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由来生物
bovine pancreas
品質水準
リコンビナント
expressed in Pichia pastoris
形状
solution
分子量
~39 kDa
包装
pkg of 10,000 U
メーカー／製品名
Roche
最適pH
7.0-8.0
詳細
リコンビナントDNアーゼIは、DNA特異的なエンドヌクレアーゼです。本酵素は、DNA内のホスホジエステル結合を加水分解することで、二本鎖および一本鎖DNAの両方をランダムに分解し、オリゴヌクレオチドおよびモノヌクレオチドの混合物を生成します。リコンビナントDNアーゼIの生産プロセスにおいて使用される材料は、すべて非動物由来であり、アニマルフリーの製品となります。
内容
内容
- リコンビナントDNアーゼIRNアーゼフリー、10 U/μL
- インキュベーションバッファー、10倍濃縮液
特異性
熱失活：1ユニットのDNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、75°C、10分間のインキュベーションによって熱失活されます。
注意事項：また別の方法では、DNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、例えばCurrent Protocols in Molecular Biologyなどに記載された標準プロトコルに従ったフェノール抽出によって、失活および除去できます。
注意事項：また別の方法では、DNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、例えばCurrent Protocols in Molecular Biologyなどに記載された標準プロトコルに従ったフェノール抽出によって、失活および除去できます。
アプリケーション
DNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、RNアーゼ非存在下で行う必要のあるアプリケーションで、DNAを分解するために使用されます。例えば、DNアーゼIは以下のことに頻繁に使用されます：
- RT-PCR前のRNAサンプルからのゲノムDNAの除去
- in vitro転写反応後のDNAフリーRNAの単離
- ニックトランスレーションの実施
- 真核生物DNAにおけるDNアーゼ感受性領域のマッピング
特徴および利点
- すべてのRNAサンプルからDNAコンタミネーションを除去します
- RNアーゼやプロテアーゼ活性を含みません
- 熱失活が可能であり、有機溶媒による抽出が不要です
- DNアーゼ活性の最大化をサポートする最適なインキュベーションバッファーと共に提供します
- 完全なアニマルフリーの工程によって生産され、動物由来材料に関連したリスクを排除します
包装
1つのキットには2つのコンポーネントが含まれています。
品質
夾雑物なし：各ロットは、RNアーゼおよびプロテアーゼが含まれていないことを保証するため、最新の品質管理手順に従って試験されています。
規格
グリコシル化
リコンビナントDNアーゼIは、不均一にN-グリコシル化されているため、ゲル電気泳動では2本のバンドとして観察されます。
二価イオン要求性の
DNアーゼIは、活性を最大化するために二価のカチオンを必要とします。DNA特異的エンドヌクレアーゼは、マグネシウムイオンなどによって活性化され、カルシウムイオンによって刺激されます。そのため、本酵素は、EDTAのような金属キレート剤によって阻害されます。
リコンビナントDNアーゼIは、不均一にN-グリコシル化されているため、ゲル電気泳動では2本のバンドとして観察されます。
二価イオン要求性の
DNアーゼIは、活性を最大化するために二価のカチオンを必要とします。DNA特異的エンドヌクレアーゼは、マグネシウムイオンなどによって活性化され、カルシウムイオンによって刺激されます。そのため、本酵素は、EDTAのような金属キレート剤によって阻害されます。
単位の定義
1ユニットは、1 mL、260 nmのアッセイ条件下で、0.001/分の吸光度上昇を与える酵素活性です。
アッセイ条件：
容量活性は、以下のアッセイ混合物に従って決定されます。100 μgの子ウシ胸腺DNAを、2.5 mLの1倍インキュベーションバッファー中、40～70ユニットのDNアーゼI リコンビナントRNアーゼフリーと共に25°Cでインキュベーションします。吸光度上昇は260 nmで測定します。
アッセイ条件：
容量活性は、以下のアッセイ混合物に従って決定されます。100 μgの子ウシ胸腺DNAを、2.5 mLの1倍インキュベーションバッファー中、40～70ユニットのDNアーゼI リコンビナントRNアーゼフリーと共に25°Cでインキュベーションします。吸光度上昇は260 nmで測定します。
調製ノート
活性剤：二価の金属イオン
使用液：保存バッファー：20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、2 mM CaCl2、2 mM MgCl2、1 mMジチオエリスリトール、0.1 mg/mL Pefabloc SC、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
インキュベーションバッファー（10倍）：400 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、60 mM MgCl2、10 mM CaCl2、pH 7.9。
酵素希釈バッファー：25 mM Tris-HCl、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
使用液：保存バッファー：20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、2 mM CaCl2、2 mM MgCl2、1 mMジチオエリスリトール、0.1 mg/mL Pefabloc SC、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
インキュベーションバッファー（10倍）：400 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、60 mM MgCl2、10 mM CaCl2、pH 7.9。
酵素希釈バッファー：25 mM Tris-HCl、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
保管および安定性
未希釈の酵素溶液は－15〜－25℃で保存します。ストレージバッファーは4℃で保存します。
その他情報
ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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資料
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プロトコル
ウシ膵臓由来DNase Iは、分子量37,000の糖タンパク質です。DNaseからRNaseを除去するには特殊な手順が用いられます。
DNase I from bovine pancreas is a glycoprotein of Mr 37000. A special procedure is used to remove RNases from the DNase preparation.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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