COLLD-RO

コラゲナーゼD

from Clostridium histolyticum

• Enzyme Commission number: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 12352204

特性

• 由来生物: Clostridium histolyticum
• 品質水準: 100
• 無菌性: non-sterile
• 形状: lyophilized
• collagenase activity: >0.15 U/mg lyophilizate
• 包装: pkg of 100 mg (11088858001); pkg of 2.5 g (11088882001); pkg of 500 mg (11088866001)
• メーカー／製品名: Roche
• 濃度: (working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
• テクニック: tissue processing: suitable
• 色: light brown
• 最適pH: 6.0-8.0
• 溶解性: water: soluble
• NCBIアクセッション番号: WP_171012037
• アプリケーション: cell analysis
• その他の活性: Clostripain 0.060 U/mg; Proteases 8 U/mg ( Azocoll); Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
• 保管温度: 2-8°C

詳細

詳細

コラゲナーゼDは、Clostridium histolyticumの培養培地から、濾過、硫安沈殿、透析、および凍結乾燥によって調製されます。

特異性

コラゲナーゼは、天然コラーゲンを分解します。クロストリパイン、トリプシン様酵素、および中性プロテアーゼは、他のタンパク質を同様に分解します。

アプリケーション

C. histolyticum由来コラゲナーゼは、様々な組織（例えば、肺、心臓、筋、骨、脂肪組織、肝臓、腎臓、軟骨、乳腺、胎盤、血管、脳、腫瘍など）の非凝集化や、初代細胞培養系の確立のための単一細胞懸濁液の調製において幅広く使用されています。コラゲナーゼDは、細胞表面タンパク質の機能やインテグリティが重要な場合に推奨されます。
Rocheの提供するClostridiumコラゲナーゼは、肝細胞、脂肪細胞、膵島、上皮細胞、筋細胞、内皮細胞などの、様々な組織由来の細胞の調製に使用されています。しかし、特定組織の分解のための、酵素の各ロットの適合性は、経験的に決定してください。

特徴および利点

内容
凍結乾燥品、非滅菌

単位の定義

Rocheのコラゲナーゼは、Wünschユニットで測定されます（Wünsch 基質で、25°C、1分間において生成される1 μmolの生成物）。
コラゲナーゼ活性はしばしばMandlユニットで与えられます（37°C、5時間において、コラーゲンから遊離される1 μmolのロイシン）。
Mandlユニットは、定義できない変数として、コラゲナーゼ製品中に含まれる夾雑プロテアーゼの濃度にある程度の影響を受けるため、残念ながら、2つの活性ユニット間の一貫した換算係数は存在しません。より純度の高いコラゲナーゼ製品は実際に、Mandlユニットにおいて、未処理の製品よりも低い比活性を与えます。Clostridium製品は、通常、約1：1800の換算係数を与えます （例、Clostridiumコラゲナーゼのあるロットは、約0.15 Wünsch U/mgおよび250 Mandl U/mgを示しました）。

物理的形状

凍結乾燥品、非滅菌

調製ノート

活性剤：Ca²⁺
使用濃度：0.5～2.5mg/mL
保管条件（使用液）：-15～-25°C
Rocheは、すぐに使用する必要な量の凍結乾燥物だけを再溶解することを推奨します。再溶解した溶液は、-15～-25°Cで1週間保存できます。再溶解後は活性が低下するため、凍結融解の繰り返しは避けてください

阻害剤：
コラゲナーゼ阻害剤：EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-メルカプトエタノール
コラゲナーゼは血清によって阻害されません。
クロストリパイン阻害剤：TLCK
トリプシン阻害剤： アプロチニン、トリプシンインヒビター（卵白、大豆）

酵素活性：
コラゲナーゼ活性：＞ 0.15 U/mg（Wünsch による）（25°Cで、4-フェニル-アゾベンジル-オキシカルボニル-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg を基質とする）
夾雑酵素活性：トリプシン、クロストリパイン、およびトータルのタンパク質分解活性
コラゲナーゼDは、コラゲナーゼ活性が中程度から高活性であり、極めて低いトリプシン活性を持ちます（通常＜ 0.2 units/mg、BAEEを基質として）。

再構成

平衡塩類溶液に再溶解してください（例、HBSS）

保管および安定性

遮光してください

その他情報

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。

安全性情報

• ピクトグラム: GHS07,GHS08
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H315 - H319 - H334 - H335
• 注意書き: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• 危険有害性の分類: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• ターゲットの組織: Respiratory system
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash