Dulbeccovo modifikované médium (DMEM)

Dulbeccovo modifikované médium Eagle (DMEM) je jedním z nejvhodnějších médií pro mnoho adherentních buněčných fenotypů mezi definovanými médii pro buněčné a tkáňové kultury. Patří sem buňky savců, hmyzu a rostlin. Původní Eagleovo médium bylo vyvinuto v 50. letech 20. století a bylo formulováno pro kultivaci kuřecích buněk. Modifikace Dulbecco's je však vylepšená doplňková formulace, která zvyšuje obsah vybraných aminokyselin a vitaminů až čtyřnásobně ve srovnání s původním Eagle's médiem.
V buněčných kulturách se DMEM používá jako médium pro podporu růstu různých typů buněk, včetně primárních buněk, kmenových buněk a transformovaných buněk. Upravenou verzi DMEM lze také použít pro různé výzkumné aplikace, jako je objevování léčiv, tkáňové inženýrství a studium buněčných signálních drah.
DMEM není sám o sobě plnohodnotným médiem, protože mu chybí nezbytné živiny, jako jsou bílkoviny, lipidy nebo růstové faktory. Proto musí být doplněna dalšími složkami, jako jsou fetální hovězí sérum (FBS), aminokyseliny a další živiny, které zajišťují kompletní a vyvážené prostředí pro růst buněk v kultuře.
Naše nabídka zahrnuje řadu koncentrací glukózy a také přípravky s L-glutaminem a bez něj. Pro aplikace citlivé na estrogeny jsou k dispozici produkty bez indikátoru pH fenolové červeně a naše komplexní nabídka zahrnuje pohodlné tekuté formáty připravené k použití i ekonomická prášková média pro snadnější skladování a delší skladovatelnost.
Produkty
DMEM - vysoká vs. nízká hladina glukózy
DMEM je k dispozici v různých složeních v závislosti na specifických potřebách kultivovaných buněk a cílech experimentální práce. Původní složení média bylo s nízkým obsahem glukózy 1 g/l, což je vhodné pro pěstování buněk, které jsou citlivé na vysoký obsah glukózy a nemusí se jim dařit v médiu s vysokým obsahem tohoto cukru. DMEM s vysokým obsahem glukózy však obsahuje 4,5 g/l glukózy a obvykle se používá pro kultivaci buněk, které pro optimální růst vyžadují vysoké hladiny glukózy.
Média bez séra (SFM)
Sérum je součástí mnoha médií pro buněčné kultury a často se používá k doplnění médií o hormony, růstové faktory a další živiny, které jsou potřebné pro růst a množení buněk. Sérum však může obsahovat nečistoty a kontaminanty, které mohou narušit výsledky pokusů, a jeho použití může vyvolávat etické obavy.
Média bez séra jsou formulována bez živočišného séra nebo jiných složek živočišného původu. Tato média se skládají z vhodných nutričních a hormonálních složek, které podporují růst a proliferaci buněk v kultuře.
Některé výhody používání bezsérových médií pro buněčné kultury jsou vyšší produktivita, větší konzistence a snadnější purifikace a následné zpracování. Bezsérová média lze také formulovat se specifickými kombinacemi růstových faktorů pro určité typy buněk a výzkumné cíle. Tato média jsou vhodná pro širokou škálu aplikací buněčných kultur, včetně výroby rekombinantních proteinů, studia růstu a diferenciace buněk, zkoumání buněčných signálních drah, výroby virových vakcín a také pro objevování a vývoj léčiv.
Jedním z takových bezsérových médií je DMEM s Ham's F-12, který se používá při růstu savčích buněk včetně MDCK, gliových buněk, fibroblastů, lidských endoteliálních buněk a potkaních fibroblastů. DMEM obsahuje vysoké koncentrace aminokyselin, glukózy a vitaminů a Ham's F12 dodává zinek, putrescin, hypoxantin a tymidin. Ke kompenzaci ztráty pufrovací kapacity lze přidat pufry jako FBS a HEPES.
DMEM s fenolovou červení a bez ní
Fenolová červeň je pH indikátor, který mění barvu při různých hodnotách pH a běžně se přidává do DMEM v koncentraci 0,01-0,03 %. Je užitečný pro sledování pH média a zajištění, že zůstává v rozmezí vhodném pro růst a metabolismus buněk.
Některé buňky mohou být citlivé na fenolovou červeň nebo mohou být její přítomností v médiu ovlivněny, proto je k dispozici také DMEM bez fenolové červeně. U některých navazujících aplikací, jako je analýza proteinů nebo analýza genové exprese, by mohla přítomnost fenolové červeně v médiu interferovat. Pro některé zobrazovací techniky, jako je fluorescenční mikroskopie, může být pro získání přesných výsledků nezbytné použití DMEM bez fenolové červeně. Fenolová červeň absorbuje světlo ve viditelném spektru, a může proto narušit přesnost těchto technik. Volba mezi DMEM s fenolovou červení a bez ní závisí na konkrétních potřebách a požadavcích kultivovaných buněk a na cílech experimentální práce.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?Toto je strojově přeložená stránka.