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Merck

Controlled Endolysosomal Release of Agents by pH-responsive Polymer Blend Particles.

Pharmaceutical research (2015-01-17)
Xi Zhan, Kenny K Tran, Liguo Wang, Hong Shen
ZUSAMMENFASSUNG

A key step of delivering extracellular agents to its intracellular target is to escape from endosomal/lysosomal compartments, while minimizing the release of digestive enzymes that may compromise cellular functions. In this study, we examined the intracellular distribution of both fluorecent cargoes and enzymes by a particle delivery platform made from the controlled blending of poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) and a random pH-sensitive copolymer. We utilized both microscopic and biochemical methods to semi-quantitatively assess how the composition of blend particles affects the level of endosomal escape of cargos of various sizes and enzymes into the cytosolic space. We demonstrated that these polymeric particles enabled the controlled delivery of cargos into the cytosolic space that was more dependent on the cargo size and less on the composition of blend particles. Blend particles did not induce the rupture of endosomal/lysosomal compartments and released less than 20% of endosomal/lysosomal enzymes. This study provides insight into understanding the efficacy and safety of a delivery system for intracellular delivery of biologics and drugs. Blend particles offer a potential platform to target intracellular compartments while potentially minimizing cellular toxicity.

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Dimethylsulfoxid, Hybri-Max, sterile-filtered, BioReagent, suitable for hybridoma, ≥99.7%
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Dimethylsulfoxid, for molecular biology
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Dimethylsulfoxid, sterile-filtered, BioPerformance Certified, meets EP, USP testing specifications, suitable for hybridoma
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Dimethylsulfoxid, ≥99.5% (GC), suitable for plant cell culture
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DAPI, for nucleic acid staining
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Formaldehyd -Lösung, for molecular biology, 36.5-38% in H2O
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Schwefelsäure, 99.999%
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Digitonin, Used as non-ionic detergent
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2,2′-Azobis(2-Methylpropionitril), 98%
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N,N′-Dicyclohexylcarbodiimid, 99%
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Dimethylsulfoxid, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
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Magnesiumsulfat, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture
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Formaldehyd -Lösung, for molecular biology, BioReagent, ≥36.0% in H2O (T)
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Methacrylsäure-2-(dimethylamino)-ethylester, contains 700-1000 ppm monomethyl ether hydroquinone as inhibitor, 98%
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Calcein, Used for the fluorometric determination of calcium and EDTA titration of calcium in the presence of magnesium.
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Phenylessigsäure, 99%
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Diethylether
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Magnesiumsulfat -Lösung, for molecular biology, 1.00 M±0.04 M
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Dimethylsulfoxid, PCR Reagent
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Butylmethacrylat, 99%, contains monomethyl ether hydroquinone as inhibitor
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Digitonin, ~50% (TLC)
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Kaliumhydroxid, anhydrous, ≥99.95% trace metals basis
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Dichlormethan, anhydrous, ≥99.8%, contains 40-150 ppm amylene as stabilizer
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N,N-Diisopropylethylamin, ReagentPlus®, ≥99%
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Formaldehyd -Lösung, ACS reagent, 37 wt. % in H2O, contains 10-15% Methanol as stabilizer (to prevent polymerization)
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Tetrahydrofuran, anhydrous, ≥99.9%, inhibitor-free
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Methanol, anhydrous, 99.8%
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Tetrahydrofuran, anhydrous, contains 250 ppm BHT as inhibitor, ≥99.9%
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Magnesiumsulfat -Lösung, BioUltra, for molecular biology
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Dimethylsulfoxid, anhydrous, ≥99.9%
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