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Benzonase^® Nuclease HC

Purity > 99%, Effective Viscosity Reduction and Removal of Nucleic Acids from protein solutions

• Sinónimos: Endonucleasas from Serratia marcescens
• Número CAS: 9025-65-4
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.54
• Número CE: 3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00131010
• Assay: >99% (SDS-PAGE)
• Biological source: Serratia marcescens
• Recombinant: expressed in E. coli
• Concentration: ≥250 units/μL

Propiedades

• Nombre del producto: Benzonase^® Nucleasa HC, Pureza > 99%, Effective Viscosity Reduction and Removal of Nucleic Acids from protein solutions
• biological source: Serratia marcescens
• Quality Level: 100
• recombinant: expressed in E. coli
• assay: >99% (SDS-PAGE)
• form: buffered aqueous glycerol solution
• manufacturer/tradename: Novagen^®
• storage condition: OK to freeze
• concentration: ≥250 units/μL
• impurities: <0.25 EU/kU Total endotoxin
• application(s): research use
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

La nucleasa Benzonase^® es una endonucleasa biotecnológica producida a partir de Serratia marcescens. Degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenarias, bicatenarias, lineales y circulares) pero no tiene actividad proteolítica. Es eficaz en muchas condiciones diversas y posee una actividad específica excepcionalmente elevada. La enzima digiere por completo los ácidos nucleicos a oligonucleótidos de 2 a 5 bases de longitud (por debajo del límite de hibridación) terminados en 5′-monofosfato, lo que es ideal para separar los ácidos nucleicos de las proteínas recombinantes y permite el cumplimiento de las directrices de la FDA sobre contaminación de ácidos nucleicos. La capacidad de Benzonase para hidrolizar rápidamente los ácidos nucleicos hace de la enzima una opción excelente para reducir la viscosidad y el tiempo de procesamiento, y para aumentar el rendimiento proteico. Por ejemplo, la enzima es compatible con los reactivos de extracción de proteínas BugBuster y PopCulture y puede por tanto añadirse junto con esos reactivos para eliminar la viscosidad y quitar los ácidos nucleicos de extractos de E. coli.

La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Es funcional a un pH comprendido entre 6 y 10, y entre 0 y 42°C; además requiere Mg²⁺ 1-2mM para activación. La enzima es también activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1mM), EDTA (1 mM) y urea (su actividad relativa depende de condiciones específicas). Su actividad es inhibida por cationes monovalentes >150 mM, fosfato >100 mM, sulfato de amonio >100 mM o HCl de guanidina >100 mM.

La nucleasa Benzonase está disponible en calidades ultrapura (>99 % mediante SDS-PAGE) y pura (>90 %) a una concentración estándar de 25 - 29 U/µl y a una concentración elevada (HC) de 250 U/µl. Ambas preparaciones están exentas de proteasas detectables y tienen una actividad específica > 1 × 10⁶ U/mg de proteínas. El grado de pureza >99 % se ha probado para endotoxinas y contiene<0.25 EU/1000 units. The product is suppliedas a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol.Store at -20°C.

Total endotoxin:<0.25 EU/1,000 units.Purity: >99% mediante SDS-PAGE.

Application

Utilizado para eliminación de los ácidos nucleicos de las muestras proteicas.

Biochem/physiol Actions

Digiere el ADN y el ARN nativos o desnaturalizados por calor.

Other Notes

Una unidad se define como la cantidad de enzima que causa un ΔA₂₆₀ de 1,0 en 30 minutos, lo que corresponde a la digestión completa de 37 µg de ADN.

Legal Information

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxicidad: Manipulación estándar (A)

Información de seguridad

• Clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids