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DN25
デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来
lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein
Deoxyribonuclease I from bovine pancreas
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別名:
デオキシリボヌクレアーゼ, DNase I, デオキシリボ核酸 5′-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ
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| 容量 | カタログ番号 | 在庫状況 | 単価 |
|---|---|---|---|
| 10 mg | 在庫あり出荷可能from市川市大町368 | ￥11,500 | |
| 100 mg | 在庫あり出荷可能from市川市大町368 | ￥27,900 | |
| 1 g | 在庫あり出荷可能from市川市大町368 | ￥122,000 | |
| 5 g | カートの在庫状況を確認する | ￥360,000 |
この商品について
CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-667-0
MDL number:
Specific activity:
≥400 Kunitz units/mg protein
Biological source:
bovine pancreas
biological source
bovine pancreas
Quality Segment
form
lyophilized powder
specific activity
≥400 Kunitz units/mg protein
mol wt
~31 kDa
composition
Protein, ≥85%
technique(s)
DNA extraction: suitable
solubility
0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy
suitability
suitable for molecular biology
application(s)
diagnostic assay manufacturing
foreign activity
RNase ≤0.02%
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
General description
DNase I、あるいはデオキシリボヌクレアーゼIは、ウシ膵臓から単離したエンドヌクレアーゼです。
- メルクのDNase Iは、二重鎖および一重鎖DNAをオリゴおよびモノヌクレオチドへと分解します。
- ウシ膵臓DNaseには、等電点A、B、CおよびDを持った4つのアイソザイムが存在します（5.22、4.96、5.06および4.78）。3。最も多いのはAであり、次いでBおよびCが多く、Dは少量存在します。
- DNase Iの構造はエキソヌクレアーゼIIIの構造と類似しており、2つの中心的なβシートを有します。各βシートは6本のβ鎖からなります。このβシートの複合体は、広範なループとαヘリックス領域で囲まれています。本酵素はエキソヌクレアーゼIIIと類似した構造を持っています。[1]
Application
- 粘度を減少させて、初代細胞単離におけるDNA除去による収量を向上：
- DNAへの標識塩基の取り込み：DNAニック
- 放射活性標識
- バイオプロセシング用途：DNA除去
- RT-PCRの前にRNA調製物からゲノムDNAを除去する
- in vitro転写
- ニック翻訳
- DNaseフットプリント法
- 細胞中のアクチン重合のアクチン調節、および細胞アポトーシス
- 核酸へのタンパク質のUV架橋結合
- DNaseは、細胞中のアクチン重合の調節に一定の役割を果たし、アポトーシスプロセスに関与[1]
タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用します。
Biochem/physiol Actions
DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端に5'-リン酸を持ったポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。DNアーゼIは、Mg2+の存在下、DNAの各鎖を独立して切断し、その切断場所はランダムです。両方のDNA鎖は、Mn2+存在下、ほとんど同じ場所で切断されます。Mn2+、Ca2+、Co2+、およびZn2+などの二価カチオンは、酵素を活性化します。5 mMのCa2+は、プロテアーゼ消化に対して酵素を安定化します。至適pHは7～8であることが分かっています。ウシ膵臓由来DNアーゼIは、クロマトグラフィーによって区別される4つのコンポーネント A、B、CおよびDからなり、それらのモル比はそれぞれ、4：1：1です。Dは少量だけ含まれます。[1]2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）[2]およびアクチン[3]は、酵素活性を阻害することが知られています。
Features and Benefits
メルクのデオキシリボヌクレアーゼDNAse Iは、基本的にRNAseを含まず、製品応用をサポートします。
Physical form
粗製試薬、塩化カルシウムを含有
Preparation Note
0.15 MのNaClに溶解したDNアーゼIの10 mg/mL溶液のアリコートを-20°Cで1週間保存した場合、10％以下の活性が失われることがあります。同様の溶液を2～8°Cで保存した場合、約20％の活性が失われます。pH 5～7、60°Cでは、5時間まで活性が維持され、68°Cでは10分以下で活性が消失します。1 mg/mLの濃度で、酢酸バッファー（pH 5.0）およびトリスバッファー（pH 7.2）中では、1時間あたり6％の速さで活性が失われます。
Analysis Note
ビウレット法により定量したタンパク質。
Other Notes
1 Kunitz単位は、タイプIまたはIIIのDNAを基質に使用して、pH 5.0、25°C、1 mLで、1分間に、0.001のA260における吸光度変化を生成します。
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当該品目 | |||
|---|---|---|---|
| biological source bovine pancreas | biological source bovine pancreas | biological source bovine pancreas | biological source bovine pancreas |
| specific activity ≥400 Kunitz units/mg protein | specific activity ≥2,000 Kunitz units/mg protein | specific activity 1700—2300 U/vial | specific activity ≥60,000 dornase units/mg dry wt |
| technique(s) DNA extraction: suitable | technique(s) DNA purification: suitable | technique(s) DNA extraction: suitable | technique(s) - |
| form lyophilized powder | form lyophilized powder | form powder | form lyophilized |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - |
| suitability suitable for molecular biology | suitability suitable for molecular biology | suitability suitable for molecular biology | suitability - |
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signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
保管分類
11 - Combustible Solids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
プロトコル
To standardize a procedure for the enzymatic assay of Deoxyribonuclease I.
関連コンテンツ
Find protein research tools to prepare, isolate, and analyze proteins. Organized by how to extract, protect, purify, enrich, modify, and quantify proteins.
グローバルトレードアイテム番号
| カタログ番号 | GTIN |
|---|---|
| DN25-10MG | 04061835544349 |
| DN25-5G | 04061833591673 |
| DN25-100MG | 04061835556687 |
| DN25-1G | 04061835556694 |
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What is the salt tolerance of this DNase I?
1 回答-
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I would like to know if this product can be used to eliminate DNA from cells in tissue culture (12 wells chamber slide) before immunofluorescent staining? if it can be used - how?
1 回答-
This product can be used to eliminate DNA from cells in tissue culture. Concentration and incubation time should be optimized based on the specific application.
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HOW CAN I PRESERVE DN25 DILUTED and filtered in culture medium? 4C or -20 C?. It will lose activity?
1 回答-
This product is soluble in 0.15 M NaCl at 5 mg/mL. Solutions prepared at 10 mg/mL in 0.15 M NaCl may lose up to 10% activity when stored for 1 week in aliquots at –20 °C. The same solutions stored in aliquots at 2-8 °C can lose up to 20% activity. Please see the link below to review the product datasheet for additional information:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/233/818/dn25pis-ms.pdf役に立ちましたか？
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What is the recommended method for long-term storage of the 1 gram bottle of DN25 in solution?
1 回答-
The user bulletin provides guidance on the storage of DNase I once reconstituted. When stored in aliquots at -20°C, solutions of DNase I at 10 mg/mL in 0.15 M NaCl may lose 10% of activity over a week, while storing the same solutions at 2–8°C can result in a 20% activity loss. Alternatively, maintaining solutions at a minimum concentration of 1 mg protein/mL with 5 mM calcium chloride at -20°C can retain 90% activity for at least a year. Solutions with 0.1 mg protein/mL are less stable and may need gelatin as a stabilizer.
For applications not affected by glycerol, two storage buffer options are available as they do not freeze at -20°C:
• 20 mM sodium acetate (pH 6.5) with 5 mM CaCl2, 0.1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), and 50% (v/v) glycerol, containing DNase I at 5 mg/mL.
• 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) with 50 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, and 50% (v/v) glycerol, with DNase I at 2 mg/mL.役に立ちましたか？
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Hi I use the DNase during isolation of cells from lung tissue. Do I need to filter the DNase solution before usage?
1 回答-
This is not a sterile product. If sterility is required due to the specific application, solutions may be filter sterilized before use. Please see the link below to review the product datasheet:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/233/818/dn25pis-ms.pdf役に立ちましたか？
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I use the DNase when I isolate lung cells from lung. Do I need to filter them before I use? I will culture the isolated lung cells.
1 回答-
Yes, please filter the DNase solution before use in cell culture, preferably with a 0.22 um filter. The powder is not sterilized as provided.
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