71205-M
Benzonase® Nuclease HC
Purity > 90%, Serratia marcescens, buffered aqueous glycerol solution
Synonyme(s) :
Endonucléase from Serratia marcescens
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About This Item
Numéro CAS:
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.54
Produits recommandés
product name
Nucléase Benzonase® HC, de pureté > 90 %,
Source biologique
Serratia marcescens
Niveau de qualité
Produit recombinant
expressed in E. coli
Pureté
>90% (SDS-PAGE)
Forme
buffered aqueous glycerol solution
Fabricant/nom de marque
Novagen®
Conditions de stockage
OK to freeze
Concentration
≥250 units/μL
Application(s)
research use
Température de stockage
−20°C
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Description générale
La nucléase Benzonase® est une endonucléase de Serratia marcescens génétiquement modifiée. Elle dégrade toutes les formes d'ADN et d'ARN (simple brin, double brin, linéaire et circulaire) sans pour autant présenter d'activité protéolytique. Elle est efficace dans une grande diversité de conditions et possède une spécificité exceptionnellement élevée. Cette enzyme digère entièrement les acides nucléiques en oligonucléotides à extrémité 5′-monophosphate de 2 à 5 bases de long (en dessous du seuil d'hybridation), ce qui est idéal pour éliminer les acides nucléiques mélangés aux protéines recombinantes et respecter les directives de la FDA concernant la contamination par les acides nucléiques. La capacité de la Benzonase® à hydrolyser rapidement les acides nucléiques en fait l'enzyme de choix pour diminuer la viscosité afin de réduire le temps de traitement et d'accroître les rendements en protéine. Par exemple, cette enzyme est compatible avec les réactifs d'extraction protéique BugBuster® et PopCulture® ; elle peut donc être ajoutée avec ces réactifs pour supprimer la viscosité et éliminer les acides nucléiques d'extraits d'E. coli.
L'enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle entre pH 6 et pH 10 et entre 0 °C et 42 °C et son activation nécessite la présence de Mg2+ 1 à 2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d'agents réducteurs, de PMSF (1 mM), d'EDTA (1 mM) et d'urée (son activité relative dépend des conditions). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d'ammonium > 100 mM ou le chlorhydrate de guanidine > 100 mM.
La nucléase Benzonase® est déclinée en deux qualités, ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %), disponibles en concentration standard (25 à 29 U/μl) ou élevée (250 U/μl). Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et présentent une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. La qualité ultrapure (> 99 %) est soumise à une recherche d'endotoxines et contient < 0,25 EU/1 000 unités. Le produit se présente sous la forme d'une solution filtrée à 0,2 μm dans du glycérol à 50 %. À conserver à -20 °C.
Endotoxines totales : < 0.25 EU/1,000 units. Purity : > 90 % par SDS-PAGE.
L'enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle entre pH 6 et pH 10 et entre 0 °C et 42 °C et son activation nécessite la présence de Mg2+ 1 à 2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d'agents réducteurs, de PMSF (1 mM), d'EDTA (1 mM) et d'urée (son activité relative dépend des conditions). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d'ammonium > 100 mM ou le chlorhydrate de guanidine > 100 mM.
La nucléase Benzonase® est déclinée en deux qualités, ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %), disponibles en concentration standard (25 à 29 U/μl) ou élevée (250 U/μl). Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et présentent une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. La qualité ultrapure (> 99 %) est soumise à une recherche d'endotoxines et contient < 0,25 EU/1 000 unités. Le produit se présente sous la forme d'une solution filtrée à 0,2 μm dans du glycérol à 50 %. À conserver à -20 °C.
Endotoxines totales : < 0.25 EU/1,000 units. Purity : > 90 % par SDS-PAGE.
Application
Pour l'élimination des acides nucléiques présents dans les échantillons protéiques.
Actions biochimiques/physiologiques
Digère l′ADN et l′ARN endogènes ou dénaturés par voie thermique.
Avertissement
La nucléase Benzonase® est une endonucléase génétiquement modifiée issue de Serratia marcescens. Elle dégrade toutes les formes d′ADN et d′ARN (simple brin, double brin, linéaire et circulaire) mais ne présente aucune activité protéolytique. Elle est active dans une grande gamme de conditions et possède une activité spécifique exceptionnellement élevée. L′enzyme digère complètement les acides nucléiques en oligonucléotides à extrémité 5′-monophosphate de 2 à 5 bases de longueur (en-dessous de la limite d′hybridation), ce qui est idéal pour éliminer les acides nucléiques mélangés aux protéines recombinantes et permet de se conformer aux directives de la FDA en matière de contamination par les acides nucléiques. La capacité de la Benzonase à hydrolyser rapidement les acides nucléiques en fait l′enzyme de choix pour réduire la viscosité, et ainsi abaisser le temps de traitement et accroître les rendements en protéine. Par exemple, cette enzyme est compatible avec les réactifs d′extraction protéique BugBuster et PopCulture et peut donc être ajoutée à ces derniers pour faire disparaître la viscosité et éliminer les acides nucléiques des extraits d′E. coli.
L′enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle de pH 6 à pH 10 et de 0 à 42 °C, et est activée à l′aide de Mg2+ 1-2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d′agents réducteurs, de PMSF(1 mM), d′EDTA (1 mM) et d′urée (l′activité relative dépend des conditions spécifiques). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d′ammonium > 100 mM et l′hydrochlorure de guanidine > 100 mM.
La nucléase Benzonase est disponible en qualités ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %) à une concentration standard de 25-29 U/µl et une concentration haute de 250 U/µl. Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et ont une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. Le produit, d′une pureté > 99 %, est testé pour confirmer l′absence d′endotoxines et contient < 0.25 EU/1000 units. The product is supplied as a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol. Store at -20°C.
Endotoxines totales :< 0.25 EU/1,000 units.Pureté : > 90% par SDS-PAGE.
L′enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle de pH 6 à pH 10 et de 0 à 42 °C, et est activée à l′aide de Mg2+ 1-2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d′agents réducteurs, de PMSF(1 mM), d′EDTA (1 mM) et d′urée (l′activité relative dépend des conditions spécifiques). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d′ammonium > 100 mM et l′hydrochlorure de guanidine > 100 mM.
La nucléase Benzonase est disponible en qualités ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %) à une concentration standard de 25-29 U/µl et une concentration haute de 250 U/µl. Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et ont une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. Le produit, d′une pureté > 99 %, est testé pour confirmer l′absence d′endotoxines et contient < 0.25 EU/1000 units. The product is supplied as a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol. Store at -20°C.
Endotoxines totales :< 0.25 EU/1,000 units.Pureté : > 90% par SDS-PAGE.
Définition de l'unité
Une unité équivaut à la quantité d'enzyme qui donne une absorbance à 260 nm (A260) de 1,0 en 30 minutes, soit la digestion complète de 37 μg d'ADN.
Informations légales
BUGBUSTER is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
POPCULTURE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Code de la classe de stockage
10 - Combustible liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Certificats d'analyse (COA)
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