D4513

デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来

Type II-S, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

• 別名: DNase I, デオキシリボ核酸 5′-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ
• CAS番号: 9003-98-9
• Enzyme Commission number: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• EC Number: 232-667-0
• MDL番号: MFCD00130918
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.54

特性

• 由来生物: bovine pancreas
• 品質水準: 300
• 無菌性: sterile-filtered
• タイプ: Type II-S
• フォーム: lyophilized powder
• 比活性: ≥2,000 units/mg protein
• 分子量: ~31 kDa
• 精製方法: chromatography
• 組成: Protein, ≥80%
• 包装: vial of ≥10.0 mg protein
• テクニック: DNA purification: suitable
• 不純物: endotoxin, tested
• 溶解性: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)
• 適合性: suitable for molecular biology
• アプリケーション: diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• その他の活性: Chymotrypsin ≤0.01%; Protease ≤0.005%; RNase ≤0.01%
• 保管温度: −20°C

詳細

アプリケーション

[¹⁴C]DNA [¹⁴C]DNAを加水分解する能力について、SigmaのDNAse Iをヒト尿由来インターロイキン1阻害剤と比較しました。[1]これは、フットプリント実験に使用する酵素の安定性を調べるために、139塩基対のHind III/Nci I制限酵素断片の切断にも使用されています。DNase Iは、薬物とタンパク質のDNAへの結合を研究するためのフットプリント剤として広く使用されています。[2]

ウシ膵臓由来のデオキシリボヌクレアーゼIは、ウシ膵臓から高活性のRNase、DNase、コレステロールエステラーゼ、およびトリプシンを得るための新しいアプローチの研究に使用されています。また、ウシ膵臓由来のデオキシリボヌクレアーゼIも、コイ肝臓DNaseの単離およびさらなる特性解析の研究に使用されています。

タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用します。

生物化学的／生理学的作用

DNase Iは、ピリミジンに隣接したホスホジエステル結合に作用して、末端5'-ホスフェート（リン酸塩）をもつポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。Mg²⁺の存在下で、DNAse IはDNAの各鎖を独立的に切断し、切断部位はランダムです。両方のDNA鎖は、Mn²⁺の存在下でほぼ同じ部位で切断されます。[3]至適pHは7～8です。Mn²⁺、Ca²⁺、Co²⁺、およびZn²⁺などの二価カチオンは、酵素の活性化因子です。[4]5 mMの濃度のCa²⁺は、タンパク質分解による断片化に対抗して酵素を安定化させます。ウシ膵臓由来のDNAse Iは、クロマトグラフィー的に識別可能な4つの構成要素A、B、C、およびDからなり、それらのモル比はそれぞれ4：1：1です。Dはごく微量で認められます。[5]2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）[6]およびアクチン[7]は、酵素活性を阻害することが知られています。

単位の定義

1 Kunitz単位は、タイプIまたはIIIのDNAを基質に使用して、pH 5.0、25℃、1 mLで、1分間に、0.001のΔA₂₆₀における吸光度変化を生成します。(1単位＝1 Kunitz単位)

物理的形状

塩化カルシウムを含む凍結乾燥粉末

調製ノート

酵素粉末は、水またはリン酸緩衝液以外の何らかの緩衝液を用いて、pH 4.0～9.0で復元調製できます。カルシウムキレート剤の使用は避けるべきです。10 mg/mL DNAse Iの0.15 M NaCl溶液は、アリコートにして-20℃で1週間保存した場合、その活性の10%超が失われる場合があります。また、同じ溶液をアリコートにして2-8℃で保存した場合、約20%の活性が失われる可能性があります。これは、pH 5～7で60℃で5時間まで活性を維持しますが、68℃では10分未満で活性を失います。また、1 mg/mLの濃度の酢酸緩衝液（pH 5.0）および1 mg/mLのトリス緩衝液（pH 7.2）では、6%/時の速度で活性を失います。

アナリシスノート

タンパク質はビウレットにより測定します。

その他情報

パーキンソン病の研究に貢献したサプライヤーに贈られる2024 CiteAb賞の受賞者@′@

安全性情報

• ピクトグラム: GHS08
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H334
• 注意書き: P261 - P284 - P501
• 危険有害性の分類: Resp. Sens. 1
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable
• 個人用保護具 (PPE): Eyeshields, Gloves, type N95 (US)