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Merck

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70746

Benzonase® Nuclease

Purity > 90%

Synonyme(s) :

Endonucléase from Serratia marcescens

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ConditionnementRéférenceDisponibilitéPrix

A propos de cet article

Numéro CAS:
UNSPSC Code:
12352202
NACRES:
NA.54
Numéro CE :
MDL number:
Assay:
>90% (SDS-PAGE)
Biological source:
Serratia marcescens
Recombinant:
expressed in E. coli
Concentration:
25-29 units/μL
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Service technique
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Nom du produit

Nucléase Benzonase®, pureté > 90 %,

biological source

Serratia marcescens

Quality Level

recombinant

expressed in E. coli

assay

>90% (SDS-PAGE)

form

buffered aqueous glycerol solution

manufacturer/tradename

Novagen®

storage condition

OK to freeze

concentration

25-29 units/μL

application(s)

research use

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

General description

La nucléase Benzonase® est une endonucléase génétiquement modifiée issue de Serratia marcescens. Elle dégrade toutes les formes d'ADN et d'ARN (simple brin, double brin, linéaire et circulaire) sans présenter la moindre activité protéolytique. Elle est efficace dans une multitude de conditions et possède une activité spécifique exceptionnellement élevée. Cette enzyme digère entièrement les acides nucléiques en oligonucléotides à extrémité 5′-monophosphate de 2 à 5 bases de long (en dessous du seuil d'hybridation), ce qui est idéal pour éliminer les acides nucléiques mélangés aux protéines recombinantes et permet de se conformer aux directives de la FDA concernant la contamination par les acides nucléiques. La capacité de la Benzonase à hydrolyser rapidement les acides nucléiques en fait l'enzyme de choix pour réduire la viscosité et ainsi abaisser le temps de traitement et accroître les rendements en protéine. Par exemple, cette enzyme est compatible avec les réactifs d'extraction protéique BugBuster et PopCulture et peut donc être ajoutée à ces derniers pour faire disparaître la viscosité et éliminer les acides nucléiques des extraits d'E. coli.

L'enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle entre pH 6 et pH 10 et entre 0 °C et 42 °C et son activation nécessite la présence de Mg2+ 1 à 2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d'agents réducteurs, de PMSF (1 mM), d'EDTA (1 mM) et d'urée (l'activité relative dépend des conditions spécifiques). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d'ammonium > 100 mM et le chlorhydrate de guanidine > 100 mM.

La nucléase Benzonase est déclinée en deux qualités, ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %), disponibles en concentration standard (25 à 29 U/µl) ou élevée (250 U/µl). Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et présentent une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. La qualité ultrapure (> 99 %) est testée pour confirmer l'absence d'endotoxines et contient < 0,25 EU/1 000 unités. Le produit est fourni dans du glycérol à 50 %. À conserver à -20 °C.

Endotoxines totales : < 0,25 EU/1 000 unités. Pureté : > 90 % par SDS-PAGE.

Application

Pour l'élimination des acides nucléiques présents dans les échantillons protéiques.

Biochem/physiol Actions

Digère l′ADN et l′ARN endogènes ou dénaturés par voie thermique.

Other Notes

Une unité est définie comme la quantité d'enzyme provoquant un ΔA₂₆₀ de 1,0  en 30 minutes, ce qui correspond à la digestion complète de 37 µg d′ADN.

Legal Information

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxicité : Manipulation standard (A)

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Cet article
7066471205-M71206
biological source

Serratia marcescens

biological source

Serratia marcescens

biological source

Serratia marcescens

biological source

Serratia marcescens

assay

>90% (SDS-PAGE)

assay

>99% (SDS-PAGE)

assay

>90% (SDS-PAGE)

assay

>99% (SDS-PAGE)

form

buffered aqueous glycerol solution

form

buffered aqueous glycerol solution

form

buffered aqueous glycerol solution

form

buffered aqueous glycerol solution

application(s)

research use

application(s)

research use

application(s)

research use

application(s)

research use

concentration

25-29 units/μL

concentration

25-29 units/μL

concentration

≥250 units/μL

concentration

≥250 units/μL

recombinant

expressed in E. coli

recombinant

expressed in E. coli

recombinant

expressed in E. coli

recombinant

expressed in E. coli


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Classe de stockage

10 - Combustible liquids



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Birgitte P S Jacky et al.
PLoS pathogens, 9(5), e1003369-e1003369 (2013-05-23)
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Numéro d'article de commerce international

RéférenceGTIN
369063-5G04061832099712
70746-307790788052805
70746-404055977256949

Questions

1–3 of 3 Questions  
  1. How long can the product be stored at -20°C?

    1 answer
    1. This product is not assigned a firm expiration date. Each lot is assigned a recommended retest date of approximately 1 year from the date of quality release. If sufficient stock remains and the material continues to meet product specifications upon reassay, the retest period is typically extended. While considered stable, the material may be subject to degradation over time. The lot-specific retest date is reported on the Certificate of Analysis.

      Helpful?

  2. How can 70746 Benzofane be inactivated without using NaOH?

    1 answer
    1. Benzonase can be inactivated through various methods such as treatment with NaOH, EDTA and warming with EDTA at 70°C, or guanidine HCl. However, it is important to note that a guanidine HCl concentration exceeding 100 mM can completely inhibit the enzyme activity. Additionally, while an EDTA concentration of 1mM partially inhibits Benzonase endonuclease, a concentration of 5 mM EDTA leads to a loss of over 90% of enzyme activity due to the complexing of the essential Mg2+ ions.

      Helpful?

  3. Can proteinase K be utilized to inactivate Benzonase? This is to prevent further DNA degradation post-sampling. Would it be adequate to treat it with a final concentration of 10 mg/ml of proteinase K for 20 minutes at 55°C?

    1 answer
    1. There is currently no available data on the conditions required for inactivating benzonase by proteinase K. However, it is known that benzonase can be reversibly inactivated by metal ion chelators, such as EDTA and EGTA. Irreversible inactivation can also be achieved through extreme conditions (100 mM NaOH at 70°C for 30 minutes).

      Helpful?

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