých virovou fúzí. Tato modifikace se skládá z 2násobku standardní koncentrace aminokyselin a pyruvátu a dále ze zahrnutí kyseliny askorbové a upravených koncentrací solí. Mývalova formule obsahuje 0,863 mg/l síranu zinečnatého, což ji může činit nevhodnou pro kultivaci myších L-buněk.
- Kaighnova modifikace Ham's F-12 (nazývaná také Ham's F-12K) má zvýšené koncentrace vybraných aminokyselin a pyruvátu a také upravené soli (Konigsbergova formule). Toto médium bylo navrženo pro podporu růstu diferencovaných potkaních a kuřecích buněk a primárních lidských hepatocytů.
Médium 199 (M199)
Předchozí média pro tkáňové kultury byla převážně vytvořena z živočišných produktů a/nebo tkáňových extraktů. V roce 1950 Morgan a jeho spolupracovníci informovali o své snaze vyrobit přísně definovaný zdroj výživy pro buněčné kultury. Jejich pokusy prováděné s různými kombinacemi vitaminů, aminokyselin a dalších faktorů odhalily, že růst explantované tkáně lze měřit v tom, co se stalo známým jako Medium 199 (M199), které se nyní široce používá ve virologii, při výrobě vakcín, při kultivaci explantátů primárních tkání a při kultivaci in vitro epitelových tkání myší slinivky břišní a potkaní čočky.
Výzkumníci nakonec zjistili, že dlouhodobá kultivace buněk vyžaduje přidávání přídavku séra do kultivační tekutiny. Při správném doplnění má médium 199 širokou druhovou použitelnost, zejména pro kultivaci netransformovaných buněk.
Základní soli pro buněčné kultury
D-PBS, Hanks', Earle's, Tyrode's - v nejucelenější kolekci vyvážených solí, která je kdekoli k dispozici, najdete správné složení pro vaši kultivační aplikaci.
Další klasická média pro buněčné kultury
Najdete zde specializované formulace včetně Amesovy a Iscove''.s modifikace, dále Click's, L-15, McCoy's, NCTC a další.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?