E3132

E-64

synthetic (organic), ≥98% (HPLC), cysteine protease inhibitor, powder

• Synonym(e): trans-Epoxysuccinyl-L-leucylamido(4-guanidino)butan, L-trans-3-Carboxyoxiran-2-carbonyl-L-leucylagmatin, N-(trans-Epoxysuccinyl)-L-leucin-4-guanidinobutylamid
• Empirische Formel (Hill-System): C₁₅H₂₇N₅O₅
• CAS-Nummer: 66701-25-5
• Molekulargewicht: 357.41
• NACRES: NA.77
• PubChem Substance ID: 24278411
• UNSPSC Code: 12352202
• MDL number: MFCD00080261
• Beilstein/REAXYS Number: 1405664

Eigenschaften

• Produktname: E-64, protease inhibitor
• biological source: synthetic (organic)
• Quality Segment: 300
• assay: ≥98% (HPLC)
• form: powder
• solubility: water: 20 mg/mL, clear, colorless to faintly yellow
• storage temp.: 2-8°C
• SMILES string: CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H]1O[C@H]1C(O)=O)C(=O)NCCCCNC(N)=N
• InChI: 1S/C15H27N5O5/c1-8(2)7-9(20-13(22)10-11(25-10)14(23)24)12(21)18-5-3-4-6-19-15(16)17/h8-11H,3-7H2,1-2H3,(H,18,21)(H,20,22)(H,23,24)(H4,16,17,19)/t9-,10+,11+/m0/s1
• InChI key: LTLYEAJONXGNFG-HBNTYKKESA-N

Beschreibung

General description

E-64 ist ein Cysteinproteasehemmer, der aus dem Schimmelpilz Aspergillus japonicus TPR-64 isoliert wurde. E-64 ist auch als N-[N-(L-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-leucyl]-agmatin bekannt. E-64 kann effektiv verschiedene Cysteinproteasen hemmen, insbesondere:

• Cathepsin K
• Cathepsin L
• Cathepsin S

E-64 wirkt auch gegen andere Enzyme, beispielsweise:

• Calpain
• Cathepsin B
• Cathepsin H
• Papain

Application

E-64 ist ein wirkungsvoller Ligand zur Affinitätsaufreinigung von Cysteinproteasen. Durch Kopplung mit einer thiolierten Affinitätsmatrix ist die Bindung nicht mehr irreversibel, die Spezifität wird aber beibehalten.

Biochem/physiol Actions

E-64 ist ein irreversibler, wirksamer und hochspezifischer Cysteinproteaseninhibitor. E-64 reagiert nicht mit der funktionellen Thiol-Gruppe der Nichtproteaseenzyme wie z. B. L-Lactatdehydrogenase oder Kreatinkinase. Im Gegensatz zu anderen Cysteinproteaseninhibitoren wie beispielsweise Leupeptin und Antipain werden Serinproteasen (außer Trypsin) nicht von E-64 gehemmt. Die Trans-Epoxysuccinyl-Gruppe (aktive Gruppe) von E-64 bindet irreversibel an die aktive Thiol-Gruppe von vielen Cysteinproteasen wie beispielsweise Papain, Actinidase und Cathepsin B, H und L, um eine Thioether-Bindung einzugehen. E-64 ist ein sehr nützlicher Cysteinproteaseninhibitor für die Anwendung in In-vivo-Studien, weil es eine spezifische Hemmung, eine gute Zell- und Gewebepermeabilität und eine geringe Toxizität aufweist.

Effektiver irreversibler Hemmer von Cysteinproteasen, der sich nicht auf Cysteinrückstände in anderen Enzymen auswirkt oder mit Thiolen mit geringem Molekulargewicht wie z. B. Calpain und Cathepsin B reagiert. Effektive Konzentration 1–10 μM.

Preparation Note

E-64 ist in Wasser löslich. Eine Lösung von 20 mg/mL kann in Wasser zubereitet werden (Erwärmung evtl. erforderlich). Eine empfohlene Stammlösung ist eine wässrige 1-mM-Lösung. Die effektive Konzentration für die Verwendung als Proteasehemmer beträgt 1 bis 10 μM. Wässrige Stammlösungen sind bei -20 °C monatelang stabil. Verdünnte Lösungen sind bei einem neutralen pH-Wert tagelang stabil. E-64 ist von pH 2 bis 10 stabil, in Ammoniak oder HCl aber unstabil. E-64 ist auch in DMSO löslich; eine 10-mM-Lösung kann in trockenem DMSO hergestellt und bei -20 °C aufbewahrt werden. Darauffolgende Verdünnungen erfolgten in Kulturmedium. Injektionslösungen werden durch Auflösen von E-64 in 0,9 % Natriumchlorid oder in einer Mindestmenge an gesättigtem Natriumbicarbonat mit anschließender Verdünnung mit 0,9% Natriumchlorid zubereitet (nach Anpassen des pH-Werts auf 7,0 mithilfe von Essigsäure).

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)