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Merck

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C0130

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

for general use, Type I, ≥125 CDU/mg solid

Collagenase from Clostridium histolyticum
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別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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この商品について

CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-582-9
MDL number:
EC Number:
Specific activity:
≥125 CDU/mg solid

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form

lyophilized powder

specific activity

≥125 CDU/mg solid

mol wt

68,000 to 125,000

optimum pH

6.3-8.8

solubility

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL at 37 °C

storage temp.

2-8°C

General description

コラゲナーゼは、コラーゲンと呼ばれる三重螺旋タンパク質を切断します。3種類の組織コラゲナーゼが存在し、それらはマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)ファミリーに属しています。[1]Clostridium histolyticumから得たコラゲナーゼは、強力な活性を持ち、4~10°Cという低温において、両端からコラーゲンを消化します。[2]未処理のコラゲナーゼ混合物は、2つの主な酵素タイプ、つまり、コラゲナーゼおよびクロストリパインを含みます。[3]

Application

Clostridium histolyticum由来コラゲナーゼは、分離細胞懸濁液の調製など、生物学的研究において幅広く使用されます。[3]本製品は、ヒト腫瘍、マウス腎臓、ヒト成体および胎児脳、肺、ならびに他の上皮組織の凝集防止に適しています。また、肝臓および腎臓の灌流実験、膵臓の消化、ラットの肝臓の非実質細胞の分離、ならびに肝細胞の調製においても効果的であることが示されています。 コラゲナーゼはまた、終端糖化産物の研究のための動脈組織の調製にも使用されています。本酵素は、肝細胞の遊離のために約1 mg/mLの濃度でテストされています。消化に使用する濃度の幅は、0.1~5 mg/mLです。

Biochem/physiol Actions

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。
本コラゲナーゼ製品は、C. histolyticumによって分泌された酵素の混合物であり、分泌された酵素中に含まれる10~18の成分の相対比率によって区別される異なる製品があります。 主成分は、2種類のコラゲナーゼ、クロストリパイン、および中性プロテアーゼです。 これらの酵素の相乗効果により、コラーゲンや他の細胞内物質が分解されます。コラゲナーゼと中性プロテアーゼの両方の作用が、細胞の組織からの効果的な遊離に必要です。 様々な種類のコラーゲンが、コラゲナーゼの天然基質です。

Preparation Note

本製品は、Mandl, I.らの報告における最初の40%硫酸アンモニウム画分と同等です(Mandl, I., et al., J. Clin.Invest., 32, 1323, 1953.)。溶液は通常、TESCAバッファーにより、1~2 mg/mLで調製されます(50 mM TES、0.36 mM塩化カルシウムを含む、37°CでpH 7.4)。

Other Notes

1 コラーゲン消化単位(CDU)は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり 1.0 umol の BAEE を加水分解します。

Disclaimer

納品後未開封なら、本製品は2-8°Cで1年間安定です。

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当該品目
C1889C0255C9697
specific activity

≥125 CDU/mg solid

specific activity

≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

specific activity

≥500 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

specific activity

≥800 units/mg solid

form

lyophilized powder

form

powder

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder (from 0.2 μm filtered solution)

solubility

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL at 37 °C

solubility

-

solubility

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

solubility

-

optimum pH

6.3-8.8

optimum pH

-

optimum pH

-

optimum pH

-

mol wt

68,000 to 125,000

mol wt

68-130 kDa

mol wt

68-130 kDa

mol wt

68-130 kDa

storage temp.

2-8°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

2-8°C

storage temp.

−20°C


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pictograms

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Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves



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質問

1–8/8 質問  
  1. How can I check the activity of product C0103?

    1 回答
    1. The minimum activity of this product is 125 units per milligram. The specific method used to determine the activity of this material is considered proprietary. However, a geneeral activity protocol is available at the following link:
      https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/protocol/protein-biology/enzyme-activity-assays/enzymatic-assay-of-collagenase-using-n-3-2furylacryloyl-leu-gly-pro-ala?srsltid=AfmBOoq8fzW3O4ksOh8nr0Xe0DToP1T4FK6HnZuy5XtgfWRllrpdEHKV

      Please see the following link to review a sample or lot specific Certificate of Analysis:
      https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/c0130#product-documentation

      役に立ちましたか?

  2. Can collagenase be added to dissolve natural collagen fibers in dissolvable sutures like catgut? Also, is item C0130 suitable for this purpose?

    1 回答
    1. Upon verification, there is currently no collagenase product tested with catgut suture as a substrate. However, literature suggests that digestion of dissolvable sutures (collagen or catgut) is achievable using collagenase. Additionally, one might consider adding pepsin for the hydrolysis of catgut, as suggested by a publication where pepsin (pH 1.6) was used alongside collagenase (pH 7.4) to replicate an in vivo environment in an in vitro hydrolysis setting.

      Reference: Biomaterials. 1992;13(7):448-54. doi: 10.1016/0142-9612(92)90165-k. Title: Degradation of collagen suture in vitro and in vivo PMID: 1633219

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  3. Is Product C0130, Collagenase, sterile?

    1 回答
    1. This product does not consist of a sterile preparation of Collagenase. Upon reconstitution, solutions should be sterile filtered through a 0.22 micron filter.

      役に立ちましたか?

  4. How should Product C0130, Collagenase, be prepared for use in tissue digestions?

    1 回答
    1. For use in tissue culture applications, Collagenase can be solubilized in calcium-free solutions such as Hanks Balanced Salts (H2387) or Earl's' Balanced Salt Solution (E6267).

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  5. What is the activity of the lot number of Product C0130, Collagenase, which I have?

    1 回答
    1. The activity and specific activity for each lot number can be obtained from the certificate of analysis.

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  6. How should I prepare a stock solution of Product C0130, Collagenase?

    1 回答
    1. Stock solutions of crude Collagenase may be prepared at 10 mg/ml of Collagenase in TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM calcium chloride, pH 7.4 at 37°C) and are stable if frozen quickly in aliquots and kept frozen at -20°C. Freeze-thaw cycles will damage the enzyme.

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  7. What type of Collagenases are present in Product C0130, Collagenase,?

    1 回答
    1. This Collagenase is obtained from the culture filtrate of Clostridium histolyticum. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68 - 130 kDa. It does not contain any Matrix Metalloprotease.

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  8. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 回答
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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レビュー

アクティブなフィルタ

  1. Glasgow, UK
    • 2件のレビュー
    • 1件の投票
    星5/5個です。

    Clostridium histolyticum

    Good product. Usefull for cell isolation from heart.

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