Tris
O Tris, também conhecido como THAM (Tris(hidroximetil)aminometano), é um pó cristalino branco. O tampão Tris tem um pKa de aproximadamente 8,1 a 25 °C, o que o torna uma boa opção para a maioria dos processos biológicos na faixa de pH de 7 a 9. Se comparado a outros tampões especializados, como HEPES, o tris em pó é uma opção econômica e mais robusta.
As soluções tampão tris são preparadas dissolvendo a base tris em água e ajustando o pH com ácido, normalmente ácido clorídrico ou ácido sulfúrico. Essa solução serve como um regulador e estabilizador de pH confiável em uma variedade de configurações experimentais, incluindo bioquímica de proteínas, biologia molecular e enzimologia, bem como técnicas como eletroforese, ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) e processos de cromatografia. Além disso, na cultura de células, o tampão tris ajuda a manter o ambiente de pH ideal, essencial para o crescimento e a proliferação das células e para a manutenção das condições fisiológicas nos meios de cultura de células.
O tampão Tris está disponível em várias formas, incluindo soluções pré-fabricadas ou em pó, o que o torna conveniente para uso em laboratório.
Produtos
Tris HCl
O Tris HCl ou cloridrato de tris (também conhecido como Trizma HCl) é um agente tamponante (tampão ácido) comumente usado em biologia molecular e em ambientes bioquímicos para ajustar o pH de uma solução ou estabilizar o pH. Semelhante à base tris, o tris HCl também é um pó cristalino branco com fórmula molecular C4H12ClNO3 e peso molecular ligeiramente maior de 157,60. A distinção principal está na adição de ácido clorídrico à base tris, resultando na formação de Tris HCl. Embora a base Tris tenha um pKa de cerca de 8,1, o que permite que ela funcione como um tampão na faixa de pH de 7 a 9, o Tris HCl já contém ácido clorídrico. Essa adição reduz o pH, tornando o Tris HCl adequado para tamponamento na faixa de pH de 7,0 a 8,6.
A base Tris serve como um tampão versátil em uma ampla faixa de pH, enquanto o Tris HCl oferece uma faixa de pH mais específica devido ao seu conteúdo de ácido clorídrico. A seleção entre Tris e Tris HCl depende da faixa de pH desejada e das necessidades experimentais ou de aplicação específicas.
Solução salina tamponada com Tris (TBS)
A Solução salina tamponada com Tris (TBS) é um tampão comumente usado em aplicações biológicas e bioquímicas. Geralmente, contém Tris(hidroximetil)aminometano, ou Tris, um agente tamponante que mantém um pH constante, e cloreto de sódio, que fornece a força iônica necessária. O TBS tem um pH relativamente neutro (cerca de 7,4) e é amplamente utilizado para aplicações como técnica de western blot, imunohistoquímica e ensaios ELISA. O TBS também é usado como um tampão de lavagem para remover anticorpos não ligados ou outros reagentes da amostra. A concentração de Tris e cloreto de sódio pode variar de acordo com a aplicação específica, mas uma formulação comumente usada é 50 mM de Tris e 150 mM de cloreto de sódio.
Tris Acetato EDTA (TAE)
O tampão TAE é outro tampão comumente usado em biologia molecular, eletroforese e para técnica de northern blot e southern blot. No tampão TAE, o tris funciona como um agente tamponante, o ácido acético contribui para a capacidade de tamponamento e o EDTA (ácido etilenodiaminotetracético) atua como um agente quelante. O TAE é amplamente utilizado como tampão de execução na eletroforese em gel de agarose, análise de fragmentos de DNA, eletroforese em gel de campo pulsado (para determinar o tamanho dos fragmentos de DNA), eletroforese de RNA e transferência de ácidos nucleicos.
Tris Borato EDTA (TBE)
O tampão TBE é amplamente utilizado para separar e analisar fragmentos de DNA, especialmente para obter maior resolução na separação de fragmentos menores de DNA. No tampão TBE, o ácido bórico desempenha um papel importante na manutenção da capacidade de tamponamento da solução. O tampão TBE encontra aplicações em várias técnicas, incluindo eletroforese em gel de agarose, sequenciamento de DNA, análise de produtos de reações em cadeia da polimerase (PCR), análise de oligonucleotídeos, eletroforese em gel desnaturante e eletroforese em gel nativo.
Tampão Tris Glicina
O tampão Tris-glicina é um sistema de tamponamento comumente usado em biologia molecular, especialmente na eletroforese de proteínas. Dentro do tampão tris glicina, a glicina contribui significativamente para a capacidade de tamponamento da solução e ajuda a atingir o nível de pH desejado. O pH do tampão pode ser ajustado com a adição de HCl. O tampão Tris-glicina é usado para ressuspender amostras de proteínas, diluir extratos de proteínas para análise ou armazenamento subsequente e é especialmente útil em técnicas de eletroforese de proteínas não desnaturantes, em que a manutenção da conformação nativa das proteínas é crucial. Também serve para a focalização isoelétrica e funciona como um agente tamponante para vários experimentos com proteínas.
Sulfato de dodecil tris-glicina-sódio (SDS)
O tampão Tris-glicina-SDS serve como o tampão de corrida padrão para SDS-PAGE, uma técnica utilizada para separar e analisar proteínas com base em seu peso molecular. Esse tampão é usado para quantificação de proteínas, desnaturação de proteínas, técnica de western blot e como parte do processo de preparação de amostras para análise posterior.
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