70664

Benzonase^® Nuclease

Purity > 99%, Effective viscosity reduction and removal of nucleic acids from protein solutions

• Sinónimos: Endonucleasas from Serratia marcescens
• Número CAS: 9025-65-4
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.54
• Número CE: 3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00131010
• Assay: >99% (SDS-PAGE)
• Biological source: Serratia marcescens
• Recombinant: expressed in E. coli
• Concentration: 25-29 units/μL

Propiedades

• Nombre del producto: Nucleasa Benzonase^®, Pureza > 99 %, Effective viscosity reduction and removal of nucleic acids from protein solutions
• biological source: Serratia marcescens
• Quality Segment: 300
• recombinant: expressed in E. coli
• assay: >99% (SDS-PAGE)
• form: buffered aqueous glycerol solution
• manufacturer/tradename: Novagen^®
• storage condition: OK to freeze
• concentration: 25-29 units/μL
• impurities: <0.25 EU/kU Total endotoxin
• input: general use sample(s)
• application(s): research use
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

La nucleasa Benzonase^® es una endonucleasa genotecnológica procedente de Serratia marcescens. Degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenarias, bicatenarias, lineales y circulares) pero no tiene actividad proteolítica. Es eficaz en muchas condiciones diversas y posee una actividad específica excepcionalmente elevada. La enzima digiere por completo los ácidos nucleicos a oligonucleótidos de 2 a 5 bases de longitud (por debajo del límite de hibridación) terminados en 5′-monofosfato, lo que es ideal para separar los ácidos nucleicos de las proteínas recombinantes y permite el cumplimiento de las directrices de la FDA sobre contaminación con ácidos nucleicos. La capacidad de Benzonase para hidrolizar rápidamente los ácidos nucleicos hace de la enzima una opción excelente para reducir la viscosidad y el tiempo de procesamiento, y para aumentar el rendimiento proteico. Por ejemplo, la enzima es compatible con los reactivos de extracción de proteínas BugBuster y PopCulture y puede por tanto añadirse junto con esos reactivos para eliminar la viscosidad y los ácidos nucleicos de los extractos de E. coli.

La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Es funcional a un pH comprendido entre 6 y 10, y de 0 a 42°C; además, requiere Mg²⁺ 1-2 mM para su activación. La enzima es también activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1mM), EDTA (1 mM) y urea (su actividad relativa depende de las condiciones específicas). Su actividad es inhibida por cationes monovalentes > 150 mM, fosfato 100 mM, sulfato de amonio 100 mM o HCl de guanidina >100 mM.

La nucleasa Benzonase está disponible en calidades ultrapura (99 % mediante SDS-PAGE) y pura (90 %) a una concentración estándar de 25 - 29 U/µl y a una concentración elevada (HC) de 250 U/µl. Ambas preparaciones están exentas de proteasas detectables y tienen una actividad específica> 1 × 10⁶ U/mg de proteínas. El grado de pureza > 99 % se prueba para endotoxinas y contiene < 0.25 EU/1000 units. The product is supplied in 50% glycerol. Store at -20&#176;C.



Endotoxinas totales:< 0.25 EU/1,000 units. Purity: > un 99 % mediante SDS-PAGE.

Reducción de la viscosidad efectiva y eliminación de los ácidos nucleicos de las disoluciones proteicas.

Application

Utilizado para eliminación de los ácidos nucleicos de las muestras proteicas.

Biochem/physiol Actions

Digiere el ADN y el ARN nativos o desnaturalizados por calor.

Other Notes

Una unidad se define como la cantidad de enzima que causa un ΔA₂₆₀ de 1,0 en 30 minutos, lo que corresponde a la digestión completa de 37 µg de ADN.

Legal Information

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxicidad: Manipulación estándar (A)

Información de seguridad

• Clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 2